加味大承氣湯活血攻下法治療腸梗阻的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究

張 濤， 楊成城， 張少輝， 門斯燁， 安佳琳， 李 權(quán)， 錢嘉惠， 周春宇

腸梗阻是指存在腸內(nèi)容物通過障礙，伴有腹痛腹脹、惡心嘔吐，停止排氣排便的一種常見外科急腹癥。本病如未得到及時救治，將引起水電解質(zhì)紊亂、酸堿失衡、腹腔感染、急性腹膜炎、休克甚至危及生命。按照發(fā)病原因可分為機械性腸梗阻、動力性腸梗阻、血運性腸梗阻和假性腸梗阻[1]。本病的常規(guī)治療分為手術(shù)治療和保守治療，其中手術(shù)治療主要適用于急性絞窄性腸梗阻和慢性腸梗阻長時間不緩解有腸壞死風(fēng)險等情況，但是手術(shù)操作本身會造成腹腔內(nèi)組織粘連，誘發(fā)腸梗阻，反復(fù)手術(shù)治療會加重腸梗阻的復(fù)雜程度，使得治療愈發(fā)困難，所以非緊急所需，不行手術(shù)治療，保守治療是本病的第一選擇。保守治療主要有禁食水、胃腸減壓、抗感染、補液、腸外營養(yǎng)支持等，以逐步恢復(fù)腸道功能。本病發(fā)病率和復(fù)發(fā)率高，給患者家庭、社會經(jīng)濟帶來了極大負擔(dān)。當(dāng)前腸梗阻的中醫(yī)治療主要有針灸、中藥內(nèi)服、中藥穴位貼敷、中藥保留灌腸等治療[2]。大多數(shù)研究和臨床應(yīng)用中，中醫(yī)治療腸梗阻主要取“六腑以通為用”之義，組方大多以大承氣湯為底方[3-4]，峻下通腑以緩解腸道梗阻，療效顯著。大承氣湯是張仲景《傷寒雜病論》經(jīng)典方劑，用于陽明腑實證[5]。全方大黃瀉熱通便,蕩滌腸胃,為君藥。芒硝助大黃瀉熱通便,并能軟堅潤燥,為臣藥,二藥相須為用,峻下熱結(jié)之力甚強;積滯內(nèi)阻,則腑氣不通,故以厚樸、枳實行氣散結(jié),消痞除滿,并助硝、黃推蕩積滯以加速熱結(jié)之排泄,共為佐使。本方在經(jīng)方大承氣湯的基礎(chǔ)之上加用了延胡索和赤芍，延胡索-赤芍為臨床上經(jīng)典的藥物使用組合，二者相使為用，能夠顯著的活血化瘀，理氣止痛。在既往的文獻研究中，延胡索-赤芍也是大承氣湯諸多加味藥物中較為經(jīng)典的藥對[6]。大承氣湯通里攻下，延胡索-赤芍藥對活血化瘀，諸藥合用，共筑活血通里，攻下通腑之功。故筆者基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)從成分-靶點-通路預(yù)測加味大承氣湯活血攻下法治療腸梗阻的作用機制。

1 材料與方法

1.1 復(fù)方化學(xué)成分收集及藥物靶點預(yù)測 將加味大承氣湯藥物名稱（大黃、枳實、厚樸、延胡索、赤芍）在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫Traditional Chinese Medicine System Pharmacology Database[7](TCMSPTM，http：//ibts.hkbu.edu.hk/LSP/tcmsp.php)Herb Name中輸入。根據(jù)藥物口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）≥30% 、類藥性指數(shù)（Drug Likeness，DL）≥0.18[8]篩選有效化學(xué)成分。藥物靶點數(shù)據(jù)來源于Drugbank[9](https://www.drugbank.ca/)、Uniprot(https://www.Uniprot. org/)數(shù)據(jù)庫。因TCMSP數(shù)據(jù)庫尚未收錄礦石類藥物，芒硝的化學(xué)成分及相關(guān)藥物靶點查找自TCMID及BATMAN數(shù)據(jù)庫。

