樹豆酮酸A對人肝微粒體中5種常見細胞色素P450酶的體外抑制作用研究

陳瑞 周維 張麗 朱高峰 黃靜 湯磊

摘 要 目的：研究樹豆酮酸A對人肝微粒體中的5種細胞色素P450（CYP）酶的體外抑制作用。方法：采用Cocktail探針藥物法，在人肝微粒體中加入50.0、15.0、5.0、1.5、0.5、0.15、0.05 μmol/L的樹豆酮酸A，與混合探針藥物[包含非那西丁、右美沙芬、奧美拉唑、睪酮、甲苯磺丁脲（分別為CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9的探針藥物）]共同孵育60 min。在另設(shè)空白組和陽性對照組[α-萘黃銅、奎尼丁、（+）-N-3-芐基香酚、酮康唑、磺胺苯吡唑（分別為CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9的特異性抑制劑）]的基礎(chǔ)上，以葛根素為內(nèi)標，采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（UPLC-MS/MS）分析相應(yīng)代謝產(chǎn)物（對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲）的含量。以ACQUITY UPLC?BEH C18為色譜柱，以0.01%甲酸水溶液-0.01%甲酸乙腈為流動相（梯度洗脫），柱溫為40 ℃，流速為0.4 mL/min，進樣量為2 μL;采用電噴霧電離源，以多反應(yīng)監(jiān)測模式進行正負離子掃描，數(shù)據(jù)采集范圍為m/z 100～1 200，碰撞氣為氬氣，霧化氣為氮氣，錐孔氣流量為50 L/h，脫溶劑氣流量為800 L/h，正、負離子模式下毛細管電壓分別為2.0、1.5 kV，離子源溫度分別為120、110 ℃，脫溶劑的溫度分別為400、450 ℃。使用Graphpad Prism 5.0軟件進行非線性回歸分析并計算半數(shù)抑制濃度（IC50）。結(jié)果：上述各代謝產(chǎn)物檢測濃度的線性范圍分別為0.26～8.35、0.36～34.56、0.10～3.09、3.67～117.37、0.15～4.88 μmol/L（R2>0.99），定量下限分別為0.26、0.36、0.10、3.67、0.15 μmol/L。陽性對照組特異性抑制劑對人肝微粒體中CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9酶的IC50均在文獻報道的可接受范圍內(nèi)。樹豆酮酸A對人肝微粒體中CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4酶的IC50值均大于50 μmol/L，對CYP2C9、CYP2C19酶的IC50值分別為4.94、18.00 μmol/L。結(jié)論：樹豆酮酸A對人肝微粒體中CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4酶沒有抑制作用，對CYP2C9、CYP2C19酶有一定的抑制作用。

關(guān)鍵詞 樹豆酮酸A;人肝微粒體;細胞色素P450酶;Cocktail探針藥物法;超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法;特異性抑制劑;抑制作用

