2014—2018年陜西省發(fā)病豬群主要疫病檢測與分析

仇薪鑫　孟姣　張振倉

摘要：為掌握近5年陜西省豬群主要疫病感染情況，進一步摸清陜西省規(guī)?；B(yǎng)豬場面臨的主要疫病負擔和流行特點，對2014—2018年來自陜西省西安、寶雞、商洛等10個地區(qū)發(fā)病豬群中的753份組織病料樣品的病毒及細菌檢測結果進行分析。結果顯示，2018年CSFV、PRRSV、PCV2、TGEV、PEDV、RV等病毒病感染情況呈明顯上升趨勢，其中，CSFV、PRRSV、PCV2和TGEV、PEDV、RV陽性檢出率較高，分別為50.00%、30.83%、72.50%和66.67%;PRV-gE、PPV和JEV 3種病毒病自2016年后呈明顯下降趨勢，已達控制水平;PPV、JEV 2種病毒病部分地區(qū)存在散發(fā)流行，陽性率在5%以下。渭南地區(qū)PRV-gE平均陽性率可達40.33%，應當注重PRV-gE的檢測和凈化工作，商洛地區(qū)JEV平均陽性率為24.00%，應重點控制，防止出現(xiàn)大規(guī)模感染和流行。近5年陜西省發(fā)病豬群細菌病以大腸桿菌、鏈球菌、巴氏桿菌感染為主，沙門氏菌和副豬嗜血桿菌陽性率總體上升，需要重點預防和控制。研究結果可為陜西省不同地區(qū)制定合理、有效防控措施和資源配置提供有力依據(jù)。

關鍵詞：病毒;細菌;陽性率;流行;感染;豬群疫病

中圖分類號：S858.28?? 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2020）19-0172-05

收稿日期：2019-11-15

基金項目：動物疫病流行病學調查與研究項目（編號：2030208）。

作者簡介：仇薪鑫（1993—），男，陜西富平人，碩士，講師，主要從事動物傳染病的檢測研究。E-mail：ylzyqiuxinxin@163.com。

疫病的流行是影響我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要因素之一，特別是傳染性強、危害嚴重的病毒性與細菌性疫病一直是最具威脅的防控因素，長期的感染狀態(tài)與流行給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經濟損失。目前，國家對于危害嚴重的部分疫病已采取強制免疫措施，但仍然存在持續(xù)感染和呈現(xiàn)地方流行性特點。做好生豬疫病病原學檢測工作，有助于幫助人們掌握病原感染狀況及流行趨勢，為制定有效的防控措施提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品

組織病料來自2014—2018年接受送檢的陜西省各地區(qū)發(fā)病豬群樣品，共計763份。

1.2 病毒毒株

豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬偽狂犬病病毒（PRV-gE）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、流行性腹瀉病毒（PEDV）、輪狀病毒（RV）、豬細小病毒（PPV）、豬乙型腦炎病毒（JEV）均由西北農林科技大學重大動物疫病防控與傳染病實驗室提供。

1.3 主要試劑

病毒DNA、RNA提取試劑盒、反轉錄試劑盒，均購自北京全式金生物技術有限公司;DL 2000 DNA Maker，購自寶生物工程（大連）有限公司;2×Taq Master Mix，購自康維試劑生物科技有限公司。

1.4 方法

1.4.1 病毒檢測

通過聚合酶鏈式反應（PCR）或反轉錄-聚合酶鏈式反應（RT-PCR）進行病毒檢測，病毒DNA、RNA提取及cDNA合成嚴格按照試劑盒說明書進行操作。PCR產物于1%的瓊脂糖凝膠中電泳，凝膠中含有0.5 μg/mL溴化乙錠，觀察結果。

1.4.2 細菌的分離與鑒定

無菌采集樣品，無菌環(huán)境中接種血液瓊脂培養(yǎng)基，37 ℃恒溫培養(yǎng)12～24 h，染色鏡檢，疑似大腸桿菌接種于麥康凱培養(yǎng)基，疑似鏈球菌、巴氏桿菌接種于血液瓊脂培養(yǎng)基，疑似沙門氏菌接種于沙門氏菌-志賀氏菌培養(yǎng)基，疑似副豬嗜血桿菌接種于胰蛋白酶大豆瓊脂（tryptic soy agar，TSA）培養(yǎng)基，均培養(yǎng)12～18 h，染色鏡檢，初步確定菌落，分別挑取單菌落，純化培養(yǎng)，進行生化鑒定，確定細菌種屬，保存細菌于4 ℃。

