解郁丸對(duì)腦卒中后抑郁神經(jīng)功能及血清NF-κB、5-HT、miR-146、miR-221-3p水平的影響

田婧，白永杰，尤愛民，姚建平

(1.河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 洛陽 471003；2.河南中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450000)

抑郁是腦卒中后常見并發(fā)癥，統(tǒng)計(jì)資料顯示其發(fā)生率為40%～50%[1-2]。腦卒中后抑郁(post-stroke depression，PSD)以情緒低落、悲痛欲哭、沉默寡言及暴躁易怒等為主要臨床表現(xiàn)，如延誤治療將影響神經(jīng)功能恢復(fù)進(jìn)程，甚至導(dǎo)致患者拒絕治療或自殺[3]。艾司西酞普蘭是新型選擇性5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)再攝取抑制劑，不良反應(yīng)少，但起效慢、治療周期長，部分患者依從性不足，整體療效有待提升[4]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，PSD發(fā)病與氣機(jī)不暢、血瘀阻絡(luò)及臟腑功能失調(diào)相關(guān)，故治療關(guān)鍵在于安神益智、解郁行氣、化瘀活血[5]。解郁丸由大棗、白芍、當(dāng)歸、合歡等多種藥物組成，具有寧心安神、疏肝解郁的功效，臨床已有其與西酞普蘭聯(lián)合用于難治性抑郁的報(bào)道[6]，但鮮有關(guān)于其聯(lián)合艾司西酞普蘭用于PSD治療的研究。5-HT是一種抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，核因子-κB(nuclear factor κB，NF-κB)，微小RNA(microRNA，miR-146、miR-221-3p)則可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。抑郁癥的發(fā)病機(jī)理可能與特定神經(jīng)傳導(dǎo)通路上5-HT功能降低或含量不足有關(guān)[7]，并常伴有炎癥或促炎細(xì)胞因子升高，導(dǎo)致5-HT、NF-κB及miRNA水平異常。故改善以上指標(biāo)對(duì)于疾病恢復(fù)具有積極意義。本研究在艾司西酞普蘭治療PSD的基礎(chǔ)上聯(lián)合解郁丸，并觀察其對(duì)神經(jīng)功能及血清NF-κB、5-HT、miR-146、miR-221-3p的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年8月—2019年8月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院符合納入標(biāo)準(zhǔn)的98例PSD患者，采用隨機(jī)數(shù)字表將其分為對(duì)照組和研究組。對(duì)照組47例，男26例，女21例；年齡(57.96±6.81)歲,卒中病程(2.08±0.49)年,抑郁病程(1.26±0.27)年；缺血性卒中37例，出血性卒中10例。研究組51例，男28例，女23例；年齡(57.09±7.13)歲,卒中病程(2.14±0.38)年,抑郁病程(1.30±0.28)年；缺血性卒中39例，出血性卒中12例。兩組性別、病程、腦卒中類型和年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，患者及家屬對(duì)本次研究內(nèi)容知情同意。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

1)符合腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]，經(jīng)顱腦MRI診斷證實(shí)；2)漢密爾頓抑郁量表(Hamilton Depression Scale，HAMD)評(píng)分[9]>17分，且維持>2周；3)溝通、理解能力正常；4)入組前4周未使用抗精神病藥物或抗抑郁藥物。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

1)短暫性腦缺血發(fā)作、大面積腦梗死、額葉出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血；2)原發(fā)性腦腫瘤或嚴(yán)重軀體障礙；3)卒中前意識(shí)、精神障礙患者；4)肝、腎、心等主要器官功能不全；5)本研究藥物使用禁忌證。

1.4 方法

兩組患者均采用常規(guī)治療，包括使用脫水劑、腦保護(hù)劑等，并針對(duì)性處理合并癥。對(duì)照組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上采用艾司西酞普蘭(山東京衛(wèi)制藥有限公司；國藥準(zhǔn)字H20103327；規(guī)格：10 mg)治療，以10 mg/d為初始劑量，服用1周后增加至20 mg/d維持用藥。研究組在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用解郁丸(鄭州豫密藥業(yè)股份有限公司；國藥準(zhǔn)字B20020101；規(guī)格：15 丸/g)治療，口服，4 g/次，3次/d。1個(gè)療程4周，兩組均治療2個(gè)療程。

1.5 觀察指標(biāo)