1.2 疾病靶點來源 基于GeneCards(https://www.genecards.org/)與OMIM-NCBI (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim)數(shù)據(jù)庫篩選疾病靶點。

1.3 復(fù)方-疾病交集基因的獲取 應(yīng)用R軟件中的Draw Venn Diagrams工具對1.2、1.3和1.4中獲取到的藥物靶點與疾病靶點進行處理，獲得交集基因靶點。

1.4 成分-靶點網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建 將復(fù)方成分，交集基因靶點導(dǎo)入Cytoscape3.7.1，構(gòu)建成分-靶點網(wǎng)絡(luò)圖。

1.6 加味大承氣湯治療腸梗阻的靶蛋白相互作用（Protein Protein interaction， PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 應(yīng)用Cytoscape 3.7.1中Bisogenet插件進行PPI蛋白網(wǎng)絡(luò)互作分析，使用CytoNCA進行網(wǎng)絡(luò)拓撲分析。

1.6 GO和KEGG通路富集分析 基于GO數(shù)據(jù)庫（Gene Ontology，http://geneontology.org） 與KEGG通路數(shù)據(jù)庫（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，https://www.kegg.jp） 對 交 集 基因，細胞成分，分子功能，生物學(xué)過程及其發(fā)生作用的信號通路進行富集分析，得出加味大承氣湯治療腸梗阻的核心靶標(biāo)，將結(jié)果按P值大小進行降序排列；取前20的KEGG信號通路，應(yīng)用Cytoscape3.7.1構(gòu)建核心靶標(biāo)-關(guān)鍵通路網(wǎng)絡(luò)。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方化學(xué)成分及藥物靶點 本次研究共收集加味大承氣湯藥物化學(xué)成分121個，預(yù)測靶點1478個，通過UniProt數(shù)據(jù)庫對藥物靶基因進行校正。加味大承氣湯各中藥化學(xué)成分及預(yù)測靶點數(shù)量見表1，各中藥有效成分見表2。

表1 加味大承氣湯中藥-成分-靶點信息

表2 加味大承氣湯的有效成分

Mol ID Molecule Name OB（%） DL 來源Mol001460 Cryptopin 78.74 0.72 延胡索Mol001461 Dihydrochelerythrine 32.73 0.81 延胡索Mol001463 Dihydrosanguinarine 59.31 0.86 延胡索Mol001474 Sanguinarine 37.81 0.86 延胡索Mol000217 (S)-Scoulerine 32.28 0.54 延胡索Mol002670 Cavidine 35.64 0.81 延胡索Mol002903 (R)-Canadine 55.37 0.77 延胡索Mol000359 Sitosterol 36.91 0.75 延胡索Mol004071 Hyndarin 73.94 0.64 延胡索Mol004190 (-)-alpha-N-methylcanadine 45.06 0.8 延胡索Mol004191 Capaurine 62.91 0.69 延胡索Mol004193 Clarkeanidine 86.65 0.54 延胡索Mol004195 CORYDALINE 65.84 0.68 延胡索Mol004196 Corydalmine 52.5 0.59 延胡索Mol004197 Corydine 37.16 0.55 延胡索Mol004198 18797-79-0 46.06 0.85 延胡索Mol004199 Corynoloxine 38.12 0.6 延胡索Mol004200 Methyl-[2-(3,4,6,7-tetramethoxy-1-phenanthryl)ethyl]amine 61.15 0.44 延胡索Mol004202 Dehydrocavidine 38.99 0.81 延胡索Mol004203 Dehydrocorybulbine 46.97 0.63 延胡索Mol004204 Dehydrocorydaline 41.98 0.68 延胡索Mol004205 Dehydrocorydalmine 43.9 0.59 延胡索Mol004208 Demethylcorydalmatine 38.99 0.54 延胡索Mol004209 13-methyldehydrocorydalmine 35.94 0.63 延胡索Mol004210(1S,8'R)-6,7-dimethoxy-2-methylspiro[3,4-dihydroisoquinoline-1,7'-6,8-dihydrocyclopenta[g][1,3]benzodioxole]-8'-ol 43.95 0.72 延胡索Mol004763 Izoteolin 39.53 0.51 延胡索Mol004214 Isocorybulbine 40.18 0.66 延胡索Mol004215 Leonticine 45.79 0.26 延胡索Mol004216 13-methylpalmatrubine 40.97 0.63 延胡索Mol004220 N-methyllaurotetanine 41.62 0.56 延胡索Mol004221 Norglaucing 30.35 0.56 延胡索Mol004224 Pontevedrine 30.28 0.71 延胡索Mol004225 Pseudocoptisine 38.97 0.86 延胡索Mol004226 24240-05-9 53.75 0.83 延胡索Mol004228 Saulatine 42.74 0.79 延胡索Mol004230 Stylopine 48.25 0.85 延胡索Mol004231 Tetrahydrocorysamine 34.17 0.86 延胡索Mol004232 Tetrahydroprotopapaverine 57.28 0.33 延胡索Mol004233 ST057701 31.87 0.56 延胡索Mol004234 2,3,9,10-tetramethoxy-13-methyl-5,6-dihydroisoquinolino[2,1-b]isoquinolin-8-one 76.77 0.73 延胡索Mol000449 Stigmasterol 43.83 0.76 延胡索Mol000785 Palmatine 64.6 0.65 延胡索

