花椒精油對(duì)1型糖尿病小鼠腸道健康的影響

任廷遠(yuǎn) 陸敏濤 黃 濤 陸龍發(fā) 楊 建 秦禮康

(貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院1，貴陽 550025)(貴州玄德生物科技股份有限公司2，貴陽 550016)(貴州省農(nóng)業(yè)生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室3，貴陽 550025)(貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)部DUS中心貴陽分中心4，貴陽 550006)

花椒(ZanthoxylumbungeanumMaxim)是蕓香科(Rrutaceac)花椒屬植物的果皮，屬藥食同源類物質(zhì)[1]?；ń肪陀纸谢ń窊]發(fā)油，由花椒果皮所提取分子量較小的揮發(fā)性精油類物質(zhì)，顏色以無色或淺黃色為主，提取過程中可以隨蒸汽蒸出，是花椒的原次生代謝產(chǎn)物，它對(duì)花椒獨(dú)特的香氣具有很大的貢獻(xiàn)[2]，其不僅是一種重要的食品添加劑和調(diào)味料，也可作為醫(yī)藥、化妝品和農(nóng)藥等的基礎(chǔ)原料，具有廣泛的開發(fā)利用價(jià)[3]。近年來，花椒精油的提取、抗菌活性、成分分析已經(jīng)成為了研究的熱點(diǎn)。路純明等[4]對(duì)花椒揮發(fā)油進(jìn)行純化，獲得各純化組分；并分析這些組份對(duì)雜擬谷盜的影響，結(jié)果顯示能夠殺滅這種害蟲的成蟲，其中β-水芹烯和芳樟醇有較強(qiáng)的殺蟲活性。聶霄艷等[5]研究發(fā)現(xiàn)花椒精油中β-水芹烯既有驅(qū)蟲效果，又有觸殺作用。W.Choochote等[6]對(duì)比花椒精油與其他植物精油對(duì)伊蚊的作用效果，結(jié)果顯示花椒精油可以有效驅(qū)除伊蚊達(dá)到1 h。王峰等[7]對(duì)比了超臨界、亞臨界萃取法和水蒸氣蒸餾法提取的花椒精油的抑菌效果，結(jié)果表明不同方法提取的花椒精油均有抑菌效果，其作用效果區(qū)別不大，且對(duì)金黃色葡萄球菌、濃綠桿菌和傷寒沙門氏菌有良好的抑制作用。弭向輝[8]初步研究了花椒精油的抗腫瘤作用，發(fā)現(xiàn)花椒精油能抑制黑色素瘤細(xì)胞A375的生長，并觀察到黑色素瘤細(xì)胞A375體積明顯縮小，呈現(xiàn)不規(guī)則生長狀態(tài)，且出現(xiàn)了大量細(xì)胞破碎的狀況；而且精油的抗瘤細(xì)胞作用與其濃度和時(shí)間相關(guān)。袁太寧等[9]應(yīng)用花椒精油處理宮頸癌Hela細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)在低濃度的狀態(tài)下就可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。另外，花椒精油抗脂質(zhì)過氧化活性和清除自由基活性的能力比維生素E、維生素C都更勝一籌，而且抗脂質(zhì)過氧化作用比清除自由基活性稍強(qiáng)[10]。蔡華珍等[11]采用0.1%八角精油、0.08%花椒精油、0.04%桂皮精油作為保鮮劑能使調(diào)理雞肉串在4 ℃下保鮮達(dá)20 d, 25 ℃下保鮮16～18 h。

