玉米毛狀根再生植株葉片光合特性對干旱脅迫和復(fù)水條件的響應(yīng)

武佶 王禹佳 張欣玥

摘要：玉米（Zea mays L.）是重要的糧食作物和飼料作物。近年來，干旱對玉米的生產(chǎn)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。以玉米毛狀根再生植株為試驗材料，分別進行干旱脅迫4、6、8 d以及分別復(fù)水4、8 d的試驗處理，研究玉米毛狀根再生植株葉片光合特性對干旱脅迫和復(fù)水條件的響應(yīng)規(guī)律。結(jié)果如下：隨著干旱脅迫程度增加，毛狀根植株和對照組植株的凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）及葉綠素含量（SPAD值）呈下降趨勢，細(xì)胞間隙CO2濃度（Ci）呈先下降后上升趨勢，水分利用效率（WUE）呈先上升后下降趨勢，干旱脅迫6、8 d，毛狀根植株受影響較小，各光合指標(biāo)顯著高于對照組植株（P<0.05）。毛狀根植株干旱脅迫8 d的SPAD值、Pn、Gs與對照組干旱脅迫6 d的SPAD值、Pn、Gs相當(dāng)，干旱脅迫 4 d，差異雖不顯著，但趨勢相同。說明毛狀根植株有較強的光合能力及耐旱性。隨著復(fù)水天數(shù)增加，不同干旱脅迫處理的毛狀根植株和對照組植株生理生化水平逐漸恢復(fù)，甚至干旱脅迫4 d處理的毛狀根植株的Gs出現(xiàn)了超補償現(xiàn)象，干旱脅迫6、8 d處理的毛狀根植株恢復(fù)良好，均顯著高于對照組植株（P<0.05）。對照組植株除干旱脅迫4 d能恢復(fù)至接近正常供水水平外，干旱脅迫6、8 d處理恢復(fù)較難。結(jié)果表明，玉米毛狀根再生植株光合能力強，這是由于其具有強大的根系，所以其對干旱的抵抗能力強，旱后復(fù)水的恢復(fù)能力顯著。

關(guān)鍵詞：玉米毛狀根再生植株;干旱脅迫;復(fù)水;光合特性;葉片

中圖分類號： S513.01 ?文獻標(biāo)志碼： A ?文章編號：1002-1302（2020）15-0106-06

玉米（Zea mays L.）是禾本科玉蜀黍?qū)僖荒晟荼局参?，是重要的糧食作物[1]。在自然環(huán)境下，作物容易受各種因素影響，降低品質(zhì)和產(chǎn)量，其中干旱是一種主要的非生物脅迫，威脅著世界范圍內(nèi)玉米的生產(chǎn)[2]。尤其近年來，氣候的全球性變化引發(fā)的干旱發(fā)生的周期越來越短，程度越來越重，對糧食生產(chǎn)構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。因此，在有限的水資源條件下提高作物產(chǎn)量顯得極為重要[3-4]。考慮到現(xiàn)實中作物遭遇干旱脅迫的間歇性，對干旱-復(fù)水效應(yīng)的研究變得更加有意義。

作物的抗旱性是指作物在干旱條件下通過自身一系列的變化所表現(xiàn)出的對干旱環(huán)境的適應(yīng)性和抵抗的能力[5]。干旱脅迫引起植物在基因、細(xì)胞、器官、形態(tài)等多個層次上的響應(yīng)[6]。當(dāng)作物根系感知到水分缺乏時，就以化學(xué)信號（ABA）的形式將干旱信息傳遞到地上部，在葉片水分狀況尚未發(fā)生改變時即主動降低氣孔開度，抑制蒸騰作用，平衡植物的水分利用，葉片吸收CO2能力下降，光合速率降低，此時主要是受氣孔限制因素影響[7-8]。隨著脅迫程度的加重或脅迫時間的延長，光合作用的限制因素逐漸變?yōu)橹T如Rubisco酶活性降低、對CO2的親和力降低、PSⅡ光合效率下降等生化原因引起的非氣孔限制因素[9-11]。2018年，麻雪艷等在不同苗期對夏玉米施加了不同程度的干旱處理，觀察干旱脅迫對植株葉片氣體交換參數(shù)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干旱初期植物主要受氣孔限制，由于CO2供應(yīng)減少使細(xì)胞內(nèi)O2成為電子傳遞的受體而使活性氧自由基增加，誘發(fā)了非氣孔限制的產(chǎn)生，隨著干旱發(fā)展，非氣孔限制逐漸成為光合速率的主要限制因素[12]。2019年，胡明新等對拔節(jié)期春玉米進行了干旱脅迫及復(fù)水處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)干旱脅迫下，植株的光合速率下降，輕度干旱下復(fù)水，植株表現(xiàn)出高于正常供水植株的光合速率，這種機制被稱為補償效應(yīng)[13]。

