長(zhǎng)鏈非編碼RNA在風(fēng)濕免疫病發(fā)病分子機(jī)制中的研究進(jìn)展

蒲金呈， 王 璇 綜述， 湯建平 審校

(同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，上海 200065)

長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA, lncRNA)是一類(lèi)長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸且不具備蛋白編碼功能的RNA，起初被認(rèn)為不具有任何功能，但隨著研究的進(jìn)一步深入，lncRNA在生物學(xué)和人體發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮的調(diào)控作用被發(fā)現(xiàn)。其中，lncRNA參與免疫系統(tǒng)多個(gè)環(huán)節(jié)的功能調(diào)節(jié)，在風(fēng)濕性疾病發(fā)病過(guò)程中有十分重要的作用。近年來(lái)一些研究提示lncRNA通過(guò)多種途徑參與調(diào)節(jié)多種風(fēng)濕免疫病發(fā)病相關(guān)基因的表達(dá)，從而影響該病的發(fā)病過(guò)程。

1 lncRNA

lncRNA在真核細(xì)胞中普遍表達(dá)，長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸，且不具有蛋白質(zhì)編碼功能，大部分通過(guò)RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生[1]，和mRNA結(jié)構(gòu)相似，具有5′帽子和3′polyA尾，也存在轉(zhuǎn)錄后選擇性剪接，但其序列常缺乏翻譯蛋白所需的開(kāi)放閱讀框(open reading frame, ORF)，在表達(dá)上則具有明顯的組織特異性和時(shí)空特異性，多數(shù)表現(xiàn)為精細(xì)的亞細(xì)胞定位[2]。

人類(lèi)98%基因組轉(zhuǎn)錄的RNA后不能進(jìn)一步翻譯，這些RNA只能以非編碼的形式存在[3]。而根據(jù)lncRNA在基因組上與蛋白編碼基因的位置關(guān)系，可將其分為5類(lèi)，分別是雙向lncRNA、正義lncRNA、反義lncRNA、內(nèi)含子間lncRNA及基因間lncRNA(intergenic lncRNA, lincRNA)[4]。LncRNA通過(guò)染色質(zhì)修飾和直接的轉(zhuǎn)錄調(diào)控參與基因調(diào)控的基本過(guò)程，根據(jù)其參與基因調(diào)控的作用方式，將其分為順式和反式lncRNA[5-6]。LncRNA產(chǎn)生主要有6種方式: (1) 蛋白質(zhì)編碼基因序列結(jié)構(gòu)中斷；(2) 染 色質(zhì)重排使兩段不轉(zhuǎn)錄的基因合并；(3) 在非編碼基因復(fù)制過(guò)程中出現(xiàn)反移位；(4) 局部的復(fù)制子串聯(lián)；(5) 蛋白編碼基因片段中有轉(zhuǎn)座子插入；(6) ORF出現(xiàn)突變等[7]。

在基因組轉(zhuǎn)錄過(guò)程中，lncRNA最初被認(rèn)為是意外產(chǎn)生的不具備任何生物學(xué)功能的一類(lèi)RNA[8]。但隨著研究的進(jìn)一步深入，發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過(guò)多種方式(如RNA-DNA相互作用、RNA-RNA堿基配對(duì)、RNA-蛋白相互作用等)在多種層面參與調(diào)控基因表達(dá)，從而參與X染色體沉默、染色質(zhì)表觀(guān)修飾、轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄干擾、核內(nèi)運(yùn)輸?shù)戎匾^(guò)程[2]。

