益母草治療寒凝型青春期痛經(jīng)的藥理學(xué)作用分析

文/王勇

青春期痛經(jīng)是臨床上最常見的疾病之一，多見于育齡婦女。青春期痛經(jīng)主要分為原發(fā)性青春期痛經(jīng)(PD)和繼發(fā)性青春期痛經(jīng)(SD)，青春期痛經(jīng)是最常見的婦科疾病之一，影響全球50%的女性，其中10%的女性癥狀嚴(yán)重，是影響女性正常工作和生活質(zhì)量的常見原因。目前，西醫(yī)對(duì)帕金森病的治療還沒有得到滿意的治療方案。非甾體抗炎藥和口服避孕藥因?yàn)槠鋰?yán)重的不良反應(yīng)而限制了其臨床應(yīng)用。

中醫(yī)藥治療帕金森病的有效方法有很多，在改善青少年痛經(jīng)癥狀和遠(yuǎn)期療效方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢。益母草為唇形科植物益母草，其鮮干地上部分具有活血調(diào)經(jīng)、利水消腫、清熱解毒等功效，常用于血瘀閉經(jīng)、青春期痛經(jīng)、痛經(jīng)、水腫、排尿不良等臨床癥狀。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是利用網(wǎng)絡(luò)方法分析藥物與疾病、靶點(diǎn)之間“多組分、多靶點(diǎn)、多途徑”的協(xié)同關(guān)系的藥理學(xué)分支。它是從系統(tǒng)層面揭示中醫(yī)藥對(duì)人體調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)作用的一門新學(xué)科。因此，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)為研究中醫(yī)藥與現(xiàn)代藥理學(xué)的關(guān)系搭建了一座橋梁。本研究在系統(tǒng)查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，構(gòu)建益母草成分?jǐn)?shù)據(jù)庫，利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測和篩選益母草潛在的活性成分和治療青少年痛經(jīng)的靶點(diǎn)。探討益母草多組分、多靶點(diǎn)、多途徑治療寒凝血瘀型青春期痛經(jīng)的作用機(jī)制，為益母草的進(jìn)一步開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。

一、蒙藥益母草的化學(xué)成分研究

蒙藥益母草主要生長在內(nèi)蒙古烏蘭察布、東阿拉善、陜西、寧夏等荒漠草原的沙質(zhì)和丘陵地帶，被列為內(nèi)蒙古自治區(qū)二級(jí)瀕危植物。因此，有科研人員專門分析了益母草引種栽培的相關(guān)內(nèi)容，認(rèn)為阿拉善益母草生命力強(qiáng)，引種后能正常生長、開花結(jié)果，可用于試種。目前，已從蒙藥益母草中分離出多種無機(jī)和有機(jī)成分。下面進(jìn)行具體介紹：

1.黃酮類成分

2001年，邱樹賢在薄層色譜的幫助下，發(fā)現(xiàn)益母草中含有8種黃酮類化合物。對(duì)益母草和益母草中的黃酮類化合物進(jìn)行了詳細(xì)的比較，發(fā)現(xiàn)其中5種是不同的。同時(shí)，益母草干燥粉碎，最后用乙酸乙酯提取。結(jié)果表明，該提取物上清液中含有6種黃酮類有機(jī)化合物。邵彩云、王清虎于2013年在內(nèi)蒙古鄂爾多斯地區(qū)采集了白衣木草原部分作為標(biāo)本，干燥后依次用氯仿、乙酸乙酯、丙酮提取過濾。最后得到一定量的益母草乙酸乙酯提取物。研究表明，整個(gè)提取物含有9種化合物，其中黃酮類化合物以三甲氧基黃酮和二甲氧基黃酮的形式存在。

2.生物堿類成分

李雪莉和王東均以野外采集的益母草作為樣品，分別用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法測定了益母草中鹽酸水蘇堿的含量。這項(xiàng)測試也充分證明了益母草中含有一定的生物堿。同時(shí)，這些生物堿主要存在于益母草的花和莖中，5月份植物中的生物堿含量最高。邱樹賢還對(duì)比了益母草和益母草的生物堿，并指出兩種植物的生物堿種類相同，即水蘇堿和益母草。

3.甾醇類和其他有機(jī)小分子

通過柱層析，侯鳳飛和鄭亞飛從益母草中分離出7個(gè)化合物，其中包括兩種甾醇，分別鑒定為β-谷甾醇和豆甾醇。另一方面，邵彩云從益母草中分離出一些有機(jī)小分子，如咖啡酸、7-甲氧基香豆素等。

4.無機(jī)金屬成分

喬軍嬌對(duì)益母草中的無機(jī)成分進(jìn)行了總結(jié)，結(jié)果表明，益母草中主要含有鋅、錳、銅、鐵和鉀、鈣、鎂等無機(jī)金屬元素，并分布于植物的各個(gè)部位，如植物葉片中鋅、鋁、鉀、鈣、鎂等元素的含量遠(yuǎn)高于莖和花，而錳元素在葉和花中的含量相近，而在植物莖中含量較低。

