硫酸鎂對(duì)妊娠晚期羊水過少孕婦胎盤和胎膜水通道蛋白8及妊娠結(jié)局的影響

郭云霞，楊 坤

(山東省聊城市第二人民醫(yī)院產(chǎn)一科，山東 聊城 252600)

羊水過少是指妊娠期內(nèi)羊水量<300 ml，發(fā)病率約為8%～38%，易發(fā)生胎兒窘迫等新生兒并發(fā)癥[1，2]。靜脈補(bǔ)液是治療羊水過少的主要方法，硫酸鎂通過擴(kuò)張?zhí)ケP血管、改善子宮胎盤血供，能有效增加羊水量[3]。胎膜水通道蛋白8(Aquaporin 8，AQP8)屬于一類水通透性小分子膜蛋白，其表達(dá)水平與胎盤老化、羊水平衡密切相關(guān)[4]。硫酸鎂是否通過靶控調(diào)節(jié)APQ8 mRNA表達(dá)水平發(fā)揮治療羊水過少，目前尚缺乏足夠的文獻(xiàn)支撐。本文以胎盤、胎膜APQ8 mRNA表達(dá)為切入點(diǎn)，分析硫酸鎂治療妊娠晚期羊水過少臨床療效及可能作用機(jī)制?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象2018年2～11月在我院住院分娩妊娠晚期羊水過少孕婦72例，均符合《婦產(chǎn)科學(xué)》第8版診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：超聲顯示羊水指數(shù)(AFI)≤5 cm，羊水最大暗區(qū)垂直深度(AFV)≤2 cm，陰道分娩或剖宮產(chǎn)收集羊水總量<300 ml。排除妊娠合并癥者，告知研究事項(xiàng)后，所有孕婦或家屬均簽署知情同意書。年齡23～35歲[(27.11±3.82)歲]；孕周36～42周[(38.46±2.15)周]；體重62～81 kg[(72.86±4.78)kg]；孕次1～3次[(1.90±0.42)次]；產(chǎn)次1～3次[(1.24±0.31)次]。根據(jù)住院時(shí)間分為試驗(yàn)組(2018年7～11月)38例和對(duì)照組(2018年2～6月)34例。兩組孕婦年齡、孕周等比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

1.2 方法對(duì)照組給予葡萄糖(500 ml)、維生素C(2.0 g)、丹參注射液(30 ml)靜脈滴注，1次/天。試驗(yàn)組給予葡萄糖(500 ml)、維生素C(2.0 g)、丹參注射液(30 ml)、硫酸鎂注射液(16 ml)靜脈滴注，1次/天。兩組均連續(xù)治療5天。

表1 兩組一般資料比較

1.3 觀察指標(biāo)治療前后兩組臨床癥狀、APQ8 mRNA表達(dá)及妊娠結(jié)局。臨床癥狀指標(biāo)包括AFI、臍動(dòng)脈收縮期峰值流速與舒張期流速比值(S/D)，采用超聲檢測(cè)AFI、S/D等臨床癥狀指標(biāo)；參照鹿榕等[6]文獻(xiàn)資料，采用RT-PCR法檢測(cè)APQ8 mRNA表達(dá)：無菌取胎盤和胎膜組織，常規(guī)沖洗、消化、培養(yǎng)后，參照Trizol試劑盒說明書，采用RT-PCR法提取細(xì)胞RNA。引物序列：上游5’TTCATTGGAG ATGGGAAGACC3，下游5’TTGAGAAGCAAGGAAGTGG3。反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性(3 min)一個(gè)循環(huán)；94 ℃再變性(35 s)、57 ℃退火(40 s)、72 ℃延伸(45 s)，共30個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸(6 min)。采用2△△CT法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相對(duì)定量分析。妊娠結(jié)局包括胎兒窘迫、新生兒窒息、羊水胎糞污染等發(fā)生率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分率比較，比較采用卡方檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組孕婦臨床癥狀比較治療前兩組孕婦AFI、S/D比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組AFI明顯高于治療前，S/D明顯低于治療前(P<0.05)，且試驗(yàn)組孕婦AFI高于對(duì)照組，S/D低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組治療前后AFI與S/D比較

2.2 兩組APQ8 mRNA表達(dá)的比較治療前，兩組孕婦羊膜上皮細(xì)胞等APQ8 mRNA表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞與治療前比較也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，羊膜上皮細(xì)胞、胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞APQ8 mRNA表達(dá)高于同組治療前(P<0.05，)，試驗(yàn)組羊膜上皮細(xì)胞、胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞APQ8 mRNA表達(dá)高于對(duì)照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組孕婦治療前后胎盤與胎膜APQ8 mRNA表達(dá)比較