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To study the inhibitory effects of cajanonic acid A on 5 kinds of cytochrome P450 （CYP） enzyme， in human liver microsomes in vitro. METHODS： By Cocktail probe substrate method， 50.0， 15.0， 5.0， 1.5， 0.5， 0.15， 0.05 μmol/L cajanonic acid A were added into liver microsomes， and incubated with mixed probe substrates [including phenacetin， dextromethorphan， omeprazole， testosterone and toluenesulfonbutylurea （probe substrates of CYP1A2， CYP2D6， CYP2C19， CYP3A4， CYP2C9， respectively）]. On the basis of setting up blank group and positive control group [α-naphthalene brass， quinidine， （+）-N-3-benzyl vanillin， ketoconazole and sulfabendazole （specific inhibitors of CYP1A2， CYP2D6， CYP2C19， CYP3A4， CYP2C9， respectively）]， using puerarin as internal standard， UPLC-MS/MS method was adopted to determine the contents of corresponding metabolites （acetaminophen， dextrophane， 5-hydroxy omeprazole， 6β-hydroxytestosterone， hydroxytolbutamide）. The determination was performed on ACQUITY UPLC? BEH C18 column， with mobile phase consisted of 0.01% formic acid aqueous solution-0.01% acetonitrile formic acid （gradient elution） at the flow rate of 0.4 mL/min. The column temperature was 40 ℃， and the sample size was 2 μL. An electrospray ionization source was used to conduct positive and negative ion scanning in the multiple reaction monitoring mode. The data acquisition range was m/z 100-1 200， the collision gas was argon， the atomized gas was nitrogen， the gas flow rate of the cone hole was 50 L/h， the desorption gas flow rate was 800 L/h， the capillary voltage under positive and negative mode was 2.0， 1.5 kV， and the ion source temperature was 120 ℃， 110 ℃， respectively. The desolvent temperature were 400 ℃ and 450 ℃， respectively. Non linear regression analysis was performed by using Graphpad Prism 5.0 software and IC50 was calculated. RESULTS： The linear ranges of above metabolifes were 0.26-8.35， 0.36-34.56， 0.10-3.09， 3.67-117.37， 0.15-4.88 μmol/L （R2>0.99）. The limits of quantitation were 0.26， 0.36， 0.10， 3.67， 0.15 μmol/L， respectively. The IC50 values of specific inhibitors in positive control group to CYP1A2，CYP2D6， CYP2C19， CYP3A4 and CYP2C9 in human liver microsomes were all within the acceptable range reported in the literature. The IC50 values of cajanonic acid A to CYP1A2， CYP2D6 and CYP3A4 in human liver microsomes were all more than 50 μmol/L， and the IC50 values of CYP2C9 and CYP2C19 were 4.94 and 18.00 μmol/L， respectively. CONCLUSIONS： Cajanonic acid A has no inhibitory effect on CYP1A2，CYP2D6 and CYP3A4， but has a certain inhibitory effect on CYP2C9 and CYP2C19.

KEYWORDS? ?Cajanonic acid A; Human liver microsome; Cytochrome P450 entyme; Cocktail probe substrate method; UPLC-MS/MS; Specific inhibitor; Inhibition effect

中圖分類號 R285.5 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2021）02-0195-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.02.12

樹豆酮酸A（Cajanonic acid A，結(jié)構(gòu)式見圖1）是從豆科植物樹豆Cajanus cajan（Linn.）Millsp.中提取的一種菧類化合物[1]。已有研究表明，該化合物具有降血糖活性，對2型糖尿病（T2DM）具有良好治療作用，而且體內(nèi)、體外研究均證實其對過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）和蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）具有抑制作用[2-4]，且可能是通過抑制胰島素抵抗和降低體質(zhì)量來治療T2DM[5-6];同時，其還可降低血清總膽固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白膽固醇水平[7]。由此可見，樹豆酮酸A具有重要的開發(fā)價值。

藥物代謝的主要場所是肝臟，其中細胞色素P450（CYP）酶為主要的代謝酶，其亞型CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP3A4參與了體內(nèi)80%以上的藥物代謝[8]。CYP酶是一個多功能的酶系，在體內(nèi)具有可誘導性和可抑制性[9-10]。該酶與藥物的相互作用能夠在所有的體內(nèi)過程（包括吸收、分布、代謝和排泄）中發(fā)生，其中以代謝過程最為突出，約占40%[11-12]?？梢姡芯克幬飳YP酶的影響具有重要意義，也是藥物臨床前研究的重要步驟，可為后期研究提供其抑制效果與誘導效果的相關(guān)信息。肝微粒體法是研究體外藥物代謝的常用方法，該方法具有操作簡單、重復性好等的特點[13]?；诖?，本研究采用肝微粒體法，運用Cocktail探針藥物法和超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）考察樹豆酮酸A對人肝微粒體中5種常見CYP酶的體外影響，旨在為后續(xù)該化合物的臨床前研究或新藥研發(fā)提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