腸道微生態(tài)系統(tǒng)是影響動(dòng)物消化吸收能力的重要因素，腸道菌群平衡有助于提高動(dòng)物的消化吸收能力[12]。孫琳等[13]研究表明，花椒精油對(duì)葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium，DSS)介導(dǎo)潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)小鼠的腸道菌群有益的影響。Castillo M等[14]研究表明，在飼糧中添加3%肉桂醛的植物精油，可顯著增加斷奶仔豬腸道內(nèi)有益菌乳酸桿菌數(shù)量，能緩解仔豬斷奶應(yīng)激作用；Tiihonen K等[15,16]研究表明，飼糧中添加肉桂醛可調(diào)節(jié)肉雞腸道菌群，維持腸道微生態(tài)平衡，從而提高肉雞生長性能。王光富等[17]研究表明，單獨(dú)添加植物精油和酸化劑較混合添加有助于維持羅曼粉殼產(chǎn)蛋雞盲腸微生物穩(wěn)態(tài)。Figen等[18]研究表明，大蒜精油和牛至可顯著降低肉雞腸道梭狀芽孢桿菌和鏈球菌數(shù)量以上的研究表明，植物精油可抑制腸道有害菌生長，促進(jìn)有益菌生長，發(fā)生改善機(jī)體腸道平衡的作用?；ń芳盎ń仿槲段镔|(zhì)對(duì)機(jī)體糖代謝[19]、脂代謝[20]、蛋白質(zhì)代謝[21]及腸道健康[22]的影響及其機(jī)制已基本清楚，而花椒精油對(duì)機(jī)體腸道的影響研究較少，因此研究花椒精油對(duì)腸道健康的影響具有重要意義。

采用STZ誘導(dǎo)建立1型糖尿病小鼠模型，分別從生長狀況、理化指標(biāo)、腸道微環(huán)境及腸道微生物等研究花椒精油對(duì)1型糖尿病小鼠腸道健康的影響，以期為花椒精油在食品、醫(yī)療、功能性食品中的應(yīng)用提供的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紅花椒精油，由陜西韓城產(chǎn)大紅袍花椒，經(jīng)超臨界CO2萃取后，用分子蒸餾分離而得，由貴州玄德生物科技股份有限公司提供；昆明種雄性小鼠，SPF級(jí)，每只18～22 g，共58只，由貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(黔)2018-0001；鏈脲佐菌素(STZ)、DNA凝膠回收試劑盒、糞便DNA提取試劑盒、熒光定量試劑盒、短鏈脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸、異酸)標(biāo)準(zhǔn)品、巴豆酸、丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)品。

1.2 儀器與設(shè)備

DW-HL398超低溫冷凍儲(chǔ)存箱、PHS-3E3C精密pH計(jì)、S1000 梯度 PCR 儀、氣相色譜儀GC-2010，Staibilwax-DA毛細(xì)管色譜柱、L5S紫外-可見光光度計(jì)、Nano Drop 1000微量紫外分光光度、Light Cycler Nano 熒光定量 PCR 儀、740血糖儀。

1.3 動(dòng)物飼養(yǎng)與樣品采集

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格遵循現(xiàn)行的貴州醫(yī)科技大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)的相關(guān)法律法規(guī)進(jìn)行(SYXK(黔)2018-0001)。將58只SPF級(jí)，18～22 g，雄性小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白組(n=10)和造模組(n=48)，禁食不禁水12 h，造模組(n=48)一次性腹腔注射150 mg/kg STZ造模，空白組腹腔注射等劑量的檸檬酸緩沖液，注射后第3天，禁食10 h，尾尖采血，測量其空腹血糖值，血糖值高于11.10 mmol/L時(shí)則造模成功[19-21]，并篩除建模失敗的小鼠。把40只建模成功的小鼠根據(jù)隨機(jī)區(qū)組法按血糖值分為4組(n=10)，模型組0 mg/(kg·d)、高劑量組15 mg/(kg·d)、中劑量組9 mg/(kg·d)和低劑量組3 mg/ (kg·d)。每天上午10:00灌胃，空白對(duì)照組和模型組灌胃等劑量的大豆油，實(shí)驗(yàn)期間自由飲食和飲水，每天記錄飲食飲水量。每3 d稱1次小鼠體質(zhì)量，并調(diào)整灌胃量。飼喂28 d后，禁食12 h，眼眶取血后，解剖，取出肝臟、腎、脂肪、肓腸等組織；其中肓腸稱重后，從一端縱切開，訊速將內(nèi)溶物分裝于滅過菌的1.5 mL試管中，置于液氮中保存；肓腸壁于4 ℃水理鹽水中洗凈，吸水紙吸干后稱重及測量表面積。

1.4 花椒精油的處理

為保證每只小鼠為等劑量灌胃(40 g體重小鼠灌胃0.2 mL劑量)，準(zhǔn)確稱取1.2 g紅花椒精油，加入400 mL大豆油后，充分混勻，配制成3 mg/mL花椒精油溶液，分別用大豆油稀釋成1.8、0.6 mg/mL的花椒精油溶液，用于高(15 mg/mL)、中(9 mg/mL)、低(3 mg/mL)劑量組的灌胃濃度，空白組和模型組灌胃等劑量大豆油，每3 d配一次，于4 ℃保存。

