湖北荊門地區(qū)2698例女性HPV感染情況及基因分型調(diào)查研究

周 成，柴艷梅，陳 蓉，黃文峰

湖北省荊門市第二人民醫(yī)院(荊門 448000)

宮頸癌是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤，發(fā)病率較高，在全球女性惡性腫瘤病死率中排第2位，每年新增病例超過(guò)50萬(wàn)例，其中發(fā)展中國(guó)家占比超過(guò)80%[1]。研究表明人乳頭狀瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)的持續(xù)性感染與宮頸病變密切相關(guān)[2]。HPV是一類特異感染人類上皮、黏膜的微小共價(jià)雙鏈環(huán)狀DNA病毒[3]，至今發(fā)現(xiàn)有200多種，其中約40種與生殖道感染相關(guān)，根據(jù)其致病性的強(qiáng)弱，可分為高危型HPV和低危型HPV兩種[4]。其中高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件[5]，因此高危型HPV的檢測(cè)，是宮頸癌初期篩查的重要手段。本研究通過(guò)對(duì)荊門市第二人民醫(yī)院就診患者HPV感染情況、型別分布以及感染情況與年齡的相關(guān)性進(jìn)行分析，為荊門地區(qū)宮頸癌篩查及預(yù)防工作提供參考。

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 收集2017年1月至2019年6月在荊門市第二人民醫(yī)院婦科門診、住院和體檢的2698例女性的宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行回顧性分析。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡17歲以上；②已婚或有性生活史1年以上。排除標(biāo)準(zhǔn):①妊娠期及哺乳期婦女；②有宮頸錐切及子宮切除史；③有免疫性疾病及口服免疫抑制劑史；④檢查前3 d有陰道用藥或陰道沖洗，24 h內(nèi)有性生活等；⑤心功能不全及肝、腎功能障礙者；⑥高血壓、糖尿病等慢性疾病者；⑦惡性腫瘤者等?；颊吣挲g17～85歲，平均(40.9±10.2)歲。本研究獲得荊門市第二人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

2 研究方法 對(duì)所有的宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本采用醫(yī)用核酸分子雜交系統(tǒng)HHM-2及配套的HPV21分型檢測(cè)試劑盒(PCR+膜雜交法)(潮州凱普生物化學(xué)有限公司)進(jìn)行HPV分型檢測(cè)，具體操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行，包括擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備、樣本DNA提取、PCR擴(kuò)增、導(dǎo)流雜交和酶標(biāo)顯色。宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查方法(TCT)診斷標(biāo)準(zhǔn)采用2001年TBS(The 2001 Bethesda System)分級(jí)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)診斷[6]。

3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 以各個(gè)型別HPV陽(yáng)性例數(shù)占檢測(cè)總例數(shù)的百分比為各型別HPV的感染率。HPV型別及高低危劃分參考2015年CFDA發(fā)布的《人乳頭瘤病毒(HPV)核酸檢測(cè)及基因分型試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則》。本研究包含15種高危型HPV：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68；6種低危型HPV：6、11、42、43、44、CP8304(81)。以劃分的每個(gè)年齡段內(nèi)HPV陽(yáng)性總例數(shù)占檢測(cè)總例數(shù)的百分比統(tǒng)計(jì)不同年齡段HPV感染的陽(yáng)性率。陽(yáng)性結(jié)果成立條件：雜交膜條上的Biotin對(duì)照顯色、同時(shí)HPV雜交點(diǎn)也顯色，檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性點(diǎn)為清晰可見(jiàn)的藍(lán)紫色圓點(diǎn)。任何一種HPV亞型陽(yáng)性為HPV感染，兩種或以上HPV亞型陽(yáng)性為多重感染，多重感染重復(fù)計(jì)算。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用PEMS 3.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用百分率(%)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 HPV感染率及基因型分布情況 2698例標(biāo)本HPV總陽(yáng)性率為27.58%(744/2698)，高危型HPV感染率為23.98%(647/2698)，低危型HPV感染率為3.60%(97/2698)。高危型HPV陽(yáng)性人群以52型、16型、58型、39型、53型、51型最多，占總例數(shù)百分比依次為4.74%(128/2698)、4.04%(109/2698)、3.48%(94/2698)、2.22%(60/2698)、1.96%(53/2698)、1.67%(45/2698)，6種型別占總例數(shù)的百分比為18.12%(489/2698)。見(jiàn)表1。

2 不同年齡段HPV感染情況 將2698例標(biāo)本按年齡分為≤25歲、26～35歲、36～45歲、46～55歲、>55歲5個(gè)組。各年齡段HPV陽(yáng)性率依次為28.35%(36/127)、18.96%(142/749)、18.42%(165/896)、22.40%(164/732)、31.44%(61/194)。≤25歲組HPV陽(yáng)性率高于26～35歲、36～45歲組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.991，P<0.05；χ2=6.949，P<0.01)，但與46～55歲、>55歲組陽(yáng)性率之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=2.139，P>0.05；χ2=0.349，P>0.05)。 26～35歲組HPV陽(yáng)性率與36～45歲、46～55歲比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=0.079，P>0.05；χ2=2.681，P>0.05)，但顯著低于>55歲組HPV陽(yáng)性率(χ2=14.221，P<0.01)。36～45歲、46～55歲、>55歲HPV陽(yáng)性率隨年齡增長(zhǎng)呈遞增趨勢(shì)，且兩兩之間比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P<0.05)。見(jiàn)表2。