目前關(guān)于lncRNA的研究主要通過(guò)lncRNA-seq或基因芯片檢測(cè)不同細(xì)胞或者組織中l(wèi)ncRNA的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)差異表達(dá)明顯的lncRNA[2]。再通過(guò)RT-PCR或者RT-qPCR驗(yàn)證,進(jìn)一步通過(guò)QD-FISH(fluorescence in situ hybridization)原位雜交技術(shù)進(jìn)行定位，或qRT-PCR分析由細(xì)胞核質(zhì)分離試劑盒分離得到的RNA來(lái)檢測(cè)其分布。通過(guò)5′cDNA末端快速擴(kuò)增(rapid amplification of cDNA ends, RACE)獲取lncRNA5′全長(zhǎng)，3′RACE獲取lncRNA3′全長(zhǎng)，最終得到lncRNA完整的全長(zhǎng)序列。通過(guò)過(guò)表達(dá)或沉默lncRNA后觀(guān)察表型，來(lái)研究lncRNA對(duì)細(xì)胞增殖、分化、凋亡和功能等的影響。通過(guò)構(gòu)建lncRNA過(guò)表達(dá)質(zhì)?；蚵《?、腺病毒包裝載體實(shí)現(xiàn)lncRNA過(guò)表達(dá)，通過(guò)siRNA、shRNA、反義核酸、CRISPR/Cas9等實(shí)現(xiàn)lncRNA沉默，經(jīng)qRT-PCR等驗(yàn)證上下調(diào)后觀(guān)察疾病相關(guān)基因表達(dá)和細(xì)胞表型等改變。還可以通過(guò)利用體外轉(zhuǎn)錄、RNA pull down、RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunopre-cipitation, RIP)、RNA純化染色質(zhì)分離(chromatin isolation by RNA purification, CHIRP)-seq等研究lncRNA與DNA、RNA和蛋白質(zhì)的相互作用[2]。

目前l(fā)ncRNA已在干細(xì)胞、個(gè)體發(fā)育和神經(jīng)科學(xué)等諸多生物學(xué)研究領(lǐng)域中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。而隨著高通量RNA測(cè)序技術(shù)的發(fā)展及相關(guān)研究的開(kāi)展，更多l(xiāng)ncRNA的功能及作用途徑得以闡釋?zhuān)杂性S多l(xiāng)ncRNA的功能及相關(guān)的分子生物學(xué)作用機(jī)制不甚明了，有待進(jìn)一步探索，包括許多與免疫系統(tǒng)有關(guān)的lncRNA。目前對(duì)編碼基因附近的lincRNA研究最為深入，它可以通過(guò)正向或負(fù)向調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄進(jìn)而產(chǎn)生不同的生物學(xué)效應(yīng)[9]。越來(lái)越多的研究證實(shí)lncRNA參與免疫紊亂甚至多種自身免疫疾病的發(fā)生。

2 lncRNA與免疫系統(tǒng)

2.1 lncRNA與骨髓造血干細(xì)胞

機(jī)體的免疫應(yīng)答包括固有免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，人體的多種細(xì)胞參與其中，其中大部分細(xì)胞由造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cells, HSCs)增殖分化而來(lái)?，F(xiàn)有研究表明lncRNA在HSCs和免疫反應(yīng)相關(guān)細(xì)胞的增殖分化過(guò)程中起著很大的作用。

作為最有名的lncRNA分子，X染色體失活特異轉(zhuǎn)錄物(X-inactive specific transcript, XIST)，它的缺陷會(huì)引起HSCs異常分化[10]；另一lncRNA H19的敲除則會(huì)使HSCs靜止期縮短[11]。通過(guò)高通量測(cè)序，Luo等[12]在鼠的HSCs中發(fā)現(xiàn)了159個(gè)表達(dá)上調(diào)的lncRNA，其中l(wèi)ncHSC-1和lncHSC-2特異性表達(dá)于HSCs，lncHSC-1在HSCs分化過(guò)程中發(fā)揮重要作用，而lncHSC-2參與了骨髓細(xì)胞分化及T細(xì)胞分化，lncHSC可能通過(guò)與造血細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子E2A相互作用參與功能調(diào)控，具體機(jī)制仍待進(jìn)一步研究[12]。

在免疫應(yīng)答的過(guò)程中，基因轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控與免疫反應(yīng)相關(guān)細(xì)胞的分化及活化密切相關(guān)，而lncRNA參與了這一調(diào)控過(guò)程，提示lncRNA可能通過(guò)調(diào)控免疫細(xì)胞的分化與活化過(guò)程，進(jìn)而影響免疫應(yīng)答過(guò)程[13]。