1.5 飼料效率計(jì)算公式[1,22]

1.6 盲腸壁表面積的測定

參照游玉明等[22]方法進(jìn)行，將剪切下來的盲腸洗凈后，從一端縱切開，用小刀將其全部展開平鋪在帶有刻度的坐標(biāo)紙上，用鉛筆沿盲腸壁的邊緣描繪。用剪刀沿線條剪下畫線的部分，并稱重。將稱重結(jié)果帶入表面積計(jì)算公式，算出盲腸壁面積。

式中：A0為剪下輪廓紙的質(zhì)量；A為1 cm2的坐標(biāo)紙的質(zhì)量。

1.7 血糖值的測定

在給藥后的0、14、28 d，禁食不禁水6 h，使用血糖儀剪尾采血測定FBG[19-21]。

1.8 盲腸內(nèi)容物pH[23]

稱取0.5 g盲腸內(nèi)容物于離心管中，加入質(zhì)量比體積為1∶10的蒸餾水，震蕩2 min；3 500 r/min，離心10 min，取上清液用精密pH計(jì)測量其pH。

1.9 盲腸內(nèi)容物游離氨含量[22,23]

準(zhǔn)確稱取丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，加入少量蒸餾水溶解后定容至100 mL，得到丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)液母液。分別吸取配好的丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)母液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL于比色管中，加入pH=8.0磷酸鹽緩沖溶液0.5 mL和 2% 茚三酮溶液0.5 mL，再加入蒸餾水至2 mL，于沸水浴中加熱15 min，靜置15 min，用移液槍吸取0.2 mL稀釋至5 mL，于570 nm波長下測定吸光值。根據(jù)結(jié)果求得回歸方程為y=0.184 4x-0.017 5，相關(guān)系數(shù)R2=0.990 2。

盲腸內(nèi)容物經(jīng)過處理后，分別吸取1 mL至比色管中，加入配好的磷酸緩沖液0.5 mL和2%茚三酮溶液0.5 mL，于沸水浴中加熱15 min，冷卻后吸取0.2 mL稀釋到5 mL，于570 nm波長下測定吸光值。

1.10 盲腸內(nèi)容物游離脂肪酸的測定

參照李明澤等[22,24]方法進(jìn)行，稱取0.5 g盲腸內(nèi)容物加入10 mol/L氫氧化鈉溶液(含有巴豆酸5 mmol/L)2 mL，混勻靜置30 min，在4 ℃，4 000r/min下離心15 min，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾上清液后，用氣相色譜法進(jìn)行測定。

色譜條件為：Staibilwax-DA毛細(xì)管色譜柱(30 m × 0.2 mm, 0.5 μm)；升溫程序：90 ℃保持0.5 min，以5 ℃/min升至150 ℃，保持7 min；進(jìn)樣量1μL載氣流速0.95 mL/min，進(jìn)樣口溫度220 ℃，F(xiàn)ID檢測器，檢測器溫度230 ℃；氫氣流量40 mL/min，空氣流量400 mL/min，尾吹流量40 mL/min。

1.11 盲腸內(nèi)容物微生物檢測

取一份盲腸內(nèi)容物，按照糞便細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒的說明提取其中細(xì)菌DNA，測定濃度及純度，保存于-20 ℃環(huán)境下備用。參照文獻(xiàn)設(shè)計(jì)各腸道菌群特異性PCR引物[25,26]，在BLAST基因庫內(nèi)(www.ncbi.nlm.nih.gov)比對(duì)引物序列特異性。各引物由上海生工生物工程股份有限公司合成，引物序列見表1。其定量測定采用20 μL反應(yīng)體系：SYBR Premix Ex TaqTMⅡ(2×)10 μL, 10 μmol/L上下游引物各1 μL，模板2 μL，雙蒸水6 μL。反應(yīng)條件為：95 ℃條件預(yù)變性5 min，95 ℃變性10 s，55 ℃退火20 s，72 ℃延伸30 s，共40個(gè)循環(huán)，同時(shí)進(jìn)行高分辨率溶解曲線實(shí)驗(yàn)。各基因引物序列及產(chǎn)物長度如表1。

