高效液相色譜法測(cè)定化妝品中二苯酮-2含量的不確定度評(píng)定

朱曉雯，付金鳳

(常州市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)中心，江蘇 常州 213000)

二苯酮-2是2,2’,4,4’-四羥基二苯酮(benzophenone-2)。它們被添加到食品包裝的生產(chǎn)中，以保護(hù)它免受紫外線的傷害，還會(huì)在某些化妝品中添加[1]。二苯酮-2有卵黃蛋白原誘導(dǎo)作用[2]，通過血腦屏障，但其在腦結(jié)構(gòu)中的濃度遠(yuǎn)低血液[3]。二苯酮-2的危害還不明確，目前我國僅在《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)中有二苯酮-2的檢測(cè)方法，未定限量。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 材料與試劑

乙腈為色譜純；二苯酮-2(批號(hào)：170614，純度：99.9%)，北京曼哈格生物科技有限公司；供試樣品為水潤防曬霜，廠家Manx。

1.2 儀器與設(shè)備

島津液相色譜儀LC-20AD，日本島津公司；XP105，瑞士梅特勒-托利多集團(tuán)。

1.3 方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

C18柱(250 mm×4.6 mm×5 m)，以乙腈和水為流動(dòng)相梯度洗脫，檢測(cè)波長335 nm，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃。

1.4 對(duì)照品溶液制備

精密稱取二苯酮-2對(duì)照品0.1 g(精確到0.00001 g)，用乙腈溶解稀釋定容，得1000 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再將上述溶液稀釋至1、2、4、8、20、100、150 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.5 供試品溶液的制備方法

稱取樣品0.1 g(精確到0.0001 g)于50 mL容量瓶中，加乙腈+水(90+10)約45 mL，超聲30 min后定容，4500 rpm離心30 min。取上清作為供試品溶液。

1.6 測(cè)定方法

進(jìn)樣10 μL，依據(jù)上述色譜條件，以保留時(shí)間定性，用外標(biāo)法計(jì)算含量。

1.7 數(shù)學(xué)模型

式中：w—化妝品中二苯酮-2的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；p—從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到二苯酮-2的濃度，μg/mL；V—試樣定容體積，mL；m—試樣的量，g。

1.8 不確定度因素分析

根據(jù)《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》[4]，從標(biāo)準(zhǔn)品制備、樣品預(yù)處理到測(cè)量數(shù)學(xué)模型分析，二苯酮-2測(cè)定結(jié)果的不確定度來源分析見圖1。

圖1 不確定度來源分析Fig.1 Source analysis of uncertainty

2 標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)定

2.1 樣品制備過程引入的不確定度

2.1.1 樣品稱量過程

2.1.2 樣品稀釋過程

將上述不確定度合成，得到的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備過程引入的不確定度

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品稱量過程

十萬分之一天平最大誤差：±0.1 mg。按矩形分布，取k=3，則稱取0.1 g標(biāo)準(zhǔn)品引入的相對(duì)不確定度為：

2.2.2 配制標(biāo)準(zhǔn)系列的玻璃容器

校準(zhǔn)溶液配制過程中使用的玻璃量具(A級(jí))，有相應(yīng)的允差。按照矩形分布考慮，k=3，玻璃容器的相對(duì)不確定度分量如表1所示。

表1 玻璃容器引入的不確定度Table 1 Uncertainty introduced byglass container

二苯酮-2稱樣量為101.84 mg，標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為：1.02、2.03、4.07、8.14、20.35、101.74、152.61 μg/mL，過程中引入的相對(duì)不確定度分別0.00471、0.00376、0.00376、0.00378、0.00426、0.00218、0.00164，取最大值，urel(v0)=0.00471。

2.3 高效液相色譜儀引入的不確定度

2.4 樣品預(yù)處理引入的不確定度

式中：s為標(biāo)準(zhǔn)偏差；FRec為平均回收率；n為實(shí)驗(yàn)次數(shù)。

2.5 合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

表2 不確定度分量表Table 2 Uncertainty component table

綜合上述不確定度分量，相對(duì)合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

=0.0122

實(shí)驗(yàn)測(cè)得平均樣品含量為1.02 mg/g，合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度為1.02×0.0122=0.012 mg/g。

2.6 擴(kuò)展不確定度

置信區(qū)間95%，包含因子k=2，擴(kuò)展不確定度為0.012×2=0.024 mg/g，平均樣品含量為1.02 mg/g，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不確定度為1.02±0.012 mg/g (k=2)。

3 結(jié) 論

本研究全面的分析了化妝品中二苯酮-2測(cè)定的不確定度來源。從結(jié)果可知，主要來源是標(biāo)準(zhǔn)品定容和樣品的重復(fù)性帶來的不確定度。在實(shí)際測(cè)試過程中，校準(zhǔn)玻璃量器，控制實(shí)驗(yàn)室溫濕度及定期對(duì)儀器維護(hù)能夠進(jìn)一步提高測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。