2.2 lncRNA與免疫細(xì)胞

2.2.1 lncRNA與固有免疫細(xì)胞 作為抵抗外界物質(zhì)入侵的第一道防線(xiàn)，固有免疫參與啟動(dòng)和維持機(jī)體的免疫應(yīng)答。在固有免疫應(yīng)答過(guò)程中，巨噬細(xì)胞、自然殺傷(natural killer, NK)細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells, DCs)等發(fā)揮了重要的作用。病原體入侵后，固有免疫細(xì)胞中一些lncRNA會(huì)出現(xiàn)明顯的上調(diào)或下調(diào)，據(jù)此考慮lncRNA可能通過(guò)影響固有免疫細(xì)胞參與固有免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)[14]。

一項(xiàng)研究對(duì)Toll樣受體(Toll-like receptors, TLRs)激動(dòng)劑刺激的巨噬細(xì)胞進(jìn)行全基因組表達(dá)分析，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其中的一個(gè)由TLRs刺激誘導(dǎo)產(chǎn)生的lncRNA ROCKI(regulator of cytokines and inflammation)，它能通過(guò)多種途徑發(fā)揮促炎作用，此外還發(fā)現(xiàn)影響其表達(dá)的基因突變能降低結(jié)核和克羅恩病等炎癥感染性疾病風(fēng)險(xiǎn)[15]。另有研究報(bào)道，腫瘤壞死因子-α和異質(zhì)核糖核蛋白L相關(guān)的免疫調(diào)節(jié)lincRNA(TNF-α and hnRNPL related immuno-regulatory lincRNA, THRIL)通過(guò)與異質(zhì)核糖核蛋白L(heterogenous nuclear ribonucleoprotein L, hnRNPL)形成復(fù)合體結(jié)合腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α啟動(dòng)子區(qū)下調(diào)其表達(dá)來(lái)參與人類(lèi)固有免疫反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致炎性疾病[16]。Hu等[17]發(fā)現(xiàn)在巨噬細(xì)胞后期炎癥基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程中，lincRNA-Cox2通過(guò)激活NF-κB起調(diào)控作用。

作為重要的抗原提呈細(xì)胞，樹(shù)突狀細(xì)胞同時(shí)參與了固有免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，是免疫應(yīng)答過(guò)程中關(guān)鍵的一部分。一項(xiàng)研究通過(guò)測(cè)序技術(shù)從DCs中篩選出一種特異性表達(dá)的lncRNA，并命名為lnc-DC，通過(guò)RNA-pulldown、ChIP-seq等技術(shù)發(fā)現(xiàn)lnc-DC能通過(guò)與STAT3結(jié)合抑制其去磷酸化，促進(jìn)人和小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞成熟。發(fā)現(xiàn)下調(diào)lnc-DC可以降低與DCs抗原提呈相關(guān)基因表達(dá)，影響DCs的抗原提呈功能，進(jìn)而影響T細(xì)胞功能和相關(guān)細(xì)胞因子的分泌[18]，影響適應(yīng)性免疫應(yīng)答過(guò)程。

2.2.2 lncRNA與適應(yīng)性免疫細(xì)胞 適應(yīng)性免疫應(yīng)答是免疫應(yīng)答過(guò)程中重要的組成部分，主要是T細(xì)胞和B細(xì)胞活化、增殖、分化并產(chǎn)生一系列生物學(xué)效應(yīng)的過(guò)程。

