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    蕎麥粉中總黃酮的含量測(cè)定研究

    2020-11-13 09:43:13孟玉環(huán)
    食品界 2020年10期
    關(guān)鍵詞:分光光度法總黃酮

    孟玉環(huán)

    摘要:目的:建立蕎麥粉中總黃酮含量的測(cè)定方法。方法:以蘆丁為對(duì)照品,甲醇為溶劑,恒溫振蕩提取,分光光度計(jì)測(cè)定蕎麥粉中總黃酮含量。結(jié)果:蘆丁在0.00125~0.0200mg/mL范圍內(nèi)線性良好,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.2%,回收率在93.8%~98.5%之間。結(jié)論:該方法準(zhǔn)確可靠,可用于日常檢驗(yàn)工作。

    關(guān)鍵詞:蕎麥粉;分光光度法;總黃酮

    蕎麥?zhǔn)且环N營(yíng)養(yǎng)豐富又兼具保健功能的藥食兩用植物,其富含的黃酮類化合物有降血糖血脂、防癌抗氧化等功效,因此也被作為蕎麥及其制品的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)。本研究參照NY/T1295-2007標(biāo)準(zhǔn)方法,建立了以蘆丁為對(duì)照品、甲醇為溶劑、恒溫振蕩提取、分光光度計(jì)測(cè)定蕎麥粉中總黃酮含量的實(shí)驗(yàn)方法。

    1. 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    蕎麥粉為超市自購(gòu)袋裝(200g/袋);蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(德國(guó)DR,批號(hào):G165751);三氯化鋁、乙酸鉀、甲醇均為分析純;實(shí)驗(yàn)用水為三級(jí)水。

    1.2 儀器與設(shè)備

    721G可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海儀電公司);ME204電子天平(梅特勒-托利多);恒溫水浴振蕩器、離心機(jī)、常規(guī)玻璃儀器。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

    準(zhǔn)確吸取一定濃度系列的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.0500mg/mL)于10mL容量瓶中,分別加入0.1mol/L的三氯化鋁溶液2mL、1mol/L的乙酸鉀溶液3mL,用甲醇水溶液(7+3)定容,搖勻后靜置0.5h,配制成標(biāo)準(zhǔn)工作系列,其濃度如表1。同時(shí)作空白。使用可見(jiàn)分光光度計(jì)在波長(zhǎng)420nm處測(cè)吸光度(A),以A為橫坐標(biāo),C為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.3.2 試樣溶液的制備

    稱取0.35g(精確值0.0001g)蕎麥粉試樣于具塞三角瓶中,加入30mL甲醇水溶液(7+3),蓋緊瓶塞于65℃、160r/min的水浴振蕩器中振蕩2h,趁熱過(guò)濾后轉(zhuǎn)移入50mL容量瓶中,用甲醇水溶液洗滌殘?jiān)喜V液并定容、搖勻,制得待測(cè)液。

    1.3.3 試樣溶液的測(cè)定

    準(zhǔn)確吸取1.0mL待測(cè)液于10mL容量瓶中,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方法依次加入試劑溶液,靜置0.5h后離心10min,依前法測(cè)得吸光度,代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算試樣中總黃酮濃度。

    2. 結(jié)果與討論

    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

    采用上述方法測(cè)定配制的標(biāo)準(zhǔn)系列,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,如圖1。回歸方程為y=0.0275x-0.0001,R2=0.9993,表明對(duì)照品蘆丁在0.00125~0.0200mg/mL范圍內(nèi)線性良好。

    2.2 精密度試驗(yàn)

    采用上述方法對(duì)某蕎麥粉試樣進(jìn)行6次平行測(cè)定,記錄吸光度值,計(jì)算得總黃酮含量分別為0.34、0.33、0.32、0.33、0.31、0.33g/100g,RSD為 3.2%,表明精密度較好。

    2.3 加標(biāo)回收試驗(yàn)

    稱取已知總黃酮含量的蕎麥粉試樣6份,準(zhǔn)確吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶按低、中、高濃度(每個(gè)水平做平行實(shí)驗(yàn))依次加入0.5mg、2.5mg、5mg蘆丁對(duì)照品,按照本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行試樣處理和吸光度測(cè)定,計(jì)算得加標(biāo)回收率在93.8%~98.5%之間,符合GB/T 27404-2008的規(guī)定。

    2.4準(zhǔn)確度試驗(yàn)

    為確認(rèn)本實(shí)驗(yàn)方法的準(zhǔn)確性,在期間精密度條件下對(duì)某蕎麥粉試樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部人員比對(duì)試驗(yàn),兩位檢驗(yàn)員測(cè)得該蕎麥粉中總黃酮含量分別為0.42g/100g、0.40g/100g,兩次獨(dú)立測(cè)定誤差在NY/T 1295-2007要求范圍內(nèi)。

    3. 結(jié)論

    近年來(lái),隨著國(guó)民生活質(zhì)量提升,蕎麥作為保健食品愈為被廣大消費(fèi)者所重視。本研究建立的測(cè)定蕎麥粉中總黃酮含量的方法操作簡(jiǎn)便、成本較低、準(zhǔn)確可靠,可以滿足基層實(shí)驗(yàn)室食品檢測(cè)的需求,也可為大眾食品安全提供保障。

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