外泌體與缺血性腦卒中及針灸干預(yù)機(jī)制＊

李巧鳳，彭擁軍＊＊，李忠仁，洪 浩，儲(chǔ)繼紅，蔡 云

（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 南京 210029；2.南京中醫(yī)藥大學(xué) 南京 210029）

缺血性腦卒中（ischemic stroke,IS），中醫(yī)稱為“中風(fēng)”，以猝然昏仆，口舌歪斜，半身不遂，語言不利為主癥。IS因腦組織局部供血不足，導(dǎo)致組織缺血缺氧，甚至軟化壞死，以神經(jīng)功能缺損為主要表現(xiàn)。中風(fēng)致死率僅次于心臟病、癌癥、慢性下呼吸道疾病和意外傷害[1]，是發(fā)病率、致殘率、死亡率較高的疾病。目前IS的治療最有效的方法為發(fā)病后4.5-6個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行溶栓、機(jī)械取栓[2]，此方法時(shí)間窗較短，很難把握住治療時(shí)機(jī)，能夠及時(shí)接受到有效治療并改善神經(jīng)功能的患者極少，且溶栓后的治療效果可能不佳，患者神經(jīng)功能缺損的癥狀仍可能存在，甚至出現(xiàn)其他嚴(yán)重并發(fā)癥。如何早期診斷、早期治療是有效改善缺血性腦卒中癥狀亟需解決的問題。而外泌體作為新型標(biāo)志物對(duì)IS的作用及針灸對(duì)外泌體的影響將有助于IS患者的早期診斷、早期治療。

1 外泌體概述

1.1 外泌體的形態(tài)結(jié)構(gòu)

關(guān)于外泌體（exosomes,EXs）的描述最早在1983年，外泌體是一種包含大量細(xì)胞表面受體的多種細(xì)胞類型產(chǎn)生的復(fù)雜“活躍”結(jié)構(gòu)，目前被歸類為細(xì)胞外囊泡（extracellular vesicles,EV）類的一種，而外泌體尤其是指50-200 nm的微小EV，胞內(nèi)體內(nèi)陷形成多囊泡體（multivesicular bodies,MVBS）與細(xì)胞膜融合釋放出的囊泡即為外泌體，內(nèi)含蛋白質(zhì)、營養(yǎng)因子、微小核糖核酸（microRNAs，miRNA）等結(jié)構(gòu)，且因其不被網(wǎng)狀內(nèi)皮組織系統(tǒng)細(xì)胞內(nèi)吞，可通過與靶細(xì)胞受體結(jié)合，高效運(yùn)送這些生物信息物質(zhì)到達(dá)靶器官[3]。

外泌體水平轉(zhuǎn)移內(nèi)容物到靶器官中發(fā)揮與所攜帶的活性物質(zhì)同樣的功效，甚至更好的治療作用。例如，Manuel等[4]對(duì)大腦中動(dòng)脈閉塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）大鼠右股靜脈注射間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells,MSC）及MSC源性外泌體，結(jié)果顯示了兩者的血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子（Platelet endothelial cell adhesion molecule-1，PECAM-1）及5-溴脫氧尿核苷（bromodeoxyuridine,Brdu）融合的細(xì)胞數(shù)量顯著增加，二者具有促進(jìn)血管生成的作用，表明外泌體與其祖細(xì)胞具有相似的作用。因此外泌體在介導(dǎo)細(xì)胞間通訊中具有重要意義，并且發(fā)揮與其來源母細(xì)胞相同的功能。

1.2 外泌體的功能

外泌體的功能主要表現(xiàn)在免疫中抗原呈遞、損傷組織修復(fù)、神經(jīng)保護(hù)、促進(jìn)髓鞘再生、血管新生等方面[5]。外泌體參與缺血性腦卒中后腦損傷的修復(fù)功能[6]，其發(fā)揮功效的最大優(yōu)勢是通過血腦屏障不被降解[7]，血腦屏障是血漿和腦脊液間的生理屏障，選擇性的轉(zhuǎn)運(yùn)特定分子，限制98%[8]的小分子物質(zhì)和幾乎所有大分子物質(zhì)透過血腦屏障，嚴(yán)格控制腦實(shí)質(zhì)與外界細(xì)胞間的物質(zhì)交換，以保持腦組織內(nèi)環(huán)境的基本穩(wěn)定。

