人表皮生長因子受體/AKT/mTOR通路在腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)及臨床意義

劉瀚嶼

葫蘆島市中心醫(yī)院 神經(jīng)外科，遼寧 葫蘆島 125000

膠質(zhì)瘤是較為常見的腦部惡性腫瘤，一般呈浸潤性生長，界限不清。目前，臨床上常采用手術(shù)聯(lián)合放化療對腦膠質(zhì)瘤進(jìn)行干預(yù)，但預(yù)后較差[1]。人表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)基因定位于染色體7p11～13，EGFR突變、擴(kuò)增及過表達(dá)是惡性膠質(zhì)瘤的早期和主要分子事件，主要由7號染色體重排及7p11.2、7p12位點(diǎn)異常擴(kuò)增引起[2-3]。有研究報(bào)道，EGFR可通過AKT/mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路級聯(lián)參與胰腺癌的發(fā)生和發(fā)展[4]。本研究旨在探討EGFR/AKT/mTOR通路在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況及其臨床意義。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集 選取葫蘆島市中心醫(yī)院2015—2019年收治的144例腦膠質(zhì)瘤患者為研究對象。其中，男性75例，女性69例；平均年齡(34.12±12.11)歲；中樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤分型[4]Ⅰ型40例，Ⅱ型36例，Ⅲ型50例，Ⅳ型18例。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)影像學(xué)檢查和術(shù)后病理確診為腦膠質(zhì)瘤；術(shù)前未進(jìn)行放化療。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有其他惡性腫瘤；復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤再次手術(shù)；意識障礙?；颊呒捌浼覍倬炇鹬橥鈺?。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法及觀察指標(biāo) 采用免疫組織化學(xué)法檢測EGFR、AKT、mTOR的表達(dá)情況。DAB顯色，蘇木素復(fù)染、脫水、透明、封固。以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。每張切片高倍鏡(400倍)隨機(jī)選取視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，由2名資深病理科醫(yī)師盲法評分。EGFR、AKT、mTOR染色細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒及染色視為陽性，結(jié)果采用IRS免疫反應(yīng)積分法[5]判定。著色強(qiáng)度：無著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。陽性細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分比：百分比≤5%為0分，5%<百分比≤25%為1分，25%<百分比≤50%為2分，50%<百分比≤75%為3分，百分比>75%為4分。上述兩項(xiàng)分?jǐn)?shù)相乘：0分為“-”，1～4分為“+”，5～8分為“++”，9～12分為“+++”，將“-”視為陰性，“+/++/+++”視為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料以例(百分率)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腦膠質(zhì)瘤EGFR、AKT、mTOR總陽性表達(dá)率比較 腦膠質(zhì)瘤的EGFR、AKT、mTOR總陽性表達(dá)率分別為75.69%(109/144)、72.22%(104/144)、75.69%(109/144)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 各型腦膠質(zhì)瘤EGFR陽性表達(dá)率比較 EGFR在各型腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率由高到低依次為Ⅳ型88.89%(16/18)、Ⅱ型86.11%(31/36)、Ⅲ型80.00%(40/50)、Ⅰ型55.00%(22/40)。Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型EGFR陽性表達(dá)率高于Ⅰ型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各型腦膠質(zhì)瘤EGFR陽性表達(dá)率比較/例

2.3 各型腦膠質(zhì)瘤AKT陽性表達(dá)率比較 AKT在各型腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率由高到低依次為Ⅳ型94.44%(17/18)、Ⅲ型86.00%(43/50)、Ⅱ型77.78%(28/36)、Ⅰ型40.00%(16/40)。Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型AKT陽性表達(dá)率高于Ⅰ型，Ⅲ型、Ⅳ型AKT陽性表達(dá)率高于Ⅱ型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 各型腦膠質(zhì)瘤AKT陽性表達(dá)率比較/例

2.4 各型腦膠質(zhì)瘤mTOR陽性表達(dá)率比較 mTOR在各型腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率由高到低依次為Ⅳ型88.89%(16/18)、Ⅲ型86.00%(43/50)、Ⅱ型83.33%(30/36)、Ⅰ型50.00%(20/40)。Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型mTOR陽性表達(dá)率高于Ⅰ型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 各型腦膠質(zhì)瘤mTOR陽性表達(dá)率比較/例