2.3 兩組孕婦妊娠結(jié)局比較試驗(yàn)組妊娠晚期羊水過少并發(fā)癥發(fā)生率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.610，P<0.05)。見表4。

表4 兩組孕婦妊娠結(jié)局比較 [n(%)]

3 討論

羊水是維持胎兒生長(zhǎng)發(fā)育必不可少的物質(zhì)，足月妊娠時(shí)正常羊水為約為800 ml～1000 ml。當(dāng)羊水量<300 ml時(shí)，不能為胚兒發(fā)育提供可靠液態(tài)環(huán)境，胎兒活動(dòng)受限，影響胎兒生長(zhǎng)發(fā)育[7]。妊娠晚期羊水多源自胎兒尿液，胎兒排出尿液與腎血流量密切相關(guān)，臨床治療多采用補(bǔ)液、改善微循環(huán)、增加胎盤血供等方法[8，9]。丹參能活血化瘀、減少血小板聚集、矯正血液粘稠狀態(tài)[10，11]。硫酸鎂可通過刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞合成前列環(huán)素等途徑，達(dá)到抑制內(nèi)皮素合成、矯正血管痙攣狀態(tài)的目的。也能通過阻斷谷氨酸通道的途徑，實(shí)現(xiàn)阻斷鈣離子內(nèi)流、緩解血管內(nèi)皮損傷的目的。同時(shí)鎂離子能競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合血液中血紅蛋白，改善胎兒氧代謝[12]。本文研究中，試驗(yàn)組孕婦AFI高于對(duì)照組，S/D低于對(duì)照組，與鄔華等[13]研究報(bào)道(60例)基本相似，說明硫酸鎂能夠改善妊娠晚期羊水過少患者臨床癥狀。

羊水主要成分源自母體血清透析液與胎兒尿液，維持產(chǎn)生與吸收的動(dòng)態(tài)平衡是保證正常妊娠的關(guān)鍵[14]。AQP為一類黏附于細(xì)胞膜上的“水孔蛋白”，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞跨膜平衡過程[15]。目前至少有7種AQP蛋白特異性表達(dá)于人胎膜、胎盤組織，參與母胎之間的液體交換[16]。AQP8屬于AQP家庭中蛋白亞群，主要表達(dá)于羊膜及胎盤組織中，在羊水異常時(shí)起到代償性調(diào)節(jié)作用[17]。相關(guān)研究表明，AQP8 mRNA表達(dá)水平與羊水異常明顯相關(guān)，羊水過多孕婦AQP8 mRNA表達(dá)異常升高，羊水過少孕婦AQP8 mRNA表達(dá)異常偏低[18，19]。鈣離子與AQPmRNA表達(dá)存在著明顯的量效關(guān)系，可通過鈣調(diào)蛋白介導(dǎo)抑制AQP8亞型的表達(dá)[20]。硫酸鎂中鎂離子屬非競(jìng)爭(zhēng)性鈣離子抑制劑，給予外源性鎂離子能阻斷鈣離子通道細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載量，緩解鈣離子介導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，調(diào)節(jié)AQP8 mRNA的表達(dá)[21]。本文研究中，試驗(yàn)組羊水過少孕婦羊膜上皮細(xì)胞及胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞的APQ8 mRNA表達(dá)高于對(duì)照組，說明硫酸鎂能夠促進(jìn)羊水過少孕婦胎盤及胎膜組織APQ8 mRNA上調(diào)。進(jìn)一步分析表明，硫酸鎂在提升細(xì)胞膜通透性的同時(shí)，也能夠改善胎盤循環(huán)內(nèi)環(huán)境，增加羊水量，緩解羊水過少所致子宮壁壓迫胎盤、臍帶、胎兒，降低胎兒窘迫等并發(fā)癥，改善妊娠結(jié)局[22]。高杰賢等[23]研究報(bào)道，硫酸鎂治療研究組并發(fā)癥(2.90%)明顯低于對(duì)照組(17.6%)，本文結(jié)果與其基本相似。

綜上，硫酸鎂應(yīng)用于妊娠晚期羊水過少孕婦治療中，能增加羊水量，降低胎兒窘迫等并發(fā)癥發(fā)生，其可能作用機(jī)制與上調(diào)羊膜上皮細(xì)胞、胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞APQ8 mRNA表達(dá)有關(guān)。需要指出的是，硫酸鎂通過何種路徑、什么機(jī)制調(diào)節(jié)胎盤與胎膜APQ8 mRNA表達(dá)，仍需要更多的基礎(chǔ)研究去證實(shí)。