另外，研究證實(shí)血液和腦組織的外泌體源性miRNA存在顯著相關(guān)性，二者隨同變化，提示腦組織發(fā)生缺血性損傷后血腦屏障被破壞，損傷的腦組織外泌體源性miRNA（exogenous miRNAs,exo-miRNAs）透過血腦屏障釋放到循環(huán)血液中[9]，因此缺血性腦組織中高表達(dá)的exo-miRNAs也存在于血液中，可以反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)狀態(tài)的信息,為利用血漿外泌體診治IS提供了臨床應(yīng)用的前提與基礎(chǔ)，從而介導(dǎo)大腦對(duì)中風(fēng)后體內(nèi)微環(huán)境進(jìn)行一系列應(yīng)答和處理。

2 外泌體有助于IS的診斷

IS的傳統(tǒng)診斷主要依據(jù)影像學(xué)檢查，利用血液檢驗(yàn)手段診斷IS尚缺少特異性的生物標(biāo)志物。如何尋找敏感客觀的分子指標(biāo)對(duì)IS進(jìn)行早期準(zhǔn)確、安全高效的診斷，是推進(jìn)IS精準(zhǔn)診斷與個(gè)體化治療亟需解決的問題。而外泌體的高靈敏度、穩(wěn)定性、特異性、高效運(yùn)送性及易得性的特性恰好是外泌體對(duì)腦卒中進(jìn)行精準(zhǔn)診斷的優(yōu)勢所在。近年來，外泌體源性miRNA作為IS的新型診斷標(biāo)志物得到了越來越多的研究關(guān)注。

2.1 miRNA與外泌體源性miRNA的相關(guān)性

miRNA是一類生物體內(nèi)自然生成的長度約21-23 nt的單鏈非編碼核糖核酸（ribose nucleic acid,RNA），具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)控基因表達(dá)的功能，作為細(xì)胞間通訊的重要介導(dǎo)物質(zhì)[6]，被認(rèn)為是組織損傷的敏感血漿生物標(biāo)志物[10]，近年來發(fā)現(xiàn)miR-223[11]、miR-124[12]、miR-9、miR-126、miR-210、miR-221等[13]與缺血性腦卒中有關(guān)，且這些miRNA主要聚集于外泌體并且通過外泌體在細(xì)胞之間交換[14]，在靶器官內(nèi)發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能，因此外泌體可以通過水平轉(zhuǎn)移miRNA，介導(dǎo)大腦中的細(xì)胞間信號(hào)，反應(yīng)IS的病理狀態(tài)。由于外泌體是通過選擇性的方式分泌到細(xì)胞外空間的，因此外泌體miRNA被認(rèn)為是比血清miRNA更為敏感和具有特異性的生物標(biāo)志物。

2.2 外泌體miR-223、miR-124、miR-9有望成為IS的特異性診斷標(biāo)志物

Chen等[15]收集了50名急性缺血性卒中患者在發(fā)病初72小時(shí)內(nèi)的血液樣本，檢測外泌體miR-223和miR-16水平，與健康者相比外泌體miR-16水平相差甚微，而miR-223的含量增加顯著，受體工作特征曲線顯示當(dāng)exo-miR-223=-0.50時(shí)，曲線下面積為0.859，最佳靈敏度為84.0%，特異性78.8%。且exomiR-223與美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（National Institute of Health stroke scale，NIHSS）評(píng)分呈正相關(guān)，并且觀察到預(yù)后較差的卒中患者外周血exo-miR-223表達(dá)高于有良好預(yù)后的卒中患者，提示相比于exomiR-16，exo-miR-223的表達(dá)與卒中嚴(yán)重程度和短期預(yù)后相關(guān)性更大。