3 討論

腦膠質(zhì)瘤是一種高度血管化的中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)惡性腫瘤，預(yù)后差，致殘率和復(fù)發(fā)率高[6-7]，因此，早期診斷和治療非常重要。

EGFR是一種介導(dǎo)酪氨酸激酶活性的多功能跨膜糖蛋白[8]，是增殖信號傳導(dǎo)的受體之一。EGFR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其相關(guān)信號通路中關(guān)鍵因子活性或細(xì)胞定位異常均會引發(fā)腫瘤、糖尿病、免疫缺陷及心血管疾病等[9]。人表皮生長因子通過與EGFR結(jié)合發(fā)揮作用，磷酸化的EGFR引發(fā)級聯(lián)放大反應(yīng)，激活下游-信號通路，主要包括轉(zhuǎn)錄因子激活相關(guān)的JAK/STAT、絲裂原活化相關(guān)的Ras/MAPK、磷脂酰肌醇相關(guān)的PI3K/AKT通路等，其通過這些信號通路直接參與細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，在腫瘤細(xì)胞的發(fā)生和病變過程中發(fā)揮重要作用[5,10]。本研究結(jié)果顯示：EGFR在各型腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率由高到低依次為Ⅳ型88.89%(16/18)、Ⅱ型86.11%(31/36)、Ⅲ型80.00%(40/50)、Ⅰ型55.00%(22/40)，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型EGFR陽性表達(dá)率高于Ⅰ型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這提示，EGFR陽性表達(dá)率升高可能與腫瘤進(jìn)展相關(guān)，EGFR表達(dá)過度是腦膠質(zhì)瘤不良分化的標(biāo)志之一[11]。

mTOR是PI3K信號通路下游一個(gè)重要位點(diǎn)，激活的mTOR能夠磷酸化調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)翻譯的關(guān)鍵因子[12-15]。腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡的調(diào)控機(jī)制由細(xì)胞內(nèi)外信號通路共同參與完成，調(diào)控機(jī)制失常是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生和發(fā)展的重要因素之一。當(dāng)EGFR表達(dá)上調(diào)并被激活成pEGFR時(shí)，pEGFR可以導(dǎo)致mTOR激活，而mTOR作為PI3K/AKT信號通路的直接作用底物，其能夠通過整合細(xì)胞營養(yǎng)、能量及氧化等綜合信息，成為控制細(xì)胞生長、促進(jìn)蛋白合成的關(guān)鍵調(diào)控點(diǎn)[16]。同時(shí)，活化的EGFR也可磷酸化AKT，進(jìn)而作用域下游靶基因Casepase9，使其失活，促進(jìn)抗凋亡基因轉(zhuǎn)錄，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡[17]。本研究結(jié)果顯示：AKT在各型腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率由高到低依次為Ⅳ型94.44%(17/18)、Ⅲ型86.00%(43/50)、Ⅱ型77.78%(28/36)、Ⅰ型40.00%(16/40)，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型AKT陽性表達(dá)率高于Ⅰ型，Ⅲ型、Ⅳ型AKT陽性表達(dá)率高于Ⅱ型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；mTOR在各型腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率由高到低依次為Ⅳ型88.89%(16/18)、Ⅲ型86.00%(43/50)、Ⅱ型83.33%(30/36)、Ⅰ型50.00%(20/40)，Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型mTOR陽性表達(dá)率高于Ⅰ型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這提示，腦膠質(zhì)瘤患者的AKT、mTOR陽性表達(dá)率隨著病理級別升高而升高，EGFR的表達(dá)與AKT/mTOR信號通路存在一定的級聯(lián)反應(yīng)。

綜上所述，隨著腦膠質(zhì)瘤的惡性程度升高，EGFR、AKT、mTOR表達(dá)增強(qiáng)，EGFR可通過與AKT/mTOR級聯(lián)參與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生及惡化。