CD4+T細(xì)胞主要分化成Th1、Th2、Th17和Treg等效應(yīng)細(xì)胞參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答。其中Th1和Th2細(xì)胞lncRNA相關(guān)的研究最多。目前已有一些特異性表達(dá)于Th1和Th2細(xì)胞中的lncRNA被發(fā)現(xiàn)[19]。在T細(xì)胞中最早發(fā)現(xiàn)的lncRNA是活化T細(xì)胞核因子的非編碼抑制子(noncoding repressor of nuclear factor of activated T cells, NRON)和T細(xì)胞非編碼轉(zhuǎn)錄本(non-coding transcript in T cells, NTT)[19-20]。NRON可能與白細(xì)胞介素2(interleukin 2, IL-2)表達(dá)的調(diào)控有關(guān)[20]，而NTT則可能與γ-干擾素(interferon γ, IFN-γ)受體基因表達(dá)調(diào)控有關(guān)[19]。TMEVPG1(或NeST)[21-22]是一種在Th1細(xì)胞中特異性表達(dá)的lncRNA，通過(guò)上調(diào)IFN-γ編碼基因的表達(dá)影響免疫應(yīng)答。在Th2細(xì)胞中特異性表達(dá)的lincRNA-Ccr2-5′AS則與參與Th2細(xì)胞趨化因子信號(hào)通路的基因高度相關(guān)[22]。有研究證實(shí)敲除lincRNA-Ccr2-5′AS能降低其鄰近趨化因子受體基因的表達(dá)，并影響Th2細(xì)胞向肺組織的遷移。同時(shí)它還能協(xié)同GATA3調(diào)控Th2細(xì)胞中免疫基因表達(dá)，繼而影響Th2細(xì)胞增殖。

一項(xiàng)研究提出lncRNA可能通過(guò)與B細(xì)胞分化相關(guān)的特異性轉(zhuǎn)錄因子PAX5結(jié)合影響B(tài)細(xì)胞的分化，進(jìn)而影響適應(yīng)性免疫應(yīng)答[23]。

3 lncRNA與風(fēng)濕免疫病發(fā)病機(jī)制

3.1 lncRNA與干燥綜合征(Sjogren’s syndrome, SS)

SS是一種自身免疫性疾病，主要是淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)影響唾液腺、淚腺等全身外分泌腺功能，并可累及全身多部位臟器[24]，其發(fā)病機(jī)制仍不甚清楚，根據(jù)現(xiàn)有的研究，SS的發(fā)病可能與免疫耐受缺陷，T、B淋巴細(xì)胞功能異常，細(xì)胞因子異常等有一定的相關(guān)性[25]。

對(duì)于SS相關(guān)的lncRNA，已有一些學(xué)者作出一些總結(jié)。其中，Sandhya等[26]根據(jù)既有文獻(xiàn)和微陣列芯片數(shù)據(jù)，提出可能與SS發(fā)病相關(guān)的lncRNA，包括NeST、lincRNA-Cox2、lncRNA-CMPK2、MALAT1、lincRNA-Ccr2-5′AS等。Gao等[27]提出有11種lncRNA與SS相關(guān)聯(lián)，包括ENST00000420219、ENST00000455309、ENST00000546086、LINC00426、LINC02384、Lnc-UTS2D-1: 1、n336161、n340599、NR_002712、TCONS_l2_00014794、TMEVPG1。

Shi等[28]通過(guò)微陣列分析SS患者及正常人的唇腺活檢標(biāo)本，對(duì)比發(fā)現(xiàn)SS患者與正常對(duì)照組的唇腺組織有顯著差異表達(dá)的1243個(gè)lncRNA，其中890個(gè)較對(duì)照組上調(diào)，353個(gè)較對(duì)照組下調(diào)，通過(guò)RT-PCR技術(shù)對(duì)其中顯著差異表達(dá)的8個(gè)lncRNA進(jìn)行驗(yàn)證，證實(shí)差異性表達(dá)存在，且與病程、β2-微球蛋白、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、類(lèi)風(fēng)濕因子(rheumatoid factor, RF)、免疫球蛋白(immunoglo-bulin, Ig)A和IgM等密切相關(guān)，其中ENST0000-0455309.1最為顯著。進(jìn)一步通過(guò)lnc-RNA-mRNA共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)對(duì)這8個(gè)lncRNA進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)它們可能通過(guò)NF-κB、趨化因子及TNF信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控[28]。

