淋巴細(xì)胞參數(shù)在篩查外周血漿細(xì)胞中的應(yīng)用價(jià)值*

姜連生，吳萍，張森森，樊笑霞，李暢，周琳(海軍軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)征醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷科,上海 200003)

外周血中漿細(xì)胞極少見，當(dāng)患有某些漿細(xì)胞病，如華氏巨球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)、漿細(xì)胞白血病(plasma cell leukemia，PCL)等，外周血中漿細(xì)胞可見增多，某些感染性疾病偶見增多。在患者初診時(shí)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)外周血中存在漿細(xì)胞對(duì)患者確診及后續(xù)治療具有重要意義。

某些血細(xì)胞分析儀除能提供常規(guī)的白細(xì)胞分類結(jié)果外，針對(duì)淋巴細(xì)胞還能提供側(cè)向散射光強(qiáng)度(LY-X)、側(cè)向熒光強(qiáng)度(LY-Y)、前向散射光強(qiáng)度(LY-Z)、側(cè)向散射光分布寬度(LY-WX)、側(cè)向熒光分布寬度(LY-WY)、前向散射光分布寬度(LY-WZ)等參數(shù)[1]。本研究試圖通過分析上述參數(shù)，總結(jié)含漿細(xì)胞的外周血淋巴細(xì)胞參數(shù)特征，為日常工作中及時(shí)發(fā)現(xiàn)血液中的漿細(xì)胞提供幫助。

1 對(duì)象和方法

1.1研究對(duì)象 2019年5月至2020年4月上海長(zhǎng)征醫(yī)院外周血標(biāo)本鏡檢發(fā)現(xiàn)漿細(xì)胞的患者作為漿細(xì)胞組，共28例，其中男11例，女17例。選擇同期外周血標(biāo)本鏡檢發(fā)現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞(淋巴瘤15例，白血病11例，失訪2例)的患者作為異常淋巴細(xì)胞組，共27例，其中男14例，女13例；鏡檢發(fā)現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞的患者作為異型淋巴細(xì)胞組，共87例，其中男43例，女44例；體檢結(jié)果正常者作為健康人對(duì)照組，共140例，其中男62例，女78例。

1.2主要儀器與試劑 XN-9000全自動(dòng)血液分析儀及其配套試劑、定標(biāo)品、質(zhì)控品，SP-10推片儀(日本Sysmex公司)。所有儀器定期校準(zhǔn)，室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)均在控。

1.3標(biāo)本采集與檢測(cè) 采集研究對(duì)象靜脈血2 mL，EDTA-K2抗凝，4 h內(nèi)完成檢測(cè)。根據(jù)《ICSH 外周血細(xì)胞形態(tài)特征的命名和分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)化建議》[2]對(duì)異常標(biāo)本鏡檢，鏡檢過程由2位有2年以上鏡檢經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)醫(yī)生共同完成。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，用GraphPad Prism8繪圖。用K-S檢驗(yàn)分析正態(tài)性。6個(gè)淋巴細(xì)胞參數(shù)經(jīng) K-S檢驗(yàn)均為偏態(tài)分布，以M(P25,P75)表示，多樣本間差異比較用Kruskal WallisH檢驗(yàn)，各組間兩兩比較采用Nemenyi檢驗(yàn)。對(duì)組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的淋巴細(xì)胞參數(shù)，用ROC曲線評(píng)價(jià)其在識(shí)別漿細(xì)胞中的效能，并計(jì)算曲線下面積(area under curve，AUCROC)、可疑值范圍、敏感性及特異性。淋巴細(xì)胞參數(shù)與鏡檢漿細(xì)胞比例的相關(guān)性用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 淋巴細(xì)胞參數(shù)精密度分析結(jié)果

2.2淋巴細(xì)胞參數(shù)結(jié)果 漿細(xì)胞組與其他各組淋巴細(xì)胞參數(shù)結(jié)果見表2。漿細(xì)胞組6項(xiàng)淋巴細(xì)胞參數(shù)均大于健康人對(duì)照組；漿細(xì)胞組與異型淋巴細(xì)胞組、異常淋巴細(xì)胞組比較，僅LY-WZ差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 淋巴細(xì)胞參數(shù)在4組樣本中的表達(dá)情況