Mol ID Molecule Name OB（%） DL 來源Mol000787 Fumarine 59.26 0.83 延胡索Mol000790 Isocorypalmine 35.77 0.59 延胡索Mol000791 Bicuculline 69.67 0.88 延胡索Mol000793 C09367 47.54 0.69 延胡索Mol000098 Quercetin 46.43 0.28 延胡索Mol001002 Ellagic acid 43.06 0.43 赤芍Mol001918 Paeoni fl orgenone 87.59 0.37 赤芍Mol001921 Lacti fl orin 49.12 0.8 赤芍Mol001924 Paeoni fl orin 53.87 0.79 赤芍Mol001925 Paeoni fl orin_qt 68.18 0.4 赤芍Mol002714 Baicalein 33.52 0.21 赤芍Mol002776 Baicalin 40.12 0.75 赤芍Mol000358 Beta-sitosterol 36.91 0.75 赤芍Mol000359 Sitosterol 36.91 0.75 赤芍Mol004355 Spinasterol 42.98 0.76 赤芍Mol000449 Stigmasterol 43.83 0.76 赤芍Mol000492 (+)-catechin 54.83 0.24 赤芍Mol006990 (1S,2S,4R)-trans-2-hydroxy-1,8-cineole-B-D-glucopyranoside 30.25 0.27 赤芍Mol006992 (2R,3R)-4-methoxyl-distylin 59.98 0.3 赤芍Mol006994 1-o-beta-d-glucopyranosyl-8-obenzoylpaeonisuffrone_qt 36.01 0.3 赤芍Mol006996 1-o-beta-d-glucopyranosylpaeonisuffrone_qt 65.08 0.35 赤芍Mol006999 Stigmast-7-en-3-ol 37.42 0.75 赤芍Mol007003 Benzoyl paeoni fl orin 31.14 0.54 赤芍Mol007004 Albi fl orin 30.25 0.77 赤芍Mol007005 Albi fl orin_qt 48.7 0.33 赤芍Mol007008 4-ethyl-paeoni fl orin_qt 56.87 0.44 赤芍Mol007012 4-o-methyl-paeoni fl orin_qt 56.7 0.43 赤芍Mol007014 8-debenzoylpaeonidanin 31.74 0.45 赤芍Mol007016 Paeoni fl origenone 65.33 0.37 赤芍Mol007018 9-ethyl-neo-paeonia fl orin A_qt 64.42 0.3 赤芍Mol007022 EvofolinB 64.74 0.22 赤芍Mol007025 Isobenzoylpaeoni fl orin 31.14 0.54 赤芍Mol002883 Ethyl oleate (NF) 32.4 0.19 赤芍Mol005043 Campest-5-en-3beta-ol 37.58 0.71 赤芍

