病理術中特殊組織冰凍切片的制片技巧和應用分析

楊秀媚

【摘 要】目的：分析病理術中特殊組織冰凍切片的制片技巧和應用情況。方法：擇取本院病理科2019年1月-2019年12月外檢手術快速病理樣本共計7560例開展研究，針對于不同組織，開展針對性的冰凍切片制備方式，分析結果。結果：針對于各個種類組織樣本，應使用合適的方式完成切片，鏡下查看組織結構較為清晰，其完全符合病理術中快速冰凍之診斷要求。結論：因為各個組織內組成成分配比存在差別。所以說，工作人員在開展實際工作中應當依照自身性質，擇取適宜的制片方式，以取得滿意成效。

【關鍵詞】特殊組織;冰凍切片;技巧分析;溫度;染色

現(xiàn)如今，冰凍切片已經在臨床手術病理診斷中得以全面應用。其所取得的效果獲得了諸多學者們的肯定與認可。但值得說明的是，在這種情況下，針對于病理醫(yī)師合理掌握冰凍切片診斷技術也提出了更為嚴苛的標準與要求。病理科醫(yī)師需要在最短的時間內分辨出送檢樣本具體性質，為病患的下一步治療提供證據[1]。術中病理快速冰凍切片具體特征為要求明確、材料較少、時間緊張等等。病理切片的制片技巧會在很大程度上對最終病理診斷準確度造成影響。并且值得注意的是，術中快速診斷所承擔的風險較高。由此能夠看出，病理醫(yī)師應當有效掌握送檢樣本制片技巧，進而取得質量過關的冰凍切片。結合實際情況，本文全面探究病理術中冰凍切片特殊組織制片技巧以及應用情況，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

擇取本院病理科2019年1月-2019年12月外檢手術快速病理樣本共計7560例開展研究。在此其中包含骨組織、淋巴結、腎臟、大腦、胃腸、乳腺以及甲狀腺等等。本實驗利用ThermoNX50恒溫冰凍設備完成切片。

1.2 方法 擇取適宜的冷凍時長以及箱體溫度，將樣本放在冰凍設備內預冷處理，同時準備好乙醇燈染色劑以及固定液等等物品。取材器械和送檢組織應當盡量避免沾水。具體的組織規(guī)格應當為2.0cm×2.0cm×2.0cm。切片包埋具體處理方式為：擇取規(guī)格適宜的組織，放入到包埋劑之中。修整組織直至最大面積、細修。同時實現(xiàn)均勻速度切片。

組織染色以及固定方法為：將切片于室溫環(huán)境下自然晾干。片刻之后使用甲醇固定時間為1min。蘇木精染處理，時間為0.5min～1min。利用濃度為1%的鹽酸乙醇完成分化，時間為15s。后開展液返藍以及碳酸鋰飽處理。使用濃度為1%的乙醇性伊紅20s，濃度為95%的乙醇脫水。利用濾紙吸干處理樣本，二甲苯透明后，使用中性塑膠完成封片。

2 結果

切片方式冷凍溫度以及冷凍時間等等因素均會對具體的切片治療造成影響。由于切片組織材質不均等，使得標本質量差異顯著。因此，應當結合具體組織則取適宜的方式完成制片，通過觀察可以發(fā)現(xiàn)細胞染色均勻度高，組織形態(tài)完整，細胞形態(tài)與常規(guī)性切片差異不大。

2.1 溫度與時間 溫度和時間對冰凍切片會產生較高影響。因為不同的組織樣本形態(tài)與結構成分存在一定差異。所以說，針對于冰凍性切片所對應的要求也各不相同[2]。冰凍切片實現(xiàn)條件有差別。通過實踐研究證實：脂肪以及乳腺溫度最低，其遠低于腎臟、肝臟、大腦、甲狀腺等等樣本箱體溫度。

2.2 其他 除卻冷凍溫度以及時間以外，在開展病理術中冰凍切片特殊組織碎片過程中，也應當注意取材過程中是否充分去掉了異物、鈣化物以及粘液等等。如果囊壁較薄，應當注意具體的組織包埋方向。完成切片之后，第一時間做好固定工作，定時更換染色液確保新鮮度，避免其變質，進而對最終診斷結果造成影響。

3 討論

病理術中冰凍切片一般應用于術中病理診斷。最近幾年，病理術中切片愈加受到臨床醫(yī)生的青睞，通過質量優(yōu)秀的冰凍切片、精湛的切片技術實施病理診斷，要求病理科醫(yī)師于短期內對于送檢樣本開展性質鑒別，進而為手術醫(yī)生決定下一步治療提供可靠依據。

從具體的冰凍切片常見組織和制片技巧方面來看，具體為：

（1）甲狀腺。針對于甲狀腺樣本，應當有效掌握溫度以及冷凍時間。通過嚴格控制后能夠取得質量過關切片。具體切片要點為必須完整切格甲狀腺包膜，開展組織修片過程中，應當有效查看切面情況。若發(fā)現(xiàn)小型結節(jié)，必須要切到，以免影響微小癌疾病診斷[3]。

（2）乳腺。和其他類別切片相比，乳腺纖維瘤切片制備相對簡單。倘若纖維成分含量較多，例如乳腺髓樣癌、乳腺病等等。經過冷凍后組織脆性升高，切片過程中非常容易出現(xiàn)空洞。所以說，應當將切片溫度控制在-17～-18℃之間，厚度為7μm，勻速慢切。通常要大于6個切緣，箱溫度應調節(jié)至-25℃，凍頭溫度為-30～-40℃，也可以利用冷凍錘全面催化冷凍過程，降低冰晶形成概率。

（3）腦部組織以及腎穿刺活檢等樣本。這些組織樣本內部含有水分較高。如果操作不到位，非常容易生成冰晶。所以說，針對于大腦組織以及腎活檢穿刺等等要本推薦速凍法加以處理。在對小型組織開展包埋過程中，應當上墊底部，預防切片機損壞現(xiàn)象發(fā)生。在進行樣本上托時，應當現(xiàn)放少量包埋劑，大約在50%冷凍時把組織攤開，后使用冷凍錘輕壓組織，厚度保持在4～5μm。完成切片之后，稍稍晾干后固定，可預防脫片現(xiàn)象發(fā)生。

（4）囊壁組織。較為常見的囊壁組織包含粘液性纖維瘤、卵巢胎肌瘤等等。上述標本外表通常附著大量脂肪、毛發(fā)、血液黏液等成分，因此不可貿然用水清洗。只需盡量將其剔除干凈。取出病變位置切成長條。制成團樣或者U型垂直放于冷凍托上[4-5]。開展切片過程中，應當確保全層完整度。對于畸胎瘤，應當切除具有特點的頭節(jié)區(qū)域。

（5）高脂肪含量樣本。由于此類樣本內含有大量的脂質，且僅有少量疏松性結締組織。在切片過程中，如果溫度控制不良，很容易發(fā)生空洞，甚至完全無法切出。所以說，針對于脂肪組織，箱體溫度必須控制在-35℃左右，開啟設備功能。切片厚度應當為15-20μm。凍頭溫度保持在-45～-50℃之間。加長冷凍時間。當取得滿意切片硬度之后，切片過程中必須快速。切片進刀要快。

總而言之，因為各個組織內組成成分配比存在差別。所以說，工作人員在開展實際工作中應當依照自身性質，擇取適宜的制片方式，以取得滿意成效。

參考文獻

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