表1 各細(xì)菌引物序列及產(chǎn)物長度

1.12 數(shù)據(jù)處理

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果以 mean±SD 表示，各組間差異顯著性采用SPSS 16.0 軟件分析，各組間比較采用單因素方差分析，用Duncan法分析顯著性，P<0.05被認(rèn)為有顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 花椒精油

花椒特殊的香味，主要源自花椒皮中貯存的揮發(fā)性成分，稱為揮發(fā)油或者精油，是花椒香氣的主要組成成分[27]。由圖1可知，韓城紅椒精油顏色為淺黃色，而金陽青椒精油顏色為無色，各自均具有典型的芳香味，兩者均無麻味，但青椒精油苦味明顯大于紅椒精油。本實(shí)驗(yàn)使用的紅花椒精油，由貴州玄德生物科技股份有限公司采用陜西韓城產(chǎn)大紅袍花椒，經(jīng)超臨界CO2萃取后，用分子蒸餾分離而得。

圖1 花椒精油

2.2 花椒精油對(duì)小鼠生長狀況的影響

由表2可知，與空白組相對(duì)，模型組體質(zhì)量增加量和飼料效率顯著(P<0.05)降低，而日均采食量顯著(P<0.05)升高；與模型組相比，花椒精油能顯著(P<0.05)提高小鼠體重增加量和飼料效率，高劑量和中劑量采食量顯著(P<0.05)降低。結(jié)果表明，灌胃花椒精油后，采食量減少，但飼料效率有所增加，說明花椒精油能夠促進(jìn)小鼠對(duì)飼料的消化利用率。

表2 花椒精油對(duì)小鼠體重、采食量及飼料效率的影響(n=10)

2.3 花椒精油對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響

由表3可知，飼喂期間空白對(duì)照組小鼠空腹血糖始終維持在正常范圍內(nèi)(4～6 mmol/L)，模型對(duì)照組血糖值則大于11.1 mmol/L，說明造模成功且比較穩(wěn)定。與模型組相比，灌胃花椒精油14 d后，高、中、低劑量組空腹血糖均顯著下降(P<0.05)，其中高劑量組由20.03下降到17.45，下降了12.86%；中劑量組由19.46下降到17.97，下降了7.67%；低劑量由21.07下降到19.55，下降了7.22%。灌胃28 d后，各劑量組血糖進(jìn)一步下降，與0 d相對(duì)，高、中、低劑量組分別下了19.09%、9.12% 和9.56%(P<0.05)。說明花椒精油對(duì)糖尿病小鼠具有顯著的降糖效果，其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

表3 花椒精油對(duì)糖尿病大鼠血糖的影響 (n=10)

2.4 花椒精油對(duì)小鼠盲腸及其微環(huán)境的影響

花椒精油對(duì)糖尿病小鼠盲腸及其微環(huán)境的影響如表4。與空白相比，模型組盲腸總質(zhì)量、盲腸壁質(zhì)量和盲腸表面積均顯著(P<0.05)增加，分別增加了39.66%、58.82%、18.99%；游離氨顯著(P<0.05)增加了36.23%，pH顯著(P<0.05)增加了7.95%。與模型組相比，高劑量和中劑量的花椒精油可顯著降低盲腸總質(zhì)量，分別降低了15.50%和12.07%；高、中、低劑量的花椒精油均顯著降低盲腸壁質(zhì)量，分別降低了23.53%、29.41%、23.53%，可顯著降低盲腸內(nèi)容物游離氨的含量，分別降低了16.64%、21.80%、21.65%；均有降低盲腸內(nèi)容物pH的趨勢，其中高劑量降低顯著(P<0.05)；有降低盲腸表面積趨勢，但不顯著。說明，花椒精油可以改善因STZ誘導(dǎo)的盲腸組織腫大，減少游離氨、酚類物質(zhì)等對(duì)腸道上皮傷害，具有維持因STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠腸道健康的作用。

表4 花椒精油對(duì)小鼠小鼠盲腸及其微環(huán)境的影響 (n=10)