2.3淋巴細(xì)胞參數(shù)識(shí)別漿細(xì)胞的效能 見表3。ROC 曲線顯示，以健康人對(duì)照組為對(duì)照，LY-X、LY-WY和LY-WZ在識(shí)別漿細(xì)胞中具有重要價(jià)值。以異型淋巴細(xì)胞、異常淋巴細(xì)胞為對(duì)照，LY-WZ識(shí)別漿細(xì)胞的效能中等。

表3 淋巴細(xì)胞參數(shù)在識(shí)別漿細(xì)胞中的效能

2.4淋巴細(xì)胞參數(shù)與漿細(xì)胞百分比的相關(guān)性分析 通過Pearson相關(guān)分析，淋巴細(xì)胞參數(shù)LY-Z與外周血漿細(xì)胞百分比具有相關(guān)性，Person相關(guān)系數(shù)為0.591(n=28，P<0.01)，見圖1。其他淋巴細(xì)胞參數(shù)與漿細(xì)胞百分比無相關(guān)性。

圖1 LY-Z與漿細(xì)胞百分比的相關(guān)性分析結(jié)果

3 討論

隨著檢測(cè)方法的更新，越來越多的新技術(shù)開始應(yīng)用于血細(xì)胞的分析，可提供更多的參數(shù)來敏感、準(zhǔn)確地反映血細(xì)胞形態(tài)、大小及核酸含量[3]。Sysmex-9000血細(xì)胞分析儀淋巴細(xì)胞參數(shù)LY-X、LY-Y、LY-Z分別反映淋巴細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度、核酸含量和細(xì)胞體積大小[4]。LY-WX、LY-WY和LY-WZ反映上述3個(gè)指標(biāo)的不均一性[5]。各種因素引起淋巴細(xì)胞大小、核酸含量和內(nèi)部結(jié)構(gòu)改變，這些參數(shù)也會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化[6]。

本研究發(fā)現(xiàn)，漿細(xì)胞組LY-X、LY-Y和LY-Z高于健康人對(duì)照組，而徐衛(wèi)益等[7]研究發(fā)現(xiàn)MM患者LY-X高于健康人對(duì)照組。本研究還發(fā)現(xiàn)，漿細(xì)胞組LY-WX、LY-WY和LY-WZ增高，說明漿細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)復(fù)雜程度、核酸含量、細(xì)胞體積差異程度均高于正常淋巴細(xì)胞。LY-X和LY-WZ對(duì)從健康者標(biāo)本中篩查出漿細(xì)胞價(jià)值最高，其特異性分別可達(dá)78.6%、92.9%，而敏感性分別為92.9%、91.4%。與病例對(duì)照組相比，僅LY-WZ可用于漿細(xì)胞與異型淋巴細(xì)胞、異常淋巴細(xì)胞的區(qū)分，LY-WZ用于漿細(xì)胞與異型淋巴細(xì)胞的AUCROC為0.712，當(dāng)cut-off值取580時(shí)，敏感性可達(dá)92.9%，但特異性較低，僅有44.8%。LY-WZ區(qū)分漿細(xì)胞與異常淋巴細(xì)胞AUCROC為0.785，當(dāng)cut-off值取582.5時(shí)，其敏感性為89.3%，特異性為66.7%，這提示存在漿細(xì)胞的血液淋巴細(xì)胞大小差異較其他淋巴系統(tǒng)良性或惡性疾病更大。本研究發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞參數(shù)LY-Z與患者外周血漿細(xì)胞百分比呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)0.591。淋巴細(xì)胞參數(shù)與外周血漿細(xì)胞百分比的相關(guān)性尚未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。

本研究雖發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞參數(shù)在識(shí)別外周血漿細(xì)胞中有一定價(jià)值，但由于存在研究樣本量較小等缺點(diǎn)，尚不能直接應(yīng)用于臨床。另外，淋巴細(xì)胞參數(shù)產(chǎn)生明顯差異時(shí)，尚需鏡檢排除其他異常細(xì)胞的存在，并明確外周血中漿細(xì)胞的確切比例。