2.2 疾病靶點的獲取 在GeneCards與OMIMNCBI數(shù)據(jù)庫中以“Intestinal obstruction、Obstacle”為關(guān)鍵詞進行檢索，為確保疾病靶點的真實有效性，GeneCards數(shù)據(jù)庫按照Relevance score≥25篩選，將2個數(shù)據(jù)庫中所得的疾病靶點匯總并刪除重復(fù)，通過UniProt數(shù)據(jù)庫對疾病靶基因進行校正，共獲得147個，將其作為復(fù)方的候選靶標(biāo)來源。

2.3 獲取復(fù)方-疾病交集基因 將1.1與1.2中獲得的復(fù)方藥物靶點與疾病靶點數(shù)據(jù)導(dǎo)入到R軟件，應(yīng)用Draw Venn Diagrams工具獲取交集基因，見表3；并繪制韋恩圖，見圖1。

表3 加味大承氣湯治療腸梗阻的24個靶蛋白

圖1 復(fù)方-疾病交集基因韋恩圖

2.3.2 構(gòu)建成分-靶點網(wǎng)絡(luò)圖 將加味大承氣湯復(fù)方成分，復(fù)方-疾病交集基因靶點導(dǎo)入Cytoscape3.7.1中，應(yīng)用Network Analyze插件構(gòu)建復(fù)方化學(xué)成分-靶點作用網(wǎng)絡(luò)，見圖2。核心靶標(biāo)顯示為方形，活性化學(xué)成分顯示為橢圓形，不同藥物顯示為不同顏色，其中多個藥物共有的化學(xué)成分顯示為紅色，大黃顯示為深藍色，枳實顯示為紫色，厚樸顯示為草綠色，延胡索顯示為天藍色，赤芍顯示為湖藍色，生姜所含有效成分被共有化學(xué)成分所覆蓋。從圖2可知，一個化學(xué)成分往往與多個交集基因靶點對應(yīng)，且一個交集基因與靶點也同時對應(yīng)多個化學(xué)成分，化學(xué)成分又從屬于不同的中藥，這說明加味大承氣湯治療腸梗阻是通過多成分、多靶點起效的。

2.4 交集基因PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析 交集基因蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建主要借助于Cytoscape3.7.1中Bisogenet插件，插件是由6個相互作用的蛋白數(shù)據(jù)庫構(gòu)成，包括Database of Interacting Proteins、Biological General Repository for Interaction Datasets、Human Proteins Reference Database、Intact Molecular Interaction Database、Molecular Interaction Database、Biomolecular Interaction Network Database。將交集基因?qū)氲紹isogenet插件中，初步構(gòu)建蛋白作用網(wǎng)絡(luò)，見圖3，通過觀察網(wǎng)絡(luò)發(fā)現(xiàn)交集基因與2425個靶點產(chǎn)生直接或間接的聯(lián)系；進一步應(yīng)用Cytoscape3.7.1中CytoNCA插件對所得的PPI作用網(wǎng)絡(luò)進行進一步拓撲分析，篩選網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵節(jié)點。按DC（Degree）＞61篩選出264個節(jié)點，對所得的298個節(jié)點進一步進行拓撲分析，按BC（Betweenness）＞600篩選出16個關(guān)鍵節(jié)點，篩選方法見圖4，其中EGFR（表皮生長因子受體），MYC（MYC原癌基因，BHLH轉(zhuǎn)錄因子）在網(wǎng)絡(luò)中連接程度較高。