外泌體中的miR-124廣泛分布在大腦各區(qū)域，是大腦中最豐富的miRNA,Ji等[16]采集了65名急性缺血性腦卒中（acute ischemic stroke，AIS）患者和66名健康者的血清外泌體，與對(duì)照組相比，卒中組血清外泌體濃度顯著升高，exo-miR-9和exo-miR-124的水平增加與NIHSS評(píng)分、梗塞體積和促炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-6（interleukin，IL-6）的過度表達(dá)呈正相關(guān),且二者曲線下面積分別為0.8026和0.6976，表明血清外泌體miR-9和miR-124是診斷AIS的特異性生物標(biāo)志物，且miR-9比miR-124具有更高的特異性。

外泌體miR-223、miR-124、miR-9是診斷缺血性腦卒中和評(píng)估腦組織損傷程度的潛在生物標(biāo)志物。

3 外泌體對(duì)于IS的治療作用

外泌體因其來源母細(xì)胞不同具有不同的組成成分和功能。多個(gè)研究表明外泌體源性miRNA和mRNA網(wǎng)絡(luò)在介導(dǎo)大腦修復(fù)過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用[17]。Mirzaei等[18]發(fā)現(xiàn)中風(fēng)中組織特異性miRNA中有43個(gè)上調(diào)，36個(gè)下調(diào)，其發(fā)揮著各自的作用：①神經(jīng)保護(hù)：Let-7，miR-181，miR-200，miR-182，miR-124，miR-134；②髓鞘再生：miR-17-92,miR-145；③促進(jìn)血管新生：miR-210,miR-222,miR-424,miR-126,miR-130a,miR-378。

3.1 外泌體具有神經(jīng)保護(hù)作用

外泌體在穩(wěn)定基因組和突觸可塑性以及維持與神經(jīng)發(fā)育過程有關(guān)的時(shí)空梯度方面有一定作用。外泌體可以通過誘導(dǎo)RNA、蛋白質(zhì)影響缺血性腦重塑過程以發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。例如，外泌體的miR-124可以促進(jìn)皮質(zhì)神經(jīng)前體細(xì)胞在梗塞部位獲得神經(jīng)元表型，從而促進(jìn)神經(jīng)保護(hù)及修復(fù)以改善腦損傷[7]。內(nèi)皮細(xì)胞源性外泌體具有抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞生長遷移的作用，直接保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受缺血再灌注損傷[19]。

Putz等[20]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)泛素連接酶（Neuronal precursor cell developmentally downregulated 4，Nedd4）家族相互作用蛋白1（Family interacting protein 1，Ndfip1）存在于轉(zhuǎn)染的人源胚胎腎細(xì)胞293（human emborynic kidney 293T，HEK293T）細(xì)胞和未轉(zhuǎn)染的原代皮質(zhì)神經(jīng)元的外泌體中，對(duì)神經(jīng)元保護(hù)有積極作用，Ndfip1還可作為外泌體內(nèi)膜結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞外環(huán)境，在神經(jīng)元損傷期間，大量有害物質(zhì)在神經(jīng)元內(nèi)外積聚，誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，Ndfip1的表達(dá)增加導(dǎo)致外泌體中泛素化蛋白的積累，從而高效隔離和去除毒性物質(zhì)，改善神經(jīng)元存活。

MSC是能夠促進(jìn)血管新生的多向分化性成體干細(xì)胞[21],被稱作“藥物信號(hào)細(xì)胞”[22]。MSC釋放的外泌體中的miR-133b下調(diào)結(jié)締組織生長因子（Connective Tissue Growth Factor，CTGF）表達(dá)和大鼠肉瘤同源基因家族A（rat sarcoma homolog gene family member A,RhoA）蛋白表達(dá)，前者被認(rèn)為是軸突再生障礙的一個(gè)因子，后者為影響神經(jīng)元形態(tài)發(fā)育的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子并且可影響神經(jīng)突的可塑性，改善MCAO大鼠的中風(fēng)癥狀[23]。