1.5.1 兩組治療前后抑郁情況及神經(jīng)功能比較

治療前、治療后根據(jù)HAMD量表對(duì)兩組患者抑郁情況進(jìn)行評(píng)估，該量表包含17個(gè)條目，其中10個(gè)條目采用5級(jí)評(píng)分法，分值0～4分，7個(gè)項(xiàng)目采用3級(jí)評(píng)分法，分值0～2分，總分范圍0～54分。分?jǐn)?shù)越高，患者抑郁情況越嚴(yán)重；治療前、治療后根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)對(duì)兩組患者神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)估，包括凝視、面癱、運(yùn)動(dòng)、感覺、視野、語言等11個(gè)維度，總分范圍0～42分。分?jǐn)?shù)越高，患者神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重。

1.5.2 兩組治療前后血清NF-κB、5-HT、miR-146和miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量比較

治療前、治療后晨起空腹抽取患者5 mL左右靜脈血，2 800 r/min離心15 min(離心半徑12 cm)，取上清液。采用酶聯(lián)免疫吸附法(euzymelinked immunosorbentassay，ELISA)檢測(cè)血清NF-κB、5-HT水平，試劑盒均購自上海滬鼎生物科技有限公司。按照試劑盒說明書操作，選用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光光度值，并參照標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣本濃度進(jìn)行計(jì)算。

治療前、治療后晨起空腹抽取患者25 mL左右靜脈血，離心后取上清。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)血清miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量。Trizol法提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄獲取cDNA，電泳鑒定、酶標(biāo)儀定量后，根據(jù)SYBR Green熒光定量試劑盒[寶生物工程(大連)有限公司]設(shè)定反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，以U6 snRNA為管家基因，2-△△CT為目的基因的相對(duì)表達(dá)強(qiáng)度。U6 snRNA：上游引物：5′-CTGGAATACGCCATTGCGCACCCA-3′；下游引物：5′-TGGCACGTGCACGTACTGGCCAAC-3′。計(jì)算血清miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量。

1.5.3 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較

統(tǒng)計(jì)治療期間兩組患者惡心、便秘、頭暈、口干等不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.6 兩組臨床療效比較

參考文獻(xiàn)[10]制定。治愈：HAMD評(píng)分降低>75%；顯效：50%

總有效率(%)=(治愈例數(shù)+顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，任一樣本理論頻數(shù)為0時(shí)，采用Fisher精確檢驗(yàn)，理論頻數(shù)為1～5時(shí)采用校正χ2檢驗(yàn)，>5時(shí)采用χ2檢驗(yàn)；等級(jí)計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)。P≤0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后抑郁情況及神經(jīng)功能比較

兩組治療前HAMD、NIHSS評(píng)分比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩組治療后HAMD、NIHSS評(píng)分均降低，研究組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組治療前后抑郁情況及神經(jīng)功能比較

2.2 兩組臨床療效比較

研究組與對(duì)照組臨床療效等級(jí)分布比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，研究組臨床總有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組臨床療效比較 [例(%)]

2.3 兩組治療前后血清NF-κB、5-HT水平，miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量比較

兩組治療前血清NF-κB、5-HT水平，miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩組治療后血清NF-κB水平，miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量均降低，研究組均低于對(duì)照組，血清5-HT水平均升高，研究組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組治療前后血清NF-κB、5-HT水平，miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量比較

2.4 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較

兩組治療期間均無嚴(yán)重不良反應(yīng)，未處理即自行好轉(zhuǎn)。兩組不良反應(yīng)總發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表4 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較 [例(%)]

3 討論

PSD屬繼發(fā)型抑郁癥，研究顯示年齡、神經(jīng)功能缺損、病變位置、社會(huì)支持等均為其發(fā)生的危險(xiǎn)因素[11]。目前西醫(yī)關(guān)于PSD的發(fā)病機(jī)制尚處于探索階段，通常認(rèn)為與卒中后造成腦損傷，導(dǎo)致單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平及其通路異常；急性、進(jìn)展性腦血管系統(tǒng)損害；卒中后生理、心理平衡失調(diào)導(dǎo)致反應(yīng)性抑郁有關(guān)[12-13]。PSD可嚴(yán)重影響患者神經(jīng)功能康復(fù)，增加軀體疾病治療復(fù)雜性，延長住院時(shí)間，甚至導(dǎo)致患者死亡。目前抗抑郁藥物是臨床治療PSD的主要方式，但常規(guī)抗抑郁藥物多因起效慢、安全性不足等缺點(diǎn)導(dǎo)致整體療效欠佳[14]。故探尋PSD更為理想的藥物治療方式廣受臨床關(guān)注。

