食品微生物檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定方法的效果分析

□ 楊曉忠 麗江市疾病預(yù)防控制中心

目前，我國(guó)食品安全問(wèn)題日益嚴(yán)峻，對(duì)食品安全的監(jiān)管力度日益增強(qiáng)，其中食品微生物檢驗(yàn)?zāi)軌蛴行ПＷC食品安全。以往主要采取測(cè)試紙片法以及技術(shù)瓊脂培養(yǎng)法，然而在具體應(yīng)用當(dāng)中，容易引發(fā)細(xì)菌菌落混淆的現(xiàn)象，對(duì)其總數(shù)檢測(cè)較為不利，極有可能出現(xiàn)較大偏差[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本疾控中心接收的食品樣品，一共有220份。

1.2 方法

1.2.1 平板菌落計(jì)數(shù)法

在無(wú)菌狀態(tài)之下取出食品樣品25 g，裝入到含有225 mL生理鹽水的錐形瓶當(dāng)中，充分搖晃均勻，得到1∶10的樣品菌液，采取無(wú)菌吸管抽取1∶10樣品均液1 mL緩慢注入到含有9 mL的生理鹽水試管當(dāng)中，同時(shí)采取以上方法制取并抽取1∶1 000以及1∶10 000的樣品均液，分別注入到兩個(gè)無(wú)菌平皿當(dāng)中，并且抽取1 mL空白稀釋液做對(duì)照，之后將15 mL46 ℃的瓊脂培養(yǎng)基注入到平皿當(dāng)中，充分搖晃均勻，等到凝固以后將其翻轉(zhuǎn)，放到恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h。

1.2.2 菌落總數(shù)測(cè)定方法

將測(cè)試片放在水平臺(tái)面上，將測(cè)試片當(dāng)中的包膜去除，采取1.2.1中的方法制作不同稀釋程度的樣品液放置在測(cè)試片中央位置，分別取1 mL食品樣品，將蓋膜覆蓋好，培養(yǎng)基凝固以后，將紙片壓緊，讓樣品均勻分布在試紙上，每個(gè)稀釋度樣品各接種2片，放在36 ℃下培養(yǎng)48 h。

1.2.3 TCT培養(yǎng)法

吸取1 mL濃度在0.5%的TCT溶液滴至瓊脂培養(yǎng)基當(dāng)中（100 mL），制備TCT瓊脂培養(yǎng)基濃度，接種以及培養(yǎng)方法與上述方法相同。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)于3種計(jì)數(shù)方法測(cè)定的總菌落數(shù)，與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.1-2010中的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行對(duì)比，判定樣品合格與否。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)納入SPSS20.0軟件，P＜0.05，則差異具有存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

平板菌落計(jì)數(shù)法的不合格率為9.1%，菌落總數(shù)測(cè)定法的不合格率為8.2%，TCT培養(yǎng)基法的不合格率為10%，3種檢測(cè)方法結(jié)果之間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 三種檢測(cè)方法結(jié)果情況對(duì)比

3 討論

最近幾年，食品安全已經(jīng)成為人們廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)，食品安全問(wèn)題日益增多，對(duì)大家的健康飲食造成了巨大的威脅。食品在整個(gè)制作過(guò)程當(dāng)中會(huì)接觸到各種各樣的微生物，造成食品變質(zhì)。有關(guān)研究表明[2]，近年來(lái)主要采取平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行微生物檢測(cè)。有關(guān)研究表明[3]，大部分菌類(lèi)均有脫氫酶，TCT能夠有效檢測(cè)脫氫酶脫下的氫，溶液顏色逐漸從白色轉(zhuǎn)變成為紅色，便于觀(guān)察以及計(jì)數(shù)。除此之外，為了進(jìn)一步保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，檢測(cè)中心還要從以下3方面入手，對(duì)檢測(cè)質(zhì)量進(jìn)行有效控制：①要求檢驗(yàn)人員的水平足夠高，操作一定要規(guī)范，使相關(guān)工作有序開(kāi)展；對(duì)室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行控制，對(duì)培養(yǎng)皿的溫度以及濕度給予高度重視；②要對(duì)檢驗(yàn)儀器進(jìn)行定期校對(duì)，使其準(zhǔn)確性得以保證；③妥善保管樣品，放置在通風(fēng)以及干燥的環(huán)境當(dāng)中，對(duì)必需要冷藏的樣品進(jìn)行冷藏；一定要明確標(biāo)注樣品的有效時(shí)間，過(guò)期樣品不可進(jìn)行檢測(cè)。

綜上所述，食品微生物檢驗(yàn)采取平板菌落計(jì)數(shù)法、TCT培養(yǎng)基法以及菌落總數(shù)測(cè)定法這3種方法均可以取得相對(duì)比較高的準(zhǔn)確性，可以按照具體情況選擇適宜的檢驗(yàn)方法。