Kambara等[29]研究發(fā)現(xiàn)，SS患者外周血單核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中過(guò)表達(dá)干擾素(interferon, IFN)應(yīng)答基因，通過(guò)IFN-α處理可以使人肝細(xì)胞中l(wèi)ncRNA-CMPK2表達(dá)出現(xiàn)明顯上調(diào)。Wang等[30]于2016年的研究顯示，SS患者Th1 細(xì)胞比例、IFN-γ、T-bet及CD4+T細(xì)胞內(nèi)的TMEVPG1較正常人明顯升高，其中TMEVPG1表達(dá)與ESR、IgG、人干燥綜合征A抗原(Sjogren’s syndrome-related antigen A, SSA)正相關(guān)，提示TMEVPG1可能通過(guò)調(diào)控T-bet影響IFN-γ的表達(dá)而影響SS發(fā)病過(guò)程，也揭示了TMEVPG1用于SS患者疾病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以延緩其進(jìn)展及通過(guò)對(duì)應(yīng)的siRNA下調(diào)TMEVPG1治療SS的可能。IFNG-AS和心肌梗死相關(guān)轉(zhuǎn)錄物(MIAT，也稱(chēng)為RNCR2)在SS患者中上調(diào)[26,30]。SS患者CD4+T細(xì)胞中的TBX21(encoding T-bet)和IFNG mRNA的水平相較于健康個(gè)體上調(diào)[30]，表明IFNG-AS1在SS發(fā)展中的作用。

最近一項(xiàng)對(duì)150例中國(guó)漢族原發(fā)性干燥綜合征患者的研究提示，H19 rs2839698、rs3741219和HOTAIR rs920778多態(tài)性可能與中國(guó)人原發(fā)性干燥綜合征的遺傳背景無(wú)關(guān)[31]。

本研究小組通過(guò)艾拉莫德對(duì)SS模型小鼠進(jìn)行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)鼠頜下腺中l(wèi)ncRNA-Gm26670的表達(dá)顯著下降，通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)Gm26670可能作用于其下游同樣位于1號(hào)染色體的腫瘤壞死因子受體相關(guān)分子5(tumor necrosis factor receptor-asso-ciated factor 5, TRAF5)的mRNA(NC_000067.6，191997203.192092599)序列。后續(xù)表達(dá)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，TRAF5經(jīng)艾拉莫德干預(yù)后，在小鼠頜下腺組織表達(dá)顯著上調(diào)。

3.2 lncRNA與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis, RA)，一種以滑膜炎為主要表現(xiàn)的慢性自身免疫病，目前病因未明，以手、足多個(gè)小關(guān)節(jié)的對(duì)稱(chēng)性、侵襲性炎癥為特點(diǎn)，常伴有臟器受累，類(lèi)風(fēng)濕因子檢測(cè)常呈陽(yáng)性，未經(jīng)系統(tǒng)有效治療的患者最終可能會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)畸形和關(guān)節(jié)功能喪失，發(fā)病機(jī)制仍待進(jìn)一步探究，目前已有研究證實(shí)IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子在RA發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮了重要作用[32-33]。

一項(xiàng)研究對(duì)RA患者CD14+單核細(xì)胞中的lncRNA表達(dá)情況的分析發(fā)現(xiàn)，IL-6和TNF-α參與調(diào)控不同的lncRNA轉(zhuǎn)錄，且TNF-α參與調(diào)控的lncRNA多于IL-6，表明lncRNA在RA發(fā)病過(guò)程中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控具有一定的特異性[34]。對(duì)RA患者與正常人PBMC中l(wèi)ncRNA基因芯片分析表明，7個(gè)lncRNA(LUST、Hotair、antiNOS2A、MEG9、SNHG4、TUG1和NEAT1)表達(dá)明顯上調(diào)，3個(gè)lncRNA(mascRNA、PR、PRINS和HOXA3as)表達(dá)明顯下調(diào)[35]。