2.5 花椒精油對(duì)小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的影響

花椒精油對(duì)糖尿病小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的影響見表5。與空白組相比，模型組盲腸內(nèi)容物中丙酸、丁酸、戊酸和SCFA均顯著(P<0.05)降低，分別降低了34.39%、37.93%、20.86%和32.40%；異丁酸有降低趨勢，但不顯著。與模型組相比，花椒精油可顯著(P<0.05)增加小鼠盲腸內(nèi)容物中丙酸、丁酸、戊酸和SCFA的量，而對(duì)異丁酸的影響不顯著。實(shí)驗(yàn)表明，劑量組對(duì)短鏈脂肪酸的含量增加有顯著的效果，并且增加的效果由花椒精油的濃度增加而增加。

表5 花椒精油對(duì)小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的影響(n=10)

2.6 花椒精油對(duì)小鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響

花椒精油對(duì)糖尿病小鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響見表6。與空白組相比，盲腸內(nèi)容物中乳酸桿菌、雙歧桿菌和梭菌均顯著(P<0.05)降低，分別降低了38.99%、28.22%、11.75%；擬桿菌也有下降(2.86%)趨勢，但不顯著。顯著增加腸桿菌和腸球菌的量，分別增加了29.69%、26.09%。與模型組相比，花椒精油可顯著增加乳酸桿菌和雙歧桿菌的量；高、中、低劑量組乳酸桿菌分別增加了22.71%、14.53%、11.86%；而雙歧桿菌的量分別增加了12.07%、5.42%、4.80%。高、中、低劑量組可顯著(P<0.05)降低腸桿菌的量，分別降低了7.25%、4.60%、3.57%；高和中劑量組可顯著(P<0.05)降低腸球菌的量，分別降低了17.73%、9.78%。結(jié)果表明，花椒精油有促進(jìn)盲腸內(nèi)容物中有益菌的生長，抑制有害菌的生長。

表6 花椒精油對(duì)小鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響(n=10) log10copies/g

3 討論

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一種以高血糖為特征的代謝紊亂性疾病群，主要包括1-型、2-型和妊娠性糖尿病[28]，1-型是胰島素分泌絕對(duì)不足引起的，2-型是胰島素分泌相對(duì)不足或受體受阻引起的[17]。鏈脲佐菌素(STZ)通過葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體(GLUT2)進(jìn)入β細(xì)胞，引起DNA烷基化，進(jìn)而使β細(xì)胞發(fā)生壞死，減少或終止動(dòng)物胰島素分泌，導(dǎo)致血糖升高，因其造模成功率高、死亡率低、穩(wěn)定、作用機(jī)制清楚而被廣泛用于誘導(dǎo)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性糖尿病[29,30]。本實(shí)驗(yàn)采用一次性腹腔注射150 mg/kg bw STZ一周后，就出現(xiàn)多飲、多食、多尿、體重減輕，同時(shí)活動(dòng)量明顯減少、精神萎靡、體毛蓬松等典型的糖尿病癥狀[31-33]。實(shí)驗(yàn)期內(nèi)模型對(duì)照組血糖值始終大于11.1 mmol/L，說明造模成功且比較穩(wěn)定[19-21]。與模型對(duì)照相比，高、中、低劑量花椒精油均有顯著的降低空腹血糖的效果，這可能與花椒精油中含有烯烴類和酮(醛)類等物質(zhì)有關(guān)[27]。甘芝霖[34]研究表明，同樣作為調(diào)品味使用的孜然(CuminumcyminumL.)精油中Y-萜品烯可以顯著降低2-型糖尿病大鼠血清中糖化血紅蛋白、甘油三酯及膽固醇的含量水平，并顯著提高胰島素的含量，從而對(duì)2-型糖尿病起到一定的治療作用。 Farrokhfall K等[35]研究肉桂植物精油的主要活性成分肉桂醛降糖機(jī)制，肉桂醛可通過改善胰島細(xì)胞的氧化應(yīng)激和炎癥狀態(tài)，防止胰島β-細(xì)胞損傷，推測花椒精油降血糖的作用機(jī)制可能與此相似。