表1 宮頸感染HPV基因型分布

表2 不同年齡段HPV感染率[例(%)]

3 不同程度宮頸病變HPV亞型感染情況 在744例HPV陽(yáng)性患者中，正常/炎癥組、ASCUS/LSIL組、HSIL/宮頸癌組分別為519例、194例、31例。ASCUS/LSIL組高危HPV感染率為87.32%，HSIL/宮頸癌組的高危HPV感染率為93.55%，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.328，P<0.05)。正常/炎癥組前3位HPV基因型依次為HPV-52、58、16；ASCUS/LSIL組前3位HPV基因型依次為HPV-16、52、58：HSIL/宮頸癌組前3位HPV基因型依次為HPV-16、18、52、58。HSIL/宮頸癌組的HPV-16感染率高于ASCUS/LSIL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.146，P<0.01)。見(jiàn)表3。

表3 不同程度宮頸病變HPV亞型感染情況[例(%)]

討 論

宮頸癌是嚴(yán)重危害婦女健康的第二大常見(jiàn)癌癥，我國(guó)宮頸癌的發(fā)病率以每年2%～3%的速度遞增[7]。目前已有至少15種HPV基因型被確認(rèn)為宮頸癌的高危型別[8]，HPV分型作為宮頸癌前病變?cè)缙诤Y查的檢測(cè)技術(shù)是有效降低宮頸癌發(fā)病率的措施。HPV的感染率和型別呈現(xiàn)較為明顯的地域性差異[9]。2015年以來(lái)，湖北省各地區(qū)HPV感染率和型別的相關(guān)研究結(jié)果顯示，武漢地區(qū)陽(yáng)性率為17.47%(1732/9915)，主要型別為52型、16型、58型[10]；襄陽(yáng)地區(qū)陽(yáng)性率為28.80%(714/2479)，主要型別為45型、58型[11]；十堰地區(qū)陽(yáng)性率為9.17%(783/8543)，主要型別52型、16型、58型[12]；黃石地區(qū)陽(yáng)性率為43.92%(1163/2648)，主要型別為52型、16型、58型[13]；秭歸地區(qū)陽(yáng)性率為12.60%(373/2960)，主要型別為16型、52型、6型[14]。本次研究結(jié)果顯示荊門地區(qū)HPV陽(yáng)性率為27.58%，排在前3位的為52型、16型、58型與武漢、十堰、黃石地區(qū)的型別一致，與襄陽(yáng)的45型、58型以及秭歸地區(qū)的16型、52型、6型存在差異[11-14]。HPV的感染可能受地域、文化、經(jīng)濟(jì)等多個(gè)因素的影響。僅針對(duì)高危型16型及18型的二價(jià)疫苗和針對(duì)高危型16型、18型及低危型6型、11型的四價(jià)疫苗能否有效預(yù)防荊門地區(qū)大部分人群的感染，仍有待考察，對(duì)于52型和58型的高感染率不能忽視，這在荊門地區(qū)HPV疫苗的引進(jìn)選擇上具有重要的參考意義。

HPV感染在不同年齡段人群中存在差異[15]。荊門地區(qū)HPV感染率和年齡曲線呈“U”型，以>55歲年齡組感染率最高，為31.44%，≤25歲次之為28.35%。這與李霓等[16]2008年關(guān)于中國(guó)婦女HPV感染的年齡分布特點(diǎn)，中國(guó)地區(qū)HPV感染各年齡組感染率均保持較高水平，尤其中年組(36～55歲)的研究結(jié)論有出入。這一結(jié)果與近期十堰地區(qū)[12]、黔北地區(qū)[17]、滇東北地區(qū)[18]HPV感染率的年齡分布特點(diǎn)相同。造成HPV感染率和年齡曲線發(fā)生變化的原因值得進(jìn)一步研究，但荊門地區(qū)HPV感染率和年齡曲線呈“U”型特點(diǎn)的原因可能為：≤25歲的年輕女性可能因?yàn)楦l繁的性接觸，不良生活習(xí)慣如大量飲酒、長(zhǎng)期熬夜、口服避孕藥等，使免疫系統(tǒng)減弱而使體內(nèi)HPV復(fù)制增加[19]，26～35歲與36～45歲之間的女性HPV感染率最低，主要是由于該群體機(jī)體免疫好，自我保健意識(shí)較強(qiáng)有關(guān)，而46～55歲和>55歲大齡女性可能隨著年齡增長(zhǎng)，尤其絕經(jīng)后免疫能力降低[20]，缺乏雌激素保護(hù)，抑制和清除病毒的能力持續(xù)減弱[21]，導(dǎo)致HPV持續(xù)感染。因此結(jié)果提示，荊門地區(qū)應(yīng)該加強(qiáng)≤25歲人群的HPV檢測(cè)和>55歲人群的宮頸癌篩查。

綜上所述，荊門地區(qū)女性HPV感染的常見(jiàn)亞型依次為52型、16型、58型、39型、53型、51型，≤25歲和>55歲年齡段女性較易感。建議在荊門地區(qū)年輕女性中積極開展HPV檢測(cè)，倡導(dǎo)女性定期做好宮頸癌篩查。