本研究采用筆者所在實驗室具有自主知識產(chǎn)權(quán)的玉米毛狀根再生植株為材料，該植株由發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因?qū)χ参矬w進行遺傳轉(zhuǎn)化后獲得，在形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為根系發(fā)達(dá)，側(cè)根增多[14]。旨在研究干旱脅迫及復(fù)水處理條件下植物葉片光合特性的變化規(guī)律，由此觀察毛狀根再生植株的抗旱性和復(fù)水后的恢復(fù)能力以及前期干旱脅迫的生理響應(yīng)對后期恢復(fù)能力的影響。本研究可為提高玉米耐旱性提供理論基礎(chǔ)，也為研究玉米在其他生物脅迫下的響應(yīng)機制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 植物材料

玉米毛狀根再生植株的獲得參照筆者所在實驗室已獲國家專利授權(quán)的試驗方法，利用發(fā)根農(nóng)桿菌15834遺傳轉(zhuǎn)化玉米自交系P131產(chǎn)生，作為試驗材料（TK）;玉米自交系P131作為對照材料（CK），由吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院惠贈。

1.2 試驗設(shè)計

盆栽試驗于2019年8—10月吉林省植物資源科學(xué)與綠色生產(chǎn)重點實驗室內(nèi)進行。盆栽使用的花盆直徑28 cm、高25 cm，土壤取自梨樹試驗田，土質(zhì)為黑土，每盆裝土1.2 kg，土壤含水量為9%，pH值為6.3，含有機質(zhì)59.3 g/kg、氮2.6 g/kg、磷 1.9 g/kg、鉀13.2 g/kg。播種前利用蒸餾水室溫浸泡種子22～23 h，每盆播種3穴，每穴5～6粒種子。并于二葉一心期定植每盆3株，在四葉一心期開始試驗處理。試驗設(shè)置正常供水（DS0）和自然干旱脅迫處理4 d（DS4）、6 d（DS6）、8 d（DS8），在脅迫結(jié)束當(dāng)天、復(fù)水4 d（R4）和8 d（R8）時進行各項參數(shù)測定，每個樣品進行3次生物學(xué)重復(fù)。

1.3 葉綠素含量的測定

選擇生長狀態(tài)良好且長勢一致的玉米植株，將葉片表面的塵土清除干凈后，采用葉綠素測定儀TYS-A測定葉片的SPAD值，分別于相同位置的葉片選取6個測量點，最后將記錄的數(shù)據(jù)取平均值。

1.4 葉片凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs） 、細(xì)胞間隙CO2濃度（Ci）以及水分利用效率（WUE）的測定

在光照充足的上午，用便攜式光合作用測定系統(tǒng)（PPSystems，英國）測定植株葉片的光合參數(shù)，設(shè)定儀器的光量子通量密度為1 600 μmol/（m2·s），葉室溫度為25 ℃，選第5片完全展開葉，在距葉尖端1/3處進行測定。測定參數(shù)包括了凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、細(xì)胞間隙CO2濃度（Ci）及水分利用效率（WUE）等。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

本研究中的數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計軟件SPSS 22.0進行差異顯著性分析，采用Sigma Plot作圖。

2 結(jié)果與分析

葉綠素是植物進行光合作用的主要色素之一，葉綠素含量直接影響植物的光合效率。由圖1-A可見，在本研究中，正常供水條件下，毛狀根植株和對照組植株的葉綠素含量沒有明顯不同，SPAD值分別為32.90、31.14。在干旱脅迫4 d后，毛狀根植株和對照組植株的葉綠素含量均有所下降，但無明顯差異。干旱脅迫6、8 d，與正常供水水平相比，毛狀根植株和對照植株分別下降25.8%、48.3%和43.5%、72.4%，差異顯著（P<0.05），毛狀根植株干旱脅迫8 d的葉綠素含量與對照組干旱脅迫6 d的葉綠素含量相當(dāng)。說明隨著干旱脅迫程度加深，毛狀根植株的光合機構(gòu)損傷較輕，可以維持較高的光合效率。