圖2 復(fù)方化學(xué)成分-靶點作用網(wǎng)絡(luò)

圖3 PPI網(wǎng)絡(luò)

圖4 關(guān)鍵節(jié)點的篩選流程

2.5 交集基因的GO和KEGG通路富集分析 基于GO數(shù)據(jù)庫和KEGG通路數(shù)據(jù)庫對交集基因進行富集分析，富集條件為P值Cutoff=0.05且q值Cutoff=0.05，其余默認原始設(shè)置，選取排名前20的項目，見表4、表5，并根據(jù)每個項目的P值、q值及富集在其上的基因數(shù)目繪制圖形，見圖5、圖6，橫坐標(biāo)表示靶點數(shù)，左邊表示生物學(xué)過程，顏色表示P值，P值越小顏色越偏向紅色，P值越大則越偏向藍色。GO分析發(fā)現(xiàn)交集基因主要參與了對營養(yǎng)水平的反應(yīng)、平滑肌細胞增殖的調(diào)控、平滑肌細胞增殖等生物學(xué)過程。KEGG通路富集發(fā)現(xiàn)主要涉及PI3K-Akt信號通路、JAK-STAT信號通路以及HIF-1信號通路等。應(yīng)用Cytoscape3.7.1對富集到的交集基因作用通路做可視化處理，構(gòu)建交集基因靶點-通路網(wǎng)絡(luò)，見圖7，按Degree值大小決定節(jié)點大小。從圖可知，一條KEGG通路可以調(diào)控多個靶點基因，一個靶點基因同時出現(xiàn)在多條通路中，這說明加味大承氣湯治療腸梗阻是通過多靶點、多通路的。

圖5 交集基因GO分析圖

表4 交集基因相關(guān)的GO富集條目

序號 ID 名稱 P值 Q值 Count 10 GO:0035296 regulation of tube diameter 4.14E-10 2.45E-08 7 11 GO:0050880 regulation of blood vessel size 4.14E-10 2.45E-08 7 12 GO:0097746 regulation of blood vessel diameter 4.14E-10 2.45E-08 7 13 GO:0035150 regulation of tube size 4.35E-10 2.45E-08 7 14 GO:0062013 positive regulation of small molecule metabolic process 6.66E-10 3.20E-08 7 15 GO:1905952 regulation of lipid localization 7.98E-10 3.58E-08 7 16 GO:0050679 positive regulation of epithelial cell proliferation 5.31E-09 1.88E-07 7 17 GO:0009612 response to mechanical stimulus 6.06E-09 2.04E-07 7 18 GO:0150076 neuroinflammatory response 4.36E-10 2.45E-08 6 19 GO:2000379 positive regulation of reactive oxygen species metabolic process 2.85E-09 1.07E-07 6 20 GO:0150077 regulation of neuroinflammatory response 1.64E-09 6.88E-08 5

表5 交集基因相關(guān)的KEGG富集通路

圖6 交集基因KEGG通路富集圖

圖7 交集基因靶點-通路圖

3 討論

根據(jù)中醫(yī)理論，機械性腸梗阻屬于“腸結(jié)病”的范疇。《素問·靈蘭秘典論》曰：“大腸者，傳導(dǎo)之官，變化出焉。小腸者，受盛之官，化物出焉”。腸梗阻發(fā)生之后，腸道“傳化物而不藏，實而不滿”狀態(tài)異常，局部氣血津液輸布異常，不通則痛，進而腸管失養(yǎng)而糜廢不用，影響其“泌別清濁、傳化糟粕”的功能。大承氣湯是《傷寒雜病論》的經(jīng)典方，現(xiàn)代臨床將此方廣泛用于腸梗阻、胰腺炎等陽明腑實證。