Song等[35]對(duì)RA患者血清外泌體和PBMC的研究發(fā)現(xiàn)，HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA(HOX transcript antisense RNA, HOTAIR)表達(dá)明顯上調(diào)，繼而引起活化巨噬細(xì)胞遷移。而滑膜細(xì)胞和分化型破骨細(xì)胞中的HOTAIR表達(dá)卻出現(xiàn)明顯下調(diào)，并引起基質(zhì)金屬蛋白酶(metal matrix proteinase, MMP)-2和 MMP-13表達(dá)降低，提示HOTAIR用于RA發(fā)病機(jī)制研究及診斷的可能。

H19是另一類(lèi)與RA密切相關(guān)的lncRNA[36]。有研究報(bào)道RA患者較健康人群、關(guān)節(jié)創(chuàng)傷患者和骨關(guān)節(jié)炎及反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織中的H19表達(dá)出現(xiàn)明顯上調(diào)。通過(guò)微陣列分析RA患者和健康人群的骨髓細(xì)胞及血清發(fā)現(xiàn)，RA患者骨髓細(xì)胞中H19相對(duì)正常人高表達(dá)，而血清中H19與正常人對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[31,36]。

近期一項(xiàng)研究將RA患者與正常對(duì)照組T細(xì)胞對(duì)比發(fā)現(xiàn)，lncRNA LOC100506036和LOC100652951表達(dá)升高。而通過(guò)下調(diào)LOC100506036表達(dá)可引起酸性鞘磷脂酶1(sphingomyelin phosphodiesterase 1, SMPD1)及活化T細(xì)胞核因子1(nuclear factor of activated T cells 1, NFAT1)表達(dá)降低，提示LOC-100506036參與RA發(fā)病的可能機(jī)制[37]，也為治療提供了新思路。生物制劑的使用可以下調(diào)RA患者T細(xì)胞中LOC100652951的表達(dá)[37]提示LOC100652951與RA發(fā)病密切相關(guān)。

既有研究證實(shí)基因TRAF1(TNF receptor asso-ciated factor 1)-C5區(qū)域的單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphism, SNP)位點(diǎn)與RA患者的遺傳易感性有一定的相關(guān)性[38-39]，且TRAF1負(fù)調(diào)控TNF-α表達(dá)[40]。一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)位于TRAF1和C5兩編碼基因之間的lncRNA-C5T1能調(diào)控RA患者滑膜成纖維細(xì)胞中C5的表達(dá)[41]。

此外，有研究發(fā)現(xiàn)，RA患者lincRNA-p21低表達(dá)，而NF-κB活化標(biāo)志物表達(dá)卻出現(xiàn)明顯升高，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)lincRNA-p21可能通過(guò)抑制NF-κB活性進(jìn)而影響RA的發(fā)病過(guò)程[42]。該研究還發(fā)現(xiàn)甲氨蝶呤治療RA不僅能顯著改善患者狀況，同時(shí)還能通過(guò)上調(diào)lincRNA-p21表達(dá)抑制NF-κB活化[42]，提示甲氨蝶呤對(duì)RA的治療機(jī)制可能與lncRNA有關(guān)。此外，有研究發(fā)現(xiàn)紫草素能通過(guò)影響RA模型小鼠lncRNA-NR024118的表達(dá)來(lái)抑制炎癥反應(yīng)發(fā)生發(fā)展。這也為調(diào)節(jié)lncRNA治療RA及相關(guān)機(jī)制研究提供更多的思路。

3.3 lncRNA與系統(tǒng)性紅斑狼瘡

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus, SLE)是一種影響多個(gè)臟器功能的慢性自身免疫病?；颊叨酁橛g期女性，臨床癥狀多樣，且早期癥狀往往不典型，為SLE的診斷及治療帶來(lái)不小的難度。