由圖1-B、圖1-C可見，干旱脅迫4 d后復(fù)水4 d，毛狀根植株恢復(fù)至正常供水水平，而對照組恢復(fù)至正常供水水平的87.5%;干旱脅迫6、8 d后復(fù)水4 d，毛狀根植株和對照組植株分別恢復(fù)至正常供水水平的87.1%、60.9%和62.8%和31.1%，毛狀根植株和對照組植株差異顯著（P<0.05），毛狀根植株干旱脅迫8 d后復(fù)水4 d的葉綠素含量與對照組干旱脅迫6 d后復(fù)水4 d的葉綠素含量相當(dāng)，說明相比于對照組植株，毛狀根植株在經(jīng)過干旱脅迫后復(fù)水，其葉綠素能夠更加快速合成，恢復(fù)力更強。復(fù)水8 d，干旱脅迫4 d處理的毛狀根植株，其葉綠素含量高于正常供水水平，出現(xiàn)超補償現(xiàn)象，對照組恢復(fù)至正常供水水平的91.6%，干旱脅迫6 d處理的毛狀根植株葉綠素含量恢復(fù)至正常供水水平的94.2%，而對照組植株僅為73.5%，差異顯著（P<0.05），干旱脅迫8 d處理的毛狀根植株葉綠素含量為正常供水水平的73.1%，大約為對照組植株的2倍，差異顯著（P<0.05），說明干旱脅迫8 d已經(jīng)對對照組植株產(chǎn)生了嚴(yán)重的傷害，葉綠素不能快速合成來彌補干旱脅迫帶來的損害，而毛狀根植株仍能夠保持葉綠素含量的相對穩(wěn)定，可以得到較好的恢復(fù)。

2.2 干旱脅迫及復(fù)水條件下葉片凈光合速率（Pn）的變化

干旱條件下，作物光合能力的高低和光合速率

的快慢直接反映出該作物的競爭能力和干旱適應(yīng)能力。由圖2-A可見，正常情況下，毛狀根植株和對照組植株P(guān)n無明顯差別，毛狀根植株和對照組植株分別為18.1、17.7 μmol/（m2·s）。隨著干旱脅迫時間增長，毛狀根植株和對照組植株P(guān)n逐漸降低，與正常供水水平相比，干旱脅迫4、6、8 d，毛狀根植株和對照組植株P(guān)n分別下降11.6%、24.9%、45.3%和21.5%、46.9%、76.3%，毛狀根植株干旱脅迫8 d的Pn與對照組干旱脅迫6 d的Pn相當(dāng)，說明隨著干旱脅迫程度加深，毛狀根植株可以穩(wěn)定保持氣孔的開放，以維持更高的光合速率。毛狀根植株的Pn值始終大于對照組植株。

圖2-B、圖2-C數(shù)據(jù)顯示，復(fù)水4 d，干旱脅迫4 d處理的毛狀根植株和對照組植株P(guān)n都能恢復(fù)至接近正常供水水平，無明顯差別;干旱脅迫6、8 d處理的毛狀根植株和對照組植株P(guān)n分別恢復(fù)至正常供水水平的88.4%、71.4%和67.4%、38.9%，說明干旱脅迫程度加深時，對照組植株受其影響較大，自我調(diào)節(jié)能力有限，不能降低干旱脅迫帶來的損害，恢復(fù)供水后無法快速恢復(fù);而毛狀根植株可以迅速恢復(fù)，維持光合機構(gòu)的活性。復(fù)水8 d，干旱脅迫4 d處理的毛狀根植株P(guān)n高于正常供水水平，出現(xiàn)超補償現(xiàn)象，而對照組植株恢復(fù)至正常供水水平的92.9%;干旱脅迫6 d處理的毛狀根植株P(guān)n完全恢復(fù)至正常供水水平，而對照組植株只恢復(fù)到正常供水水平的68.9%，兩者差異顯著（P<0.05）;干旱脅迫8 d分別恢復(fù)至正常供水水平的75.1%和47.5%，差異顯著（P<0.05），說明對照組植株無法隨著復(fù)水時間延長而得到良好的恢復(fù)，而毛狀根植株相反，在進一步復(fù)水后自身代謝加快，光合速率得到恢復(fù)。