本文所用儀器如下：Xevo G2-XS型超高效液相色譜-四極桿串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜儀（美國Waters公司）、X1型高速離心機（香港基因有限公司）、KH-600E型超聲波清洗器（昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）、優(yōu)普系列超純水機（四川優(yōu)普超純科技有限公司）、FA805N型十萬分之一電子天平（上海菁海儀器有限公司）、DW-86L486型超低溫保存箱（海爾集團公司）。

1.2 藥品與試劑

樹豆酮酸A對照品（批號20181226，純度>98%）由貴州醫(yī)科大學藥物化學重點實驗室制備，葛根素對照品（內(nèi)標，批號528C021，純度>98%）、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉（NADP-Na2，批號718B0225，純度≥98%）、葡萄糖-6-磷酸-二鈉（G-6-P-Na2，批號116B039，純度≥98%）、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-P- DH，批號20160725，純度90%）、磷酸鹽緩沖液（PBS，濃度0.01 mol/L，pH7.4，批號409L024）均購自北京索萊寶科技有限公司，右美沙芬對照品（批號01155029-75469A，純度≥98%）購自上海泰坦科技股份有限公司，非那西丁對照品（批號81105，純度>98%）購自美國Sigma公司，奧美拉唑、甲苯磺丁脲、睪酮、對乙酰氨基酚、（+）-N-3- 芐基香酚、奎尼丁、磺胺苯吡唑、酮康唑和α-萘黃酮等對照品（批號100367-201305、100369-201307、L31J8T40939、SJ0711GA14、L27J9B64115、J09M6B1、A22M10L83645、100294-201203、B20083，純度≥98%）均購自上海源葉生物科技有限公司，右啡烷對照品（批號FK-J1795，純度>98%）購自上海樊克生物科技有限公司，羥基甲苯磺丁脲、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮等對照品（批號1-PSB-27-2、1-PSB-27-2、KIT0635，純度≥98%）均購自加拿大TRC公司;甲酸、甲醇、乙腈均為色譜純，氯化鎂、檸檬酸鈉等其余試劑均為分析純或?qū)嶒炇页Ｓ靡?guī)格，水為蒸餾水。

1.3 其他

男性健康蒙古利亞人種肝微粒體購自武漢普萊特生物醫(yī)藥有限公司，批號為M10001.2017003。

2 方法與結(jié)果

2.1 樹豆酮酸A和內(nèi)標溶液的制備

精密稱取樹豆酮酸A對照品適量，用甲醇溶解并定容，配制成質(zhì)量濃度為2.8 mmol/L的貯備液;取葛根素對照品適量，同法制得質(zhì)量濃度為4 μg/mL內(nèi)標溶液。上述溶液均于4 ℃下保存，備用。臨用前，將樹豆酮酸A貯備液用甲醇稀釋，配制成質(zhì)量濃度分別為50.0、15.0、5.0、1.5、0.5、0.15、0.05 μmol/L的溶液。

2.2 還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）輔酶溶液的制備

參照文獻[14]方法，依次稱取NADP-Na2、G-6-P-Na2和氯化鎂 200、200、133 mg，用水溶解并定容至10 mL，置于-20 ℃下保存?zhèn)溆?，記為A液。依次稱取檸檬酸鈉和G-6-P-DH 44 mg、1 000 U，用水溶解并定容至25 mL，置于-20 ℃下保存?zhèn)溆?，記為B液。使用時，將A液和B液按體積比5 ∶ 1混勻后，加至孵育體系中。