本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法研究加味大承氣湯治療腸梗阻的作用機制。根據(jù)OB和DL參數(shù)，共篩選出加味大承氣湯化學(xué)成分121個，預(yù)測靶點1478個。結(jié)果表明，槲皮素，木犀草素、β-谷甾醇等是其主要的化學(xué)成分。藥理學(xué)研究表明，槲皮素是一種黃酮類化合物，能夠有效抑制腫瘤壞死因子和白細胞介素等炎癥因子的表達，且具有舒張血管的作用，能夠清除氧自由基，從而達到具有抗炎，抗氧化，消炎鎮(zhèn)痛的作用[10-12]。木犀草素是一種天然黃酮類物質(zhì)，具有較強的抗炎作用。木犀草素能抑制IL-6、IL-1B、TNF-α等炎癥因子的表達，并且能夠提高IL-10（抗炎細胞因子）的水平來調(diào)控炎癥反應(yīng)[13]。劉威良等[14]發(fā)現(xiàn)β-谷甾醇通過調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺激素系統(tǒng)達到類似激素樣抗炎的作用。肖志彬等[15]發(fā)現(xiàn)β-谷甾醇可以增強血清中氧自由基清除能力，降低腫瘤壞死因子水平達到抗炎的作用。槲皮素主要來源于延胡索，延胡索，性辛苦溫，能活血行氣止痛，廣泛用于各種瘀阻疼痛。木犀草素主要來源于枳實，枳實能破氣消積，化痰散痞。β-谷甾醇主要來源于大黃、赤芍，大黃能瀉下攻積，涼血祛瘀。赤芍能涼血散瘀止痛。腸梗阻發(fā)病時，腸道局部發(fā)生炎癥反應(yīng)，并且有腸黏膜淤血水腫等一系列病理過程，在加味大承氣湯中藥物所含的木犀草素、β-谷甾能有效介導(dǎo)炎癥反應(yīng)達到抗炎的目的。而腸道黏膜所發(fā)生的的一系列病理變化及疼痛的臨床癥狀也與中醫(yī)理論上“瘀”以及“不通則痛”的理論相契合，應(yīng)用延胡索-赤芍活血化瘀止痛藥對則能夠有效緩解腸道局部淤血的表現(xiàn)，腸道黏膜淤血、水腫減輕又能夠促進腸蠕動，緩解腸梗阻的癥狀，這也是延胡索-赤芍成為臨床上廣泛應(yīng)用于大承氣湯加味的中藥的重要原因。獲取藥物疾病的交集基因是時并未獲取到芒硝的相關(guān)靶點，我們推測芒硝治療腸梗阻所起到的瀉下通便軟件潤燥的功效是通過物理作用起效。芒硝的主要成分是含水硫酸鈉（Na2SO4·10H2O），其原理是在到達腸道局部時機械刺激腸壁，在腸內(nèi)形成高滲溶液，促進腸蠕動引起瀉下。這也是加味大承氣湯能夠攻下軟堅的重要原因。

在化學(xué)成分-交集基因靶點網(wǎng)絡(luò)中，PTGS2（前列腺素G/H合成酶2），ADRB2（腎上腺素受體β2），PRSS1（絲氨酸蛋白酶1）Degree值較高。在加味大承氣湯的主要化學(xué)成分中，槲皮素，木犀草素、β-谷甾醇等主要化學(xué)成分能夠作用于網(wǎng)絡(luò)中的多個交集基因靶點，而PTGS2、ADRB2、PRSS1等主要靶點也與多個化學(xué)成分互相作用，這這說明加味大承氣湯可能是通過多味中藥中的槲皮素，木犀草素、β-谷甾醇等主要化學(xué)成分作用于PTGS2、ADRB2、PRSS1等主要靶點來達到治療腸梗阻的目的。