2.3 干旱脅迫及復(fù)水條件下葉片氣孔導(dǎo)度（Gs）的變化

氣孔是植物葉片與外界進行氣體交換的主要通道，干旱脅迫會使部分氣孔關(guān)閉，減少水分的散失。由圖3-A可見，與正常供水相比，干旱脅迫4、6、8 d，毛狀根植株和對照組植株Gs分別下降8.2%、24.6%、45.5%和16.4%、44.3%和74.6%，毛狀根植株干旱脅迫8 d的Gs與對照組干旱脅迫 6 d 的Gs相當(dāng)，說明與對照組植株相比，毛狀根植株氣孔導(dǎo)度下降幅度小，能在一定程度上保持水分和氣體的交換。

由圖3-B、圖3-C數(shù)據(jù)分析表明，復(fù)水4 d，干旱脅迫4、6、8 d處理的毛狀根植株和對照組植株Gs分別恢復(fù)至正常供水水平的95.5%、82.3%、64.5%和90.3%、60.5%、37.1%。復(fù)水8 d，毛狀根植株和對照組植株繼續(xù)恢復(fù)，干旱脅迫4 d處理的毛狀根植株Gs產(chǎn)生了超補償現(xiàn)象，與對照組植株差異顯著，說明隨著復(fù)水時間延長，毛狀根植株的Gs一直保持較快的恢復(fù)。

2.4 干旱脅迫及復(fù)水條件下葉片細(xì)胞間隙CO2濃度（Ci）的變化

干旱初期，氣孔限制是導(dǎo)致光合作用下降的主要原因，判斷氣孔限制的必不可少的依據(jù)就是胞間CO2濃度（Ci）的降低。由圖4-A分析得出，正常供水條件下，毛狀根植株和對照組植株Ci分別為186、174 μmol/mol。隨著干旱脅迫時間加長，毛狀根植株和對照組植株Ci呈先下降后上升的趨勢，且毛狀根植株始終高于對照組植株。干旱脅迫4 d，毛狀根植株和對照組植株分別下降10.2%、17.8%，與Gs趨勢一致，可能是由于氣孔關(guān)閉，進入細(xì)胞內(nèi)的CO2減少，并且光合作用仍然在進行的原因所致，而干旱脅迫6、8 d，Ci持續(xù)增加，且干旱脅迫8 d時超過了正常供水水平，可能是CO2利用率低以及植株由于自身代謝產(chǎn)生CO2，導(dǎo)致CO2含量增多。

由圖4-B、圖4-C可見，復(fù)水4 d，干旱脅迫4、6 d處理的毛狀根植株和對照組植株的胞間CO2濃度（Ci）分別恢復(fù)至正常供水水平的96.8%、90.4%和93.7、85.1%;干旱8 d處理的毛狀根植株高于正常供水水平1.2%，而對照組植株高了2.9%，說明干旱脅迫8 d難以恢復(fù)至正常水平，但毛狀根植株Ci的恢復(fù)程度更好。復(fù)水8 d，毛狀根植株和對照組植株Ci較復(fù)水4 d略有提高，基本趨于穩(wěn)定，無顯著變化。

2.5 干旱脅迫及復(fù)水條件下葉片水分利用效率（WUE）的變化

水分利用效率是評價玉米耐旱能力的重要指標(biāo)之一，反映了作物生產(chǎn)過程中單位水分的能量轉(zhuǎn)化效率，受蒸騰速率和光合速率共同影響。由圖 5-A 可得，正常供水條件下，毛狀根植株和對照組植株的WUE分別為8.52、7.62 g/kg。干旱脅迫4 d后，毛狀根植株和對照組植株的WUE分別提高25.9%、13.8%，差異顯著（P<0.05）。說明毛狀根植株能夠快速進行自我調(diào)節(jié)，提高對水分的利用，抵御干旱脅迫。干旱脅迫6 d，毛狀根植株和對照組植株WUE水平均下降，但毛狀根植株仍高于正常供水水平，而對照組植株卻比正常供水水平下降15.7%，干旱脅迫8 d，與正常供水水平相比，毛狀根植株和對照組植株WUE分別下降25.5%、64.7%，差異顯著（P<0.05），說明毛狀根植株在干旱脅迫加重時仍能較好地保持對水分的利用，而對照組植株不能及時適應(yīng)環(huán)境的變化，失水較多。