2.3 混合探針藥物溶液的制備

參照文獻[15]方法，精密稱取非那西丁、右美沙芬、奧美拉唑、睪酮、甲苯磺丁脲（分別為CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9的探針藥物）對照品7.557、12.3、4.32、7.21、13.5 mg，用甲醇溶解并定容至10 mL，作為探針藥物貯備液。臨用前，精密吸取上述探針藥物貯備液各1 mL，用氮氣流吹干，殘渣加入二甲基亞砜（DMSO）20 μL和甲醇80 μL溶解，最后用PBS定容至5 mL，制備成非那西丁、右美沙芬、奧美拉唑、睪酮、甲苯磺丁脲質(zhì)量濃度分別為1 000、1 500、250、500、1 000 μmol/L的混合探針藥物溶液。

2.4 特異性抑制劑溶液的制備

分別精密稱取溶液α-萘黃酮、奎尼丁、（+）-N-3-芐基香酚、酮康唑、磺胺苯吡唑（分別為CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9的特異性抑制劑）對照品適量，用甲醇溶解、稀釋，制成質(zhì)量濃度均為1 mg/mL的單一貯備液。臨用時，用甲醇稀釋上述單一貯備液，配制成質(zhì)量濃度分別為0.136、0.162、0.088、0.266、0.157 mg/mL的溶液，備用。

2.5 代謝產(chǎn)物標準溶液的制備

分別精密稱取適量對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲（分別為非那西丁、右美沙芬、奧美拉唑、睪酮、甲苯磺丁脲的代謝物）等5種對照品，用甲醇溶解、稀釋，制成質(zhì)量濃度均為1 mg/mL的單一貯備液。臨用時，用甲醇將上述單一貯備液稀釋至相應(yīng)質(zhì)量濃度，備用。

2.6 肝微粒體體外孵育體系的建立

參照文獻[16]方法，取人肝微粒體適量，用PBS稀釋至0.5 g/L。于冰浴條件下，依次加入人肝微粒體溶液20 μL、PBS 110 μL、相應(yīng)濃度的樹豆酮酸A或特異性抑制劑溶液20 μL、NADPH輔酶溶液（A液25 μL+B液5 μL）30 μL，于37 ℃水浴中孵育3 min;加入混合探針藥物溶液20 μL開始反應(yīng)，反應(yīng)時間為60 min。每濃度平行3份。試驗過程中，確保孵育體系總體積為200 μL（PBS濃度100 mmol/L），其中溶解探針藥物的DMSO含量不超過0.1%，甲醇含量不超過1%[17]。

2.7 UPLC-MS/MS法的建立

2.7.1 樣品處理 于體外孵育體系中加入冰乙腈（含0.4 mg/mL葛根素）200 μL終止反應(yīng)，渦旋60 s后，以13 000 r/min（下同）離心10 min，取上清液，用氮氣流吹干，殘渣用甲醇200 μL復溶，再次離心10 min，取上清液適量，對乙酰氨基酚等代謝產(chǎn)物進行UPLC-MS/MS分析。

2.7.2 色譜與質(zhì)譜條件 （1）色譜條件：以Acquity UPLC?BEH C18（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）為色譜柱，流動相為0.01%甲酸水溶液-0.01%甲酸乙腈為流動相進行梯度洗脫（洗脫程序見表1），柱溫為40 ℃，流速為0.4 mL/min，進樣量為2 μL。（2）質(zhì)譜條件：以電噴霧電離源（ESI）為離子源，掃描模式為多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式，掃描方式為正、負離子，數(shù)據(jù)采集范圍為m/z 100～1 200，毛細管電壓為2.0 kV（正離子模式）、1.5 kV（負離子模式），離子源溫度為120 ℃（正離子模式）、110 ℃（負離子模式），脫溶劑的溫度為400 ℃（正離子模式）、450 ℃（負離子模式），碰撞氣為氬氣，霧化氣為氮氣，錐孔氣流量為50 L/h，脫溶劑氣流量為800 L/h，5個探針藥物代謝產(chǎn)物及內(nèi)標的質(zhì)譜監(jiān)測參數(shù)見表2。采用甲酸鈉（0.5 mmol/L）和亮氨酸腦啡肽（1 ng/mL）分別進行質(zhì)量軸的校正和質(zhì)量的實時校正。