3.2 外泌體發(fā)揮髓鞘再生作用

Xin等[24]對(duì)MCAO大鼠靜脈注射大量的Exo-miR-17-92，激活亞型3-激酶∕蛋白激酶B∕亞型靶蛋白信號(hào)通路（Phosphatidylinositol 3-hydroxykinase∕protein kinase∕mammalian target of rapamycin,PI3K∕Akt∕mTOR），該通路是調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、生長、分化、生存的重要通路[25]，以使糖原合成酶激酶3β（Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β）失活，GSK-3β在成人腦內(nèi)廣泛表達(dá)，參與細(xì)胞的增殖、遷移、分化、神經(jīng)母細(xì)胞和神經(jīng)元的可塑性[26]，腦梗時(shí)該通路被抑制，Exo-miR-17-92激活該通路，使PI3K-AKT通過mTOR途徑促進(jìn)軸突局部蛋白質(zhì)的合成，使GSK-3β的失活，促進(jìn)了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘再生。

Pusic等[27]將干擾素γ（interferon-γ,IFN-γ）誘導(dǎo)下的樹突細(xì)胞（dendritic cells，DC）外泌體經(jīng)鼻給藥，在被少突膠質(zhì)細(xì)胞攝取后，發(fā)現(xiàn)參與少突膠質(zhì)細(xì)胞分化和抗炎途徑的特異性miRNA在IFNγ-DC-Exos中高度表 達(dá)，特 別 是miR-219、miR-181a，miR-451，miR-532-5p和miR-665高度集中，結(jié)果證實(shí)FNγ-DC-Exos可以有效增加腦髓鞘的形成和氧化耐受，促進(jìn)急性脫髓鞘后的髓鞘再生。

另外，雪旺細(xì)胞通過分泌外泌體的形式促進(jìn)P75神經(jīng)營養(yǎng)因子受體（P75 neurotrophic receptor,P75NTR）分泌，從而促進(jìn)軸突再生。雪旺細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，p75NTR屬于I型跨膜糖蛋白，能與眾多神經(jīng)營養(yǎng)因子及神經(jīng)營養(yǎng)因子前體結(jié)合。雪旺細(xì)胞外泌體中富含p75NTR，通過拮抗神經(jīng)突生長抑制因子受體（Neurite outgrowth inhibitor receptor，NgR）信號(hào)通路使抑制分子的分泌減少，促進(jìn)軸突再生[28]。

3.3 外泌體促進(jìn)血管新生

血管新生是外泌體眾多作用中至為重要的一個(gè)作用，血管新生即從現(xiàn)有的血管內(nèi)皮細(xì)胞（vascular endothelial cell，VEC）增殖、遷移至微血管床上，產(chǎn)生新的血管，以便向各種器官和組織提供營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣，它既是正常的生理過程，也是應(yīng)對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的一種自然防御反應(yīng)[29]。重建功能性腦微血管網(wǎng)絡(luò)將改善局部血液供應(yīng)并促進(jìn)中風(fēng)恢復(fù)。

外泌體的促血管再生機(jī)制可能與下列因素有關(guān)：①缺 氧 誘 導(dǎo) 因 子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）缺氧條件下過表達(dá)供體使外泌體分泌能力增強(qiáng)；②外泌體通過激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal regulated kinase，ERK）∕Akt信號(hào)活化血管內(nèi)皮細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)和血管再生因子，增強(qiáng)表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）的表達(dá)和激活ERK1∕2信號(hào)通路，促進(jìn)局部血管形成；③具有促血管生成功能的microRNA在缺血環(huán)境下在外泌體中高表達(dá)提高血管生成能力；④Notch的主要配體Jagged1誘導(dǎo)血管再生；⑤NO釋放聚合物可以促進(jìn)外泌體的促血管生成成分，增強(qiáng)血管生成作用[30]。HIF-VEGF-Notch信號(hào)通路貫穿血管新生過程的始終，在外泌體發(fā)揮血管生成作用中起到重要作用。

miRNAs是血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，外泌體通過轉(zhuǎn)載miRNA激活PI3K∕Akt信號(hào)通路，增加腦血管周細(xì)胞內(nèi)皮生長因子（VEGF）的miRNA和蛋白質(zhì)水平導(dǎo)致血管生成，在VEGF的誘導(dǎo)下進(jìn)一步激活Notch信號(hào)傳導(dǎo)通路，以使血管屏障能夠保持完整性[31]，例如MSC-EXs中miR-132-3p作為一種具有血管再生作用的特異性miRNA，其在缺氧∕復(fù)氧誘導(dǎo)下表達(dá)上調(diào)，激活PI3K∕Akt信號(hào)通路，修復(fù)受損腦血管內(nèi)皮細(xì)胞的血管再生、增殖、遷移能力及Akt磷酸化水平，內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)[32]，表明外泌體有助于觀察中風(fēng)后腦修復(fù)過程中神經(jīng)發(fā)生和血管生成的耦合，促進(jìn)中風(fēng)后的功能恢復(fù)。