為進一步闡述靶點之間的作用關(guān)系，對復(fù)方-疾病交集基因靶點進行蛋白互作分析。通過分析發(fā)現(xiàn)，EGFR（表皮生長因子受體）在網(wǎng)絡(luò)中Degree值較大，在網(wǎng)絡(luò)中連接程度較高。進一步對交集基因進行GO功能富集分析，發(fā)現(xiàn)交集基因主要參與了對營養(yǎng)水平的反應(yīng)、平滑肌細胞增殖的調(diào)控、平滑肌細胞增殖等生物學(xué)過程。EGFR通路能夠有效促進有絲分裂，形成角質(zhì)細胞，角質(zhì)細胞也可通過EGFR刺激再生。EGF是EGFR主要配體之一，能夠刺激周圍神經(jīng)修復(fù)和再生[16]。另外，Marino等[17]對人表皮淋巴管內(nèi)皮細胞（LECs）進行體外研究，發(fā)現(xiàn) EGFR可以通過表達 EGF 來促進淋巴管形成。EGFR能夠使receptor ligand activity（受體配體活性）增強，來促進血管淋巴管的再生，刺激周圍神經(jīng)的修復(fù)和再生來達到抑制炎癥反應(yīng)，減輕疼痛，緩解腸梗阻癥狀的目的。平滑肌細胞能夠促進腸道蠕動，幫助消化和排空食物。腸梗阻往往伴隨著痛、脹、嘔、閉的癥狀，患者營養(yǎng)狀態(tài)較差。GO富集到的對營養(yǎng)水平的反應(yīng)、平滑肌細胞增殖、調(diào)控等生物學(xué)過程可能是加味大承氣湯治療腸梗阻的關(guān)鍵所在。

交集基因KEGG通路富集分析，其通路主要包括PI3K-Akt信號通路、JAK-STAT信號通路以及HIF-1信號通路等。PI3K-Akt是存在于機體細胞的重要信號通路，參與機體多種生理病理過程[18]，對細胞的生長、增殖起中心調(diào)控作用[19]。PI3K-Akt信號通路能夠降低機體炎癥因子的表達，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。JAK-STAT信號通路能調(diào)控諸多細胞因子（白細胞介素、干擾素、紅細胞生成素）、免疫信號傳導(dǎo)[20]，與人體內(nèi)諸多疾病有著密切的聯(lián)系[21]。HIF-1是介導(dǎo)機體對缺氧環(huán)境適應(yīng)性反應(yīng)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄激活因子，能夠隨著細胞中氧濃度的變化而改變基因表達[22]。腸梗阻的診療過程中會引起機體微環(huán)境的變化，造成機體局部缺氧，而加味大承氣湯能夠使得機體HIF-1信號通路激活，從而改善機體微環(huán)境。因此，加味大承氣湯可能是通過激活機體的PI3K-Akt信號通路、JAKSTAT信號通路以及HIF-1信號通路來達到治療腸梗阻的作用。

上述KEGG通路的富集結(jié)果還顯示，還富集到了膀胱癌，腫瘤蛋白多糖，人巨細胞病毒感染等通路結(jié)果，這說明加味大柴胡湯除了直接作用于PI3K-Akt、JAK-STAT、HIF-1信號通路，還具有影響機體內(nèi)多種多種代謝通路的基因靶點發(fā)揮治療腸梗阻的作用。

本研究仍存在不足，由于TCMSP數(shù)據(jù)庫中沒有芒硝這味藥，未能系統(tǒng)整體的展現(xiàn)加味大承氣湯治療腸梗阻的作用機制。

綜上所述，本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法，分析加味大承氣湯活血攻下法治療腸梗阻的機制。結(jié)果顯示，主要是通過槲皮素，木犀草素、β-谷甾醇等多種潛在化學(xué)成分作用于EGFR等基因，從而調(diào)節(jié)多種生物學(xué)功能以及多條通路來達到治療目的。為后續(xù)進一步探討機制和優(yōu)化實驗設(shè)計提供支持，同時，本文也為中藥及其復(fù)方治療某種疾病的機制分析提供了研究方法。