2.7.3 專屬性考察 取肝微粒體孵育液，除不加探針藥物和內(nèi)標外，其余按“2.6”“2.7.1”項下方法處理后，再按“2.7.2”項下色譜和質(zhì)譜條件進樣測定，記錄色譜圖;將“2.5”項下的代謝產(chǎn)物標準溶液加入至滅活的肝微粒體孵育液中，按“2.6”“2.7.1”項下方法處理后，同法進樣測定，記錄色譜圖;取“2.6”項下肝微粒體孵育液（5.0 μmol/L的樹豆酮酸A），按“2.7.1”項下方法處理后，同法進樣測定，記錄色譜圖。結(jié)果，空白肝微粒體對對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲和內(nèi)標的測定無干擾，專屬性良好，詳見圖2。

2.7.4 線性關(guān)系考察 分別吸取對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲單一貯備液適量，用甲醇稀釋，配制成對乙酰氨基酚質(zhì)量濃度分別為0.26、0.52、1.04、2.09、4.18、8.35 μmol/L，右啡烷分別為0.36、1.44、4.32、8.64、17.28、34.56 μmol/L，5-羥基奧美拉唑分別為0.10、0.19、0.38、0.77、1.54、3.09 μmol/L，6β-羥基睪酮分別為3.67、7.34、14.68、29.34、58.68、117.37 μmol/L，羥基甲苯磺丁脲分別為0.15、0.30、0.61、1.22、2.44、4.88 μmol/L的系列溶液，按“2.7.1”項下方法處理后，再按“2.7.2”項下色譜與質(zhì)譜條件進樣測定，記錄峰面積。以上述待測成分質(zhì)量濃度（x，μmol/L）為橫坐標、其與內(nèi)標峰面積之比（y）為縱坐標進行線性回歸分析，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，肝微粒體孵育體系中對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲的線性關(guān)系良好（R2>0.99），定量下限分別為0.26、0.36、0.10、3.67、0.15 μmol/L。

2.7.5 準確度、精密度、穩(wěn)定性和基質(zhì)效應(yīng)考察 按“2.6”項下方法分別配制定量下限和低、中、高質(zhì)量濃度（濃度按預試驗結(jié)果設(shè)置）對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲的孵育體系，每個濃度平行5份，按“2.7.1”項下方法處理樣品后進樣測定，考察準確度和日內(nèi)精密度;每日測定1次、連續(xù)測定3 d，考察日間精密度。樣品處理后室溫放置12 h后進樣測定，考察穩(wěn)定性。另取空白肝微粒孵育體系200 μL，置于2 mL EP管內(nèi)，按“2.7.1”項下方法處理樣品后，用氮氣流吹干，分別加入對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲標準溶液適量，使其質(zhì)量濃度與上述樣品對應(yīng)，每個濃度平行5份，進樣測定，記錄峰面積（A1）;以甲醇配制相應(yīng)濃度且不含輔酶溶液的代謝產(chǎn)物標準溶液，按“2.7.1”項下方法處理后進樣測定，記錄峰面積（A2），計算基質(zhì)效應(yīng)，基質(zhì)效應(yīng)（%）=A1/A2×100%。結(jié)果，肝微粒體孵育體系中對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮、羥基甲苯磺丁脲的準確度為（87.04±8.62）%～（102.37±4.85）%，日內(nèi)、日間精密度試驗和12 h穩(wěn)定性試驗的RSD均小于10.0%;基質(zhì)效應(yīng)為（84.22±3.58）%～（102.42±6.51）%，表明該方法準確、可靠、重現(xiàn)性好，詳見表4。