此外，局灶性腦缺血小鼠模型中腦血管的miRNA-15a的下調(diào)能夠增加VEGF，促進(jìn)梗死周圍區(qū)的血管生成并且誘導(dǎo)VEGF與神經(jīng)前體細(xì)胞中的VEGFR2相互作用，改善神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)，促進(jìn)血管增殖和神經(jīng)元分化[23]。Horie等[33]通過人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）的體外血管生成測定揭示了碳酸酐酶9（carbonic anhydrase 9,CA9）外泌體具有促進(jìn)血管遷移和形成的作用，在缺氧刺激下激活HIF1，分泌缺氧誘導(dǎo)基因CA9，上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2,MMP2）表達(dá)，MMP2是一種促血管生長因子，外泌體高表達(dá)MMP2,增強(qiáng)血管生成作用，提供營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣，維持細(xì)胞存活。

血管生成的程度通常與腦梗塞減少和神經(jīng)恢復(fù)改善密切相關(guān)，因此，促進(jìn)缺血后血管生成是臨床環(huán)境中治療急性缺血性中風(fēng)的重要治療策略。外泌體發(fā)揮促血管作用的機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)HIF-VEGFNotch信號(hào)通路表達(dá)，外泌體miRNA可能參與調(diào)控該通路來促進(jìn)血管新生。

4 針灸對(duì)外泌體的影響有助于探究針灸治療IS的新機(jī)制

目前針灸治療IS的機(jī)制主要認(rèn)為通過擴(kuò)張血管、改善血液流變性，增加側(cè)支循環(huán)，改善腦部血液供應(yīng)，降低血液黏稠度，促進(jìn)環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）分泌，降低一氧化氮的神經(jīng)毒性，抑制細(xì)胞的調(diào)亡，減輕自由基損傷和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，控制鈣超載等機(jī)制進(jìn)行干預(yù)治療[34]。針灸對(duì)外泌體的影響將有助于進(jìn)一步研究針灸的腦保護(hù)機(jī)制，并且將針灸治療精準(zhǔn)化便捷化，從而指導(dǎo)針灸臨床實(shí)踐。

針刺刺激肥大細(xì)胞釋放出外泌體，外泌體能夠刺激淋巴細(xì)胞，增強(qiáng)針刺免疫調(diào)節(jié)的效果，且肥大細(xì)胞多集中于穴位，主要分布在毛細(xì)血管和周圍神經(jīng)，在針刺反應(yīng)下，肥大細(xì)胞沿神經(jīng)傳遞信息，興奮局部傳入神經(jīng)，外泌體也能刺激神經(jīng)末梢釋放肽物質(zhì)（substance p,SP），反饋到肥大細(xì)胞，進(jìn)一步刺激肥大細(xì)胞釋放免疫活性物質(zhì)，促進(jìn)針刺局部位點(diǎn)的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)[35]，這是導(dǎo)致針灸有效性的關(guān)鍵因素之一。