鐵元素廣泛存在于植物的花中，其含量是莖中的兩倍多

二、益母草治療寒凝型青春期痛經(jīng)的臨床應(yīng)用研究

根據(jù)蒙醫(yī)理論，益母草具有活血化瘀、調(diào)經(jīng)的功效。過去常用于治療月經(jīng)不調(diào)、青春期痛經(jīng)等癥狀。同時(shí)，6月至7月是益母草生長旺季，明年3月即可開花結(jié)果。其花果可用于解毒消腫，療效顯著。益母草主要用于民間灌腸治療婦科炎癥和青少年痛經(jīng)。具體處理方法為：先取益母草干50克，加水400～500毫升，煮至100毫升。然后用多層消毒紗布過濾液體，將溶液溫度控制在30～41攝氏度進(jìn)行灌腸。灌腸后引導(dǎo)患者臥床休息，每日1次，7次為1個(gè)療程。東珍、余秋紅等觀察了蒙藥益母草治療青少年痛經(jīng)的臨床療效。結(jié)果顯示，經(jīng)過3個(gè)療程的治療，百益益母草組的有效率高達(dá)100%，而基礎(chǔ)方組的有效率僅為72.7%。雖然本研究中服用益母草的患者治愈率也是100%，但事實(shí)證明百益益母草對(duì)青春期原發(fā)性痛經(jīng)有很好的治療效果。

三、益母草治療寒凝型青春期痛經(jīng)的藥理學(xué)作用分析

中藥及其復(fù)方具有多組分、多靶點(diǎn)、多途徑協(xié)同作用、作用機(jī)制不明確等特點(diǎn)，影響了其進(jìn)一步研究。

另一方面，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以藥物之間的構(gòu)效相似性為基礎(chǔ)，構(gòu)建了“藥物組成-靶點(diǎn)、疾病-靶點(diǎn)、成分-靶點(diǎn)-信號(hào)通路”的網(wǎng)絡(luò)，為中藥復(fù)方安全性評(píng)價(jià)和新藥開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。本研究通過TCMSP數(shù)據(jù)庫對(duì)益母草的化學(xué)成分進(jìn)行收集整理，并利用“ADME原理”篩選出潛在的活性成分。用瑞士Target Predaction服務(wù)器預(yù)測潛在活性成分的靶標(biāo)，并與青春期痛經(jīng)相關(guān)疾病的靶標(biāo)進(jìn)行比較。獲得了益母草治療青春期痛經(jīng)的22個(gè)潛在靶點(diǎn)。通過構(gòu)建“成分-靶-信號(hào)通路”網(wǎng)絡(luò)，并對(duì)KEGG通路進(jìn)行富集分析，獲得了益母草治療青春期痛經(jīng)的22個(gè)潛在靶點(diǎn)。共鑒定出花生四烯酸代謝、亞油酸代謝、5-羥色胺突觸、卵巢類固醇合成、PPAR信號(hào)通路、化學(xué)致癌和氮代謝等7條信號(hào)通路。其中花生四烯酸代謝信號(hào)通路的意義最高，提示益母草可能對(duì)青春期寒凝血瘀型痛經(jīng)有一定的治療作用。

花生四烯酸信號(hào)通路的靶標(biāo)是PTGS1、PTGS2、ALOX5、PLAG2A、AKR1C3和CYP2C9。PTGS可以發(fā)揮兩種作用：一種是環(huán)氧合酶，它環(huán)氧化花生四烯酸(AA)生成前列腺素G2 (PGG2)；另一種是過氧化物酶，它將PGG2還原為前列腺素H2(PGH2)。前列腺素H2在多種特異性合成酶的作用下產(chǎn)生前列腺素D2(PGD2)、前列腺素E2(PGE2)和前列腺素 F2α(PGF2α)等花生四烯酸。目前對(duì)前列腺素G2、前列腺素F2α和前列腺素E2代謝產(chǎn)物的研究較多，現(xiàn)代研究表明，PD與子宮內(nèi)膜PG的升高有關(guān)，PG的升高是PD的主要發(fā)病機(jī)制。前列腺素E2α能促進(jìn)子宮平滑肌和螺旋動(dòng)脈的收縮，而前列腺素E2能減緩子宮平滑肌的自發(fā)活動(dòng)，抑制子宮收縮。因此，花生四烯酸信號(hào)通路是帕金森病治療的關(guān)鍵信號(hào)。本研究通過制作青春期痛經(jīng)大鼠寒凝血瘀證模型，選用益母草顆粒進(jìn)行干預(yù)，并選擇花生四烯酸信號(hào)通路檢測子宮勻漿中PTGS1和PTGS2的蛋白表達(dá)。結(jié)果表明，益母草能增加寒凝血瘀型青春期痛經(jīng)大鼠子宮中PTGS1和PTGS2的表達(dá)。

結(jié)論

本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法研究益母草多組分、多靶點(diǎn)與帕金森病之間的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)關(guān)系，初步驗(yàn)證益母草治療青春期寒凝血瘀型痛經(jīng)的基本藥理作用及相關(guān)機(jī)制。然而，益母草治療青春期寒凝血瘀型痛經(jīng)的具體機(jī)制仍需通過大量體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)闡明。本研究的目的是為進(jìn)一步研究其作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。