1.5 引物設計

引物由筆者所在實驗室設計或來自文獻查閱，已證明具有較高特異性和敏感性，引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，詳見表1。

2 結果與分析

2.1 陜西省發(fā)病豬群病毒檢測總體結果

2014—2018年期間，對陜西省發(fā)病豬群的763份組織病料進行病毒檢測。由表2、圖1可知，CSFV核酸陽性率在2017年最低，為18.67%;2018年最高，達50.00%，總體呈上升趨勢。PRRSV核酸陽性率在2015年最高，為32.95%;2016—2018年從13.38%上升至30.83%。PRV-gE核酸陽性率在2016年最高，為26.02%，之后逐年下降，到2018年最低，為13.33%。PCV2核酸陽性率在2018年陽性率達72.50%，較2017年明顯升高。TGEV、PEDV、RV 3種病毒核酸陽性率在2018年最高，為66.67%;2017年最低，為13.33%。PPV核酸陽性率在2015年為最高，為10.23%;2016年下降至2.23%，2018年最低，為1.67%。JEV核酸陽性率從2014年的5.69%上升至2015年的14.77%，2016年下降至2.23%，2017年未檢測到陽性，2018年為4.17%。結果表明，2018年CSFV、PRRSV、PCV2、TGEV、PEDV、RV等病毒病核酸陽性率較2017年均有明顯升高，特別是PCV2和TGEV、PEDV、RV等病毒病，應引起重視，加強防控工作;而PRV-gE、PPV和JEV 3種病毒病自2016年以后發(fā)病較輕或呈明顯下降趨勢，已達到控制水平，未來應做好監(jiān)測工作，使其維持較低的發(fā)病水平。

2.2 陜西省各地區(qū)發(fā)病豬群病毒檢測結果

對2014—2018年期間來自陜西省不同地區(qū)發(fā)病豬群送檢病料組織樣品進行病毒檢測，其中西安地區(qū)117份、銅川地區(qū)81份、寶雞地區(qū)95份、咸陽地區(qū)74份、渭南地區(qū)54份、延安地區(qū)52份、漢中地區(qū)136份、榆林地區(qū)44份、安康地區(qū)82份、商洛地區(qū)28份。由表3和圖2可知，CSFV、PRRSV、PCV2 3種腹瀉病毒病在西安、銅川、咸陽、渭南、漢中、榆林、安康、商洛等地均為高陽性率，平均在20%～40%，應當繼續(xù)加大檢測力度，優(yōu)化防控措施，進一步降低感染水平，降低發(fā)病率;PRV-gE在西安、銅川2地陽性率較低，平均在5%以下，其他地區(qū)均為高陽性率，最高為渭南地區(qū)，平均可達40.33%，渭南地區(qū)應當注重PRV gE的檢測和凈化，逐步降低其感染情況;PPV在銅川、寶雞、延安等地未檢測到陽性，其他地區(qū)均呈較低陽性率，5年期間平均維持在10.80%以下;JEV在寶雞、漢中未檢測到陽性，商洛地區(qū)最高，平均陽性率為25.33%，其他地區(qū)呈較低發(fā)病水平，平均陽性率均在9.33%以下。對于PPV、JEV 2種病毒病，在未檢測到陽性的地區(qū)應做好監(jiān)測和預防工作，其他地區(qū)應繼續(xù)加強控制措施，進一步降低發(fā)病風險，保持其較低的感染狀態(tài)，以防出現(xiàn)大規(guī)模感染和流行。

2.3 陜西省發(fā)病豬群細菌分離鑒定結果

經對送檢病料組織進行細菌分離鑒定，由表4和圖3可知，2014—2018年期間，陜西省發(fā)病豬群中細菌感染以大腸桿菌、鏈球菌、巴氏桿菌為主，其中大腸桿菌檢出率連續(xù)2年達50.00%，鏈球菌檢出率最高為33.33%，巴氏桿菌檢出率連續(xù)3年在25.00%～33.33%之間，2018年檢出率下降為1.41%。沙門氏菌和副豬嗜血桿菌也呈地方流行趨勢，特別是2018年沙門氏菌檢出率明顯升高，達21.12%，說明沙門氏菌感染情況嚴重，未來應更加注重其檢測和控制力度，防止大規(guī)模感染。通過以上5種細菌檢測結果，說明近年來陜西地區(qū)細菌總體感染情況呈明顯上升趨勢，并呈現(xiàn)地方流行性，難以根除，在養(yǎng)殖過程中，需要注重消毒工作，進一步加強管理、凈化養(yǎng)殖環(huán)境、合理用藥，以防止豬群產生更強的耐藥性，發(fā)生嚴重感染和疫情，影響豬群生產及衛(wèi)生安全。