PSD屬“中風(fēng)”“郁癥”范疇。中風(fēng)后氣血亂逆，神匿竅閉，神無所依，心無所主，肝失疏泄，導(dǎo)致氣機(jī)升降失調(diào)；另外，驟然起病，患者短時(shí)間難以接受，情緒波動(dòng)，以致于肝失調(diào)達(dá)，情志不暢，氣機(jī)郁結(jié)。故本病治療應(yīng)著重疏肝理氣、活血化瘀。解郁丸是以“甘麥大棗湯”及“逍遙散”為基礎(chǔ)，輔以現(xiàn)代科技所制純中藥制劑，由白芍、茯苓、郁金、甘草、合歡、當(dāng)歸、大棗、甘草、小麥、百合、柴胡等藥物組成。白芍柔肝養(yǎng)血，柴胡疏肝解郁，兩者配合疏肝理氣；當(dāng)歸養(yǎng)血活血；百合養(yǎng)陰清熱、滋補(bǔ)精血；茯苓、大棗、小麥寧心安神；郁金理氣解郁；合歡解郁安神；甘草調(diào)和諸藥。諸藥配伍，可在調(diào)暢情志的同時(shí)輔以通經(jīng)活絡(luò)、化瘀活血，已達(dá)標(biāo)本同治?，F(xiàn)代藥理學(xué)證實(shí)[15-16]，柴胡皂苷可抑制中樞神經(jīng)，鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗驚厥，并可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，促進(jìn)抵抗力的增強(qiáng)；茯苓中卵磷脂、膽堿及茯苓多糖，可營養(yǎng)腦神經(jīng)細(xì)胞，改善神經(jīng)功能。另有動(dòng)物研究表明[17]，解郁丸可顯著減少WKY大鼠抑郁樣行為，證實(shí)其抗抑郁效果。本研究顯示，治療后研究組HAMD、NIHSS評(píng)分低于對(duì)照組，臨床總有效率高于對(duì)照組，提示解郁丸聯(lián)合艾司西酞普蘭可改善患者抑郁情況及神經(jīng)功能、治療效果。

有報(bào)道指出[18]，中樞神經(jīng)遞質(zhì)缺乏可能是PSD的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)，其中5-HT可調(diào)節(jié)情緒、睡眠等行為，其異常降低可導(dǎo)致抑郁行為。另有研究認(rèn)為[19]，相較于單純腦卒中，PSD可能促使炎癥細(xì)胞因子濃度的進(jìn)一步升高，導(dǎo)致細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)穩(wěn)態(tài)失衡。NF-κB激活是炎癥反應(yīng)的中心環(huán)節(jié)，參與炎癥反應(yīng)，高表達(dá)于PSD患者。Gaudet等[20]報(bào)道，miRNA與中樞神經(jīng)炎癥、突觸可塑性及神經(jīng)細(xì)胞生長發(fā)育等生理、病理過程關(guān)系密切。而miR-146、miR-221-3p均可通過炎癥介質(zhì)介導(dǎo)的有關(guān)途徑導(dǎo)致中樞系統(tǒng)炎癥反應(yīng)，參與PSD發(fā)生、發(fā)展。艾司西酞普蘭是西酞普蘭的S-異構(gòu)體，可與5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體的基本位點(diǎn)與異構(gòu)位點(diǎn)同時(shí)結(jié)合，增強(qiáng)對(duì)5-HT再攝取進(jìn)行抑制的能力，且具有較高選擇性與親和性，抗抑郁效果確切。解郁丸中含有茯苓、大棗、小麥等安神寧心類藥物，白芍、柴胡、當(dāng)歸等抗炎類藥物，可通過調(diào)節(jié)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)濃度及抗炎作用促進(jìn)患者抑郁及病情的改善。本研究中，治療后研究組血清NF-κB水平，miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量均低于對(duì)照組，血清5-HT水平高于對(duì)照組，提示解郁丸聯(lián)合艾司西酞普蘭可促進(jìn)相關(guān)血清因子的改善；本研究發(fā)現(xiàn)兩組不良反應(yīng)總發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示解郁丸不會(huì)增加不良反應(yīng)。

綜上所述，與僅使用艾司西酞普蘭比較，解郁丸聯(lián)合艾司西酞普蘭治療PSD可減輕患者抑郁情緒，促進(jìn)神經(jīng)功能及治療效果的改善，提高血清5-HT水平，降低血清NF-κB水平及miR-146、miR-221-3p相對(duì)表達(dá)量，且安全可靠。但本研究為單中心研究，所選例數(shù)較少，在今后研究中需加以改進(jìn)，深化研究結(jié)果，為解郁丸的臨床治療提供依據(jù)。