Su等[36]對(duì)經(jīng)針刺結(jié)合低頻電刺激和未予刺激的小鼠血清中的外泌體進(jìn)行了miRNAs測序，發(fā)現(xiàn)34種microRNAs發(fā)生改變，其中miR-181d-5p的含量增加明顯，而它可以作用于瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白7抗體（transient receptor potential melastain 7,TRPM7）[37]，TRPM7在神經(jīng)系統(tǒng)分布廣泛，是一種雙功能蛋白，具有陽離子通道和蛋白激酶雙重結(jié)構(gòu)，與血管損傷的關(guān)系密切，腦組織在缺血缺氧情況下，鈣離子大量內(nèi)流，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣超載，導(dǎo)致神經(jīng)元興奮毒性，TRPM7對(duì)鈣鎂等陽離子具有較高滲透性，維持細(xì)胞內(nèi)陽離子穩(wěn)態(tài)，通過調(diào)節(jié)鈣鎂離子的平衡而達(dá)到保護(hù)神經(jīng)元的作用[38]。針刺促進(jìn)外泌體分泌激發(fā)TRPM7，促進(jìn)氧糖剝奪后腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管生成，對(duì)IS患者的腦部血液供應(yīng)及神經(jīng)元保護(hù)具有重要作用。

Liu等[39]用電針刺激曲池和足三里，發(fā)現(xiàn)電針（electric acupuncture,EA）組梗死周圍皮質(zhì)中miR-9的表達(dá)增加，核因子kB（Nuclear factor kappa beta,NFkB）信號(hào)通路相關(guān)因子NF-kBp65，腫瘤壞死因子（tumour necrosis factor,TNF）-α和IL-1β減少。NF-kB是最重要的核轉(zhuǎn)錄因子之一[40]，當(dāng)腦梗死發(fā)生時(shí)NFkB抑制蛋白（inhibitor of NF-kB,IkB）可被IkB激酶磷酸化激活，NF-kB活化移位，部分腦細(xì)胞發(fā)生異常變化，導(dǎo)致下游多種促炎細(xì)胞因子分泌，損傷動(dòng)脈血管內(nèi)皮，腦組織血流灌注減少，缺血缺氧程度加重，最終導(dǎo)致腦血管閉塞。電針可以調(diào)節(jié)miR-9介導(dǎo)的NFkB信號(hào)傳導(dǎo)途徑并減少促炎細(xì)胞因子TNF-α和IL-1β的分泌，改善腦卒中患者的腦血流灌注。

另外，電針還可以通過下調(diào)miR-449a表達(dá)促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和神經(jīng)元的存活，miR-449在腦梗死患者的血清中較健康者的水平高，miR-499和血清C反應(yīng)蛋白呈正相關(guān)，并且能夠促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞生物標(biāo)志物巢蛋白、神經(jīng)元特異性核蛋白、降鈣素基因相關(guān)肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）的表達(dá)顯著增加，前者作為成熟神經(jīng)元的特異性標(biāo)志物，后者與神經(jīng)再生密切相關(guān)[41]，電針刺激減少miR-449的表達(dá)，有助于受損腦神經(jīng)的恢復(fù)。

因此電針可以促進(jìn)作為細(xì)胞間通信介質(zhì)的外泌體的分泌，在治療過程中起積極作用，以調(diào)節(jié)外泌體所攜帶的活性因子、miRNA等物質(zhì)數(shù)量表達(dá)的方式，有效改善IS的臨床癥狀。

5 小結(jié)與展望

外泌體因其具有穿過血腦屏障的獨(dú)特性以及分布廣泛的特點(diǎn)在IS的應(yīng)用中具有極大潛能，對(duì)腦組織損傷具有神經(jīng)保護(hù)及修復(fù)、促進(jìn)髓鞘再生、血管新生等作用，但目前關(guān)于外泌體的研究大多局限在miRNA領(lǐng)域，其他外泌體分泌物研究較少，關(guān)于外泌體中各種生物活性物質(zhì)的相互作用及靶向運(yùn)輸?shù)耐氛{(diào)控機(jī)制及高精度的外泌體分離提純的方式還不完善，而針灸因其穩(wěn)定性、安全性、簡便性被廣泛應(yīng)用于IS的治療中，它對(duì)于外泌體活性物質(zhì)有調(diào)節(jié)作用，然而具體機(jī)制尚不清楚，相關(guān)實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)較少。電針對(duì)于外泌體的作用與特定穴位之間的關(guān)聯(lián)也有待考究。進(jìn)一步開展有關(guān)實(shí)驗(yàn)，有助于研究電針對(duì)外泌體的影響，從而指導(dǎo)針灸臨床實(shí)踐。