3 討論

本試驗通過對2014—2018年期間送檢的來自陜西省10個地區(qū)的發(fā)病豬群病料組織樣品進行病毒和細菌檢測，分析其主要疫病5年期間在陜西省各地的發(fā)病和感染情況。病毒病中PCV2和PRRSV平均陽性檢出率最高，雖然陜西省在這2種疫病方面采取了較好的免疫措施，但由于2種病毒具有對外界環(huán)境有較強的抵抗力和易產生變異性的特點，因此，單純的疫苗免疫措施并不能很好地控制其感染和發(fā)病，應當注重及時評估環(huán)境的凈化和消毒效果，做好多層面防控工作[2-3]。CSFV、PRV-gE及3種腹瀉病毒病在陜西各地區(qū)均呈地方流行性，普遍存在于各養(yǎng)殖場，特別是PRV-gE一旦感染母豬群，會表現(xiàn)為循環(huán)感染，呈長期攜帶狀態(tài)，對豬群的健康造成很大威脅，并且很難根除，只有通過免疫和檢測手段不斷淘汰母豬，才能逐步實現(xiàn)豬群中PRV-gE的清除。PPV、JEV 2種病毒病在陜西的部分地區(qū)存在感染和流行，2014—2016年受檢樣品陽性率呈同步升高趨勢，2016年后，基本達到了控制甚至消滅的狀態(tài)，基本不影響正常養(yǎng)殖。細菌病中，本試驗比較了2014年以來，5種細菌的陽性檢出率，主要表現(xiàn)為大腸桿菌、鏈球菌和巴氏桿菌感染率較高;沙門氏菌和副豬嗜血桿菌感染近5年也呈總體上升趨勢，已嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康生產。

由于病毒感染的持續(xù)存在，引起豬機體免疫功能受損，抵抗力下降，導致細菌病普遍存在，加上外界環(huán)境因素的應激，容易出現(xiàn)呼吸道癥狀和腹瀉癥狀。近幾年，由于養(yǎng)殖企業(yè)防疫意識的提高，政府越來越重視免疫監(jiān)測工作，基本預防措施能夠保證，但由于環(huán)境衛(wèi)生質量的降低，生物安全措施很難實現(xiàn)落地，導致病毒病和細菌病長期存在流行[5-6]。因此，對于陜西省當前面臨的疫病負擔，在做好當前防控工作的基礎上，應該更加注重生物安全、環(huán)境消毒和凈化工作，通過建立合理健全的生物安全體系，完善并細化消毒制度，制定高效的免疫程序，設計合理的環(huán)境凈化方案，實現(xiàn)疫病的有效控制，降低其感染和發(fā)病水平，減輕養(yǎng)殖負擔，促進高效健康養(yǎng)殖的發(fā)展。

參考文獻：

[1]楊漢春，蘇 佳，周 磊. 2015年豬病流行情況與2016年流行趨勢及防控對策[J]. 豬業(yè)科學，2016，33（2）：39-41.

[2]王釗哲，舒相華，楊亮宇，等. 云南省部分地區(qū)72家規(guī)?；i場豬偽狂犬病凈化效果分析[J]. 中國獸醫(yī)學報，2017，37（4）：597-600.

[3]鄭 浩，張建武，袁世山. 豬源乙型腦炎病毒的分離鑒定及其E基因分析[J]. 中國獸醫(yī)科學，2009，39（6）：476-482.

[4]王娟萍，姚敬明，高英杰，等. 多重PCR/RT-PCR技術檢測PRRSV、PPV、PRV和PCV-2[J]. 中國獸醫(yī)學報，2009，29（3）：258-262.

[5]董 波，張寄香，戴愛玲，等. 閩西地區(qū)仔豬病毒性腹瀉流行情況調查[J]. 江蘇農業(yè)科學，2018，46（12）：144-146.

[6]馬振乾，楊旭兵，劉曉東，等. 2017年上半年我國4種常見豬病流行特點分析[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)，2018（18）：97-99.