2.8 體外孵育試驗

體外孵育試驗設(shè)置試驗組、空白組、陽性對照組，每組平行3次。按“2.6”項下方法制備孵育體系，試驗組孵育體系中分別加入質(zhì)量濃度為50.0、15.0、5.0、1.5、0.5、0.15、0.05 μmol/L的樹豆酮酸A溶液，陽性對照組孵育體系中分別加入“2.4”項下的α-萘黃酮、奎尼丁、（+）-N-3-芐基香酚、酮康唑、磺胺苯吡唑溶液，空白組孵育體系中加入等體積的PBS。按“2.7.1”項下方法處理后，按“2.7”項下方法分析各探針藥物對應(yīng)的代謝產(chǎn)物對乙酰氨基酚、右啡烷、5-羥基奧美拉唑、6β-羥基睪酮和羥基甲苯磺丁脲的含量。以空白組代謝產(chǎn)物的含量記為c0，其余各組的代謝產(chǎn)物含量記為cx，計算剩余酶活性，剩余酶活性（%）=（1-cx/c0）×100%。以樹豆酮酸A的質(zhì)量濃度（x，μmol/L）為橫坐標、剩余酶活性（y，%）為縱坐標，使用Graphpad Prism 5.0軟件進行非線性回歸分析并計算半數(shù)抑制濃度（IC50）。肝微粒體中CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9酶的剩余酶活性-樹豆酮酸A濃度曲線見圖3，樹豆酮酸A和特異性抑制劑對人肝微粒體中CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9的IC50見表5。

由表5結(jié)果可知，陽性對照組的特異性抑制劑對肝微粒體中CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9酶的IC50均在可接受范圍內(nèi)，表明本試驗中的孵育體系可行。樹豆酮酸A在50.0～0.05 μmol/L濃度范圍內(nèi)對肝微粒體中CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4酶沒有抑制作用，其IC50>50 μmol/L;對CYP2C9、CYP2C19酶有一定的抑制作用，其IC50分別為4.94、18.00 μmol/L。

3 討論

與體內(nèi)代謝研究比較，體外代謝研究具有成本低廉，操作方法簡便、快速，結(jié)果重現(xiàn)性好等優(yōu)點，適用于新藥研發(fā)候選化合物代謝行為的早期研究及篩選[18]。近年來，隨著檢測方法靈敏度和特異性的不斷提高，Cocktail探針藥物法在各個領(lǐng)域研究中的應(yīng)用越來越廣泛。Cocktail探針藥物法是指給予不同劑量的探針藥物，以測定每種探針藥物代謝產(chǎn)物生成率的方法[18-19]。本研究對樹豆酮酸A在肝微粒體中的代謝行為進行了初步探討，采用Cocktail探針藥物法評價了該化合物對人肝微粒體中CYP酶亞型1A2、2D6、2C19、3A4、2C9的影響，方法快速、靈敏。

在體外代謝研究中，受試底物的濃度不能過高，過高將無法保證其20%的清除率;受試底物的濃度也不宜過低，過低則底物會在極短時間內(nèi)被清除完全[20]。通過前期對0.3、1.5、3.0 μmol/L的樹豆酮酸A孵育情況進行考察，結(jié)果顯示，當樹豆酮酸A的濃度為1.5 μmol/L時，剩余藥物濃度適中，且大部分種屬肝微粒體中有20%的藥物被清除，所以選擇1.5 μmol/L作為樹豆酮酸A受試濃度的中間點，上下各取3個濃度水平進行體外孵育試驗。

本研究結(jié)果顯示，樹豆酮酸A濃度在0.05～50 μmol/L范圍內(nèi)對人肝微粒體中的CYP2C9、CYP2C19酶有一定的抑制作用，對CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4酶沒有明顯的抑制作用。由此推測，樹豆酮酸A相關(guān)制劑在臨床上使用時有可能與其他經(jīng)CYP2C9、CPY2C19酶代謝的藥物發(fā)生競爭性抑制作用。本課題組后期將進一步研究樹豆酮酸A對CYP2C9、CYP2C19酶的抑制作用機制。

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（收稿日期：2020-07-24 修回日期：2020-12-08）

（編輯：鄒麗娟）