一項(xiàng)對(duì)SLE小鼠模型的研究[43]發(fā)現(xiàn)，生長(zhǎng)抑制特異性轉(zhuǎn)錄本5(growth arrest-specific transcript 5, lncRNAGAS5)與SLE的發(fā)生有一定的相關(guān)性。GAS5的下調(diào)與GAS5啟動(dòng)子區(qū)域Sp1(specificity protein 1)結(jié)合位點(diǎn)的缺失有關(guān)，進(jìn)而出現(xiàn)細(xì)胞凋亡抑制，自身抗原的暴露及自身抗體產(chǎn)生[43]。Mayama等[44]對(duì)SLE患者B細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)GAS5的表達(dá)均出現(xiàn)下調(diào)。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)SLE發(fā)病與GAS5在染色體1q25的位點(diǎn)有關(guān)[45]。除此之外，GAS5還具有抑制T細(xì)胞增殖的作用，表明GAS5可能通過(guò)影響T細(xì)胞水平從而在SLE的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。但GAS5因其結(jié)構(gòu)能與糖皮質(zhì)激素應(yīng)答元件競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合糖皮質(zhì)激素受體，影響糖皮質(zhì)激素的抗炎作用，故其減少是否會(huì)導(dǎo)致人體對(duì)糖皮質(zhì)激素敏感性增加仍待進(jìn)一步探究。

Ⅰ型IFN通路在SLE發(fā)病過(guò)程中起著重要的作用，一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者外周血細(xì)胞lncRNA-NEAT1表達(dá)水平較正常對(duì)照組高，同時(shí)NEAT1水平與疾病活動(dòng)度、腎臟受累及IFN積分有一定的相關(guān)性，考慮NEAT1可能通過(guò)IFN通路影響SLE疾病的發(fā)生發(fā)展[46]。Zhang等[47]對(duì)SLE患者的研究發(fā)現(xiàn)，NEAT1還可以通過(guò)MAPK通路促進(jìn)CXCL10等趨化因子和IL-6等炎癥因子的表達(dá)。

此外，Wu等[48]研究發(fā)現(xiàn)，linc0597和linc0949在SLE患者的PBMC中的表達(dá)較正常人和RA患者低，其中l(wèi)inc0949表達(dá)水平與SLE患者的疾病活動(dòng)度、C3水平和腎臟受累等相關(guān)，同時(shí)在狼瘡腎炎患者中l(wèi)incRNA0949表達(dá)下調(diào)，提示linc0949可能成為SLE的生物標(biāo)志物。另一項(xiàng)研究[49]顯示SLE患者linc0949表達(dá)較正常人明顯下調(diào)，linc0597的表達(dá)水平與正常人無(wú)明顯差異。相關(guān)研究結(jié)果仍待進(jìn)一步探究。

最近的一項(xiàng)研究[50]發(fā)現(xiàn)SLE患者血漿linc0597、lnc0640、lnc5150水平較HCs升高，而GAS5、lnc7074水平下降，并通過(guò)進(jìn)一步研究證實(shí)血漿中的這5個(gè)lncRNA(GAS5, lnc7074, linc0597, lnc0640, lnc5150)組合作為SLE生物標(biāo)志物的可行性。

4 展 望

近幾年高通量測(cè)序技術(shù)應(yīng)用的推廣使得lncRNA家族的成員不斷增加，而lncRNA在生物學(xué)研究領(lǐng)域也逐漸受到關(guān)注，其在免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮的作用也逐漸被認(rèn)知，lncRNA參與調(diào)控免疫應(yīng)答過(guò)程中多種細(xì)胞增殖、分化和功能進(jìn)而導(dǎo)致疾病發(fā)生發(fā)展[51]。但目前對(duì)在風(fēng)濕免疫病發(fā)病過(guò)程中起到重要作用的lncRNA及其作用機(jī)制的研究還相對(duì)較少，哪些lncRNA在風(fēng)濕免疫病患者中存在異常，這些異常影響了哪些免疫細(xì)胞通路中的具體哪些環(huán)節(jié)，對(duì)免疫耐受的打破、抗原提呈細(xì)胞提呈自身抗原、對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞的分化及活化、對(duì)免疫炎癥效應(yīng)階段的調(diào)控，能否用于風(fēng)濕免疫病的早期診斷和特異性、個(gè)體化治療，仍有待進(jìn)一步的探究。但相信隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和關(guān)于lncRNA研究的進(jìn)一步深入，有關(guān)lncRNA的研究一定能在風(fēng)濕免疫病的預(yù)防和診治過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。