食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基配制、滅菌及貯藏研究

□ 吳芳媛 馮秋芳 林 黎 湖州市食品藥品檢驗(yàn)研究院

當(dāng)前，各個(gè)領(lǐng)域的檢測(cè)設(shè)備及其自動(dòng)化已經(jīng)得到了一定的發(fā)展，但在微生物檢驗(yàn)領(lǐng)域，仍然采用傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，即利用培養(yǎng)法，對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)、分離以及生化鑒定。檢測(cè)的過(guò)程中，微生物培養(yǎng)基的合理性對(duì)微生物的生長(zhǎng)、分離以及鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性具有一定影響?；诖?，本文開(kāi)展了食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基配制、滅菌及貯藏研究。

1 食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基配制

針對(duì)食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基的配制，應(yīng)當(dāng)根據(jù)不同檢驗(yàn)?zāi)康?，選擇不同的配制材料，表1 為3 種常見(jiàn)的培養(yǎng)基材料配比表。

表1 3 種常見(jiàn)的培養(yǎng)基材料配比

表1 中牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基主要用于食品微生物中細(xì)菌的培養(yǎng)，為保證培養(yǎng)基的質(zhì)量，需要在125 ℃環(huán)境下持續(xù)進(jìn)行15 min 的滅菌處理；Gause1 號(hào)培養(yǎng)基主要用于放線菌的培養(yǎng)，在配制的過(guò)程中，首先應(yīng)當(dāng)在淀粉中添加少量的冷水，通過(guò)攪拌得到糊狀淀粉后，再將其倒入100 ℃的水中，然后加熱并加入其余配制材料攪拌至溶化，配制后同樣需要在125 ℃環(huán)境下持續(xù)進(jìn)行15 min 的滅菌處理；Martin 瓊脂培養(yǎng)基主要作用是食品微生物中真菌的分離，完成滅菌處理后，在使用前加入0.02%鏈霉素稀釋液，通常為100 ～150 mL，保證每毫升培養(yǎng)基當(dāng)中均含有25 μg 鏈霉素。在實(shí)際食品微生物檢驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)不同的需要對(duì)配制材料進(jìn)行選擇。按照上述材料及配制方法完成培養(yǎng)基的配制，并將其裝入立式壓力蒸汽滅菌裝置當(dāng)中，根據(jù)需要對(duì)pH 值進(jìn)行調(diào)節(jié)。

2 食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基滅菌

培養(yǎng)基可選用物理法和化學(xué)法兩種滅菌方法，其中物理法包括濕熱滅菌法、干熱滅菌法等，化學(xué)法包括抗生素抑菌法、消毒劑消毒法等。濕熱滅菌法將培養(yǎng)基放置在高壓蒸汽裝置中，通過(guò)其潛熱作用以及穿透力，使菌體蛋白質(zhì)凝固并變性[1]。高壓蒸汽裝置壓力通常在0.12 ～0.13 MPa，持續(xù)15 ～25 min 可得到最佳的滅菌效果。

干熱滅菌法利用恒溫干燥箱，將其內(nèi)部溫度調(diào)節(jié)至155 ～165 ℃，持續(xù)70 ～90 min 后，將培養(yǎng)基放置在干燥箱中，達(dá)到滅菌的效果。

消毒劑消毒法常用的試劑包括甲醛（HCHO）、高錳酸鉀（KMnO4）、乙 醇（C2H6O）， 用0.5% ～0.6% 氯化汞、12.5%次氯酸鈉、飽和漂白粉等進(jìn)行滅菌可達(dá)到良好的滅菌效果[2]?？股匾志ㄖ谐Ｒ?jiàn)的抗生素包括青霉素、鏈霉素和新霉素，將抗生素添加在培養(yǎng)基當(dāng)中可以有效預(yù)防微生物感染，以此達(dá)到抑菌的效果。

3 食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基貯藏

按照需要將滅菌后的食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基進(jìn)行瓶裝保存或傾注至平板容器密封保存。通常情況下，培養(yǎng)基可在1.5 ～7.5 ℃的冰箱中貯藏。貯藏的有效期應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。

4 結(jié)語(yǔ)

本文針對(duì)幾種常見(jiàn)的食品微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基的配制、滅菌及貯藏進(jìn)行研究，為后續(xù)微生物培養(yǎng)基質(zhì)量控制提供參考。在實(shí)際檢驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)不同的檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以為檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和精度的提高提供保證，以達(dá)到事半功倍的效果。