由圖5-B、圖5-C可見，復(fù)水4 d，干旱脅迫 4 d 處理的毛狀根植株和對照組植株WUE分別高于正常供水水平5.0%、1.2%。干旱脅迫6 d，毛狀根植株高于正常供水水平1.9%，對照組植株恢復(fù)至正常供水水平的90.9%;干旱脅迫8 d處理的毛狀根植株和對照組植株WUE分別恢復(fù)至正常供水水平的82.3%、47.4%，差異顯著（P<0.05）。復(fù)水8 d，干旱脅迫4 d處理的毛狀根植株恢復(fù)至正常供水水平，而對照組植株高于正常供水水平的2.6%。干旱脅迫6、8 d處理的毛狀根植株和對照組植株分別恢復(fù)至正常供水水平的97.7%、83.8%和87.0%、55.6%。

3 討論與結(jié)論

3.1 毛狀根植株葉片光合特性對干旱脅迫和復(fù)水條件的響應(yīng)規(guī)律

SPAD值是衡量葉片葉綠素含量的指標(biāo)值，與葉綠素含量呈正相關(guān)，所以SPAD值的高低反映了葉片捕獲光能的能力[15-16]。結(jié)果顯示，毛狀根植株在干旱脅迫下仍可以保持相對穩(wěn)定的葉綠素含量，從而保持較高的光合效率;復(fù)水后，葉綠素可以快速合成。說明在干旱脅迫及復(fù)水條件下，毛狀根植株仍可高效地合成葉綠素，這與其具有生長速度快、根系發(fā)達(dá)的優(yōu)點有關(guān)，可以高效地利用養(yǎng)分。

氣孔是植物與外界環(huán)境進行水分和 CO2 氣體交換的重要通道。人們在研究氣孔開閉的過程中發(fā)現(xiàn)，氣孔導(dǎo)度（Gs）的升高與降低與凈光合速率（Pn）有關(guān)[17-18]。當(dāng)氣孔導(dǎo)度降低致使光合速率降低時，葉肉細(xì)胞間的CO2濃度（Ci）會降低。相反，葉肉細(xì)胞間的 CO2濃度增高說明光合速率的降低導(dǎo)致了Gs的降低[19]。在干旱脅迫下，毛狀根植株可通過調(diào)節(jié)氣孔的開閉來保持較高的氣體交換速率，用于維持自身的代謝以及保持高效的光合作用，從而來抵抗干旱脅迫對自身帶來的損害。

在水分利用率（WUE）方面，適度的干旱脅迫可以使WUE值增加，而當(dāng)干旱脅迫程度加重時，WUE隨之降低[20]，說明植株受到了較為嚴(yán)重的傷害，復(fù)水后植物葉片的氣孔限制解除，氣孔重新打開，光合機構(gòu)受到的損傷又可得到緩解。研究結(jié)果顯示，干旱脅迫及復(fù)水條件下，玉米毛狀根再生植株葉片光合特性強，這是由于其具有強大的根系，可以高效地吸收水分，所以其對干旱的抵抗能力強，旱后復(fù)水的恢復(fù)能力顯著。

3.2 玉米毛狀根植株水分高效利用機制

在干旱程度較輕時，毛狀根植株與對照組植株凈光合速率差異并不明顯，而隨著干旱脅迫程度的加深，毛狀根植株與對照組植株凈光合速率差異顯著。這說明在水分供應(yīng)不足的情況下，玉米毛狀根再生植株可以更充分地利用水分，具有更強的光合能力。2013年，周曉馥等研究了水分脅迫下玉米毛狀根再生植株的形態(tài)特征，證明了其根系在水分脅迫下可以保持良好的根源水分信號和水分利用效率[21]。一些研究認(rèn)為，較多的深層根、根系較長的品種在受到水分脅迫時，可以吸收土壤深層水分，抗旱性較強[22]。玉米毛狀根再生植株可通過發(fā)達(dá)的根系對環(huán)境中水分進行高效利用，保持了植株較高的光合速率，減弱了干旱脅迫對植株光合作用的影響。

綜上所述，玉米毛狀根再生植株在干旱脅迫和復(fù)水條件處理下，通過其發(fā)達(dá)的根系調(diào)節(jié)自身代謝效率以及養(yǎng)分和水分的利用率，從而高效地進行光合作用，表現(xiàn)出強大的耐旱性以及復(fù)水后良好的恢復(fù)性。

參考文獻：

[1]Lobell D B，Roberts M J，Schlenker W，et al. Greater sensitivity to drought accompanies maize yield increase in the U.S.Midwest[J]. Science，2014，344 （6183）：516-519.