糖尿病患者由于長期代謝異常和高血糖狀態(tài)，往往會(huì)伴有多種并發(fā)癥，其中也會(huì)使腸道內(nèi)微生態(tài)受到嚴(yán)重影響[36,37]。不過，也有研究證明，腸道菌群失調(diào)也是引起糖尿病的一個(gè)重要原因[38,39]。在腸道內(nèi)菌群失調(diào)時(shí)，腸道內(nèi)益生菌如雙歧桿菌數(shù)量減少，而一些有害菌如大腸桿菌和梭菌的數(shù)量上升，使體內(nèi)尿堿合成受阻，因此游離氨數(shù)量增加，促使腸道內(nèi)pH升高，使更多有害菌大量繁殖[40-42]。而花椒精油可顯著降低盲腸總質(zhì)量、盲腸壁質(zhì)量和盲腸內(nèi)容物游離氨的含量(表4)，均有降低盲腸內(nèi)容物pH值和盲腸表面積的趨勢(表4)。說明，花椒精油可以改善因STZ誘導(dǎo)的盲腸組織腫大，減少游離氨等對(duì)腸道上皮傷害，具有維持因STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠腸道健康的作用。

腸道內(nèi)厭氧菌的數(shù)量和代謝情況可以通過短鏈脂肪酸(SCFA)的組成和總量來間接體現(xiàn)[43,44]。與空白組相比，模型組盲腸內(nèi)容物中丙酸、丁酸、戊酸和SCFA均顯著(P<0.05)降低(表5)；這與以往的研究相一致[46,47]。研究表明，糖尿病會(huì)導(dǎo)致短鏈脂肪酸含量下降，原因可能是因?yàn)樘悄虿?dǎo)致腸道菌群穩(wěn)態(tài)失調(diào)，導(dǎo)致致病菌生長，抑制有益菌生長，降低腸道內(nèi)的發(fā)酵反應(yīng)，減少短鏈脂肪酸的生成[48,49]。而給予花椒精油灌胃28 d后，可顯著(P<0.05)增加小鼠盲腸內(nèi)容物中丙酸、丁酸、戊酸和SCFA的量(表5)。表明花椒精油具有增加腸道內(nèi)的發(fā)酵反應(yīng)，提高短鏈脂肪酸含量，改善因糖尿病導(dǎo)致小鼠腸道菌群穩(wěn)態(tài)失調(diào)的作用。而陳康等[50]發(fā)現(xiàn)，長鏈菊粉可通過改善腸道微生物的穩(wěn)態(tài)來緩解1型糖尿病小鼠的炎癥狀況和發(fā)病進(jìn)程。推測，花椒精油對(duì)1型糖尿病小鼠血糖代謝的影響與其改善腸道微生物的穩(wěn)態(tài)、減少炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān)，其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

周興婷等[49]研究表明，Lactobacillus 和 Ruminococcus 與短鏈脂肪酸的生成呈正相關(guān)性，且與乙酸、丁酸和丙酸的生成呈正相關(guān)性，而 Akkermansia 和Bifidobacterium 與丁酸的生成呈正相關(guān)性。Ruminococcus[51]是公認(rèn)的產(chǎn)丁酸的菌，腸道丁酸的減少會(huì)促進(jìn)炎癥反應(yīng)，進(jìn)而破壞正常的腸道屏障功能，糖尿病會(huì)使機(jī)體腸道產(chǎn)丁酸菌的豐度的顯著下降。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠盲腸內(nèi)容物中乳酸桿菌、雙歧桿菌和梭菌均顯著(P<0.05)降低，顯著增加腸桿菌和腸球菌的量(表6)，這與以往的研究結(jié)果相一致。而花椒精油可顯著增加乳酸桿菌和雙歧桿菌的量，可降低腸桿菌和腸球菌的量。以上結(jié)果表明，花椒精油可增加糖尿病小鼠盲腸內(nèi)容物丁酸、丙酸和戊酸的含量，改善腸道菌群的豐度，增加有益菌乳酸桿菌和雙歧桿菌的量，減少致病菌低腸桿菌和腸球菌的量，在一定程度上緩解了STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病的腸道失調(diào)。

4 結(jié)論

花椒精油能夠改善1型糖尿病小鼠的腸道健康，其可能機(jī)制是促進(jìn)腸道有益菌的生長，抑制腸道有害菌的生長，從而改善其腸道微環(huán)境。但花椒精油對(duì)糖尿病機(jī)體降血糖的作用機(jī)制，腸道健康與降血糖的關(guān)聯(lián)性，花椒精油改善糖尿病機(jī)體的腸道健康的主體成分，量效關(guān)系及作用機(jī)制等等均有待進(jìn)一步研究。