[2]Sajedi N A，Ardakani M R，Madani H，et al. The effects of selenium and other micronutrients on the antioxidant activities and yield of corn （Zea mays L.） under drought stress[J]. Physiology and Molecular Biology of Plants，2011，17（3）：215-222.

[3]徐洪偉，周曉馥. 玉米毛狀根再生植株對水分脅迫的響應(yīng)[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2009，25（11）： 80-84.

[4]寧 芳，張元紅，溫鵬飛，等. 不同降水狀況下旱地玉米生長與產(chǎn)量對施氮量的響應(yīng)[J]. 作物學(xué)報，2019，45（5）：777-791.

[5]Khajeddin S J，Matinkhah S H，Jafari Z. A drought resistance index to select drought resistant plant species based on leaf water potential measurements[J]. Journal of Arid Land，2019，11（4）： 623-635.

[6]郭麗麗，張茜茜，郝立華，等. 大氣CO2倍增條件下冬小麥氣體交換對高溫干旱及復(fù)水過程的響應(yīng)[J]. 作物學(xué)報，2019，45（6）：949-956.

[7]張馨月，王 寅，陳 健，等. 水分和氮素對玉米苗期生長、根系形態(tài)及分布的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，52（1）：34-44.

[8]滿欣雨，郭亞蓉，葛紅娟，等. 植物地下部與地上部遠(yuǎn)端相互調(diào)控研究進展[J]. 植物生理學(xué)報，2018，54（6）：931-942.

[9]Sun X，Lu J，Yang M Y，et al. Light-induced systemic signalling down-regulates photosynthetic performance of soybean leaves with different directional effects[J]. Plant Biol，2019，21（5）：891-898.

[10]Zhu M，Li F H，Shi Z S. Morphological and photosynthetic response of waxy corn inbred line to waterlogging[J]. Photosynthetica，2016，54（4）：636-640.

[11]Vitale L，Tommasi P，Arena C，et al. Growth and gas exchange response to water shortage of a maize crop on different soil types[J]. Acta Physiologiae Plantarum，2009，96（2）：330-336.

[12]麻雪艷，周廣勝. 夏玉米葉片氣體交換參數(shù)對干旱過程的響應(yīng)[J]. 生態(tài)學(xué)報，2018，38（7）： 2372-2383.

[13]胡明新，周廣勝. 拔節(jié)期干旱和復(fù)水對春玉米物候的影響及其生理生態(tài)機制[J]. 生態(tài)學(xué)報，2020，40（1）：1-10.

[14]Xu H W，Zhou X F，Lu J M，et al. Hairy roots induced by Agrobacterium rhizogenes and production of regenerative plants in hairy root cultures in maize[J]. Sci China C（Life Sci），2006，49（4）：305-310.

[15]Rotundo J L，Tang T，Messina C D.Response of maize photosynthesis to high temperature： Implications for modeling the impact of global warming[J]. Plant Physiology and Biochemistry，2019，141：202-205.

[16]Wu Y W，Li Q，Jin R，et al. Effect of low-nitrogen stress on photosynthesis and chlorophyll fluorescence characteristics of maize cultivars with different low-nitrogen tolerances[J]. Journal of Integrative Agriculture，2019，18（6）：1246-1256.

[17]Liu C C，He N P，Zhang J H，et al. Variation of stomatal traits from cold temperate to tropical forests and association with water use efficiency[J]. Functional Ecology，2017，32（1）：20-28.

[18]江曉東，梁紅麗，李偉燕，等. 長江下游地區(qū)不同播期玉米光合特性研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，46（6）：78-81.

[19]Zhao W S，Sun Y L，Kjelgren R，et al. Response of stomatal density and bound gas exchange in leaves of maize to soil water deficit[J]. Acta Physiologiae Plantarum，2015，37（1）：1-9.

[20]Blum A. Effective use of water （EUW） and not water-use efficiency （WUE） is the target of crop yield improvement under drought stress[J]. Field Crops Research，2009，112（2）：119-123.

[21]Zhou X F，Wu H，Wei X W，et al. The morphological characteristics of regenerative plants of hairy root cultures in maize and its effect on water use efficiency[J]. Journal of Food Agriculture & Environment，2013，11（1）：357-360.

[22]徐洪偉，陸靜梅，周曉馥.水分脅迫條件下玉米毛狀根再生植株耐旱性研究[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2007，23（7）：19-23.