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    12種植物精油對(duì)兩種倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)熏蒸活性的研究

    2020-09-03 09:17:42趙娜娜麥迪娜托乎塔森盧若濱
    中國(guó)糧油學(xué)報(bào) 2020年8期
    關(guān)鍵詞:八角茴香花斑熏蒸

    趙娜娜 麥迪娜·托乎塔森 盧若濱

    (新疆農(nóng)業(yè)大學(xué),烏魯木齊 830052)

    赤擬谷盜(Triboliumcastaneum)廣泛存在于儲(chǔ)藏物中,在世界各地都有分布,是重要的世界性倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)之一,現(xiàn)已成為我國(guó)大型糧倉(cāng)中的優(yōu)勢(shì)害蟲(chóng)種群;食性廣,可危害谷物、油料、食用菌、中藥材、動(dòng)物性產(chǎn)品及加工產(chǎn)品等,除直接取食造成危害外,其成蟲(chóng)體表的臭腺可分泌含苯醌等致癌物質(zhì)的臭液,使被害物結(jié)塊、變色、發(fā)臭而不能食用,從而造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]?;ò咂ん?Trogodermavariabile)是一種適應(yīng)性強(qiáng),危害物品廣泛的儲(chǔ)藏物害蟲(chóng),該蟲(chóng)可危害多種倉(cāng)儲(chǔ)谷物糧食及加工品、家庭儲(chǔ)藏品,也能危害毛皮、蠶絲及動(dòng)物干制標(biāo)本,是當(dāng)前在國(guó)內(nèi)分布最廣、危害最嚴(yán)重的皮蠹類(lèi)昆蟲(chóng)[2-4]。熏蒸劑是防治倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)最理想的藥劑,以磷化氫(磷化鋁)熏蒸最為普遍,但長(zhǎng)期使用會(huì)對(duì)環(huán)境和人類(lèi)健康造成一定影響,不僅造成害蟲(chóng)抗藥性增強(qiáng),而且出現(xiàn)了糧食品質(zhì)下降、食品安全風(fēng)險(xiǎn)增加等諸多問(wèn)題[5, 6]。

    據(jù)研究報(bào)道,在全世界近50萬(wàn)種植物中,約有1005種植物具有殺蟲(chóng)活性成分,有726種對(duì)昆蟲(chóng)具有拒食、忌避、引誘、引起昆蟲(chóng)不育和調(diào)節(jié)昆蟲(chóng)發(fā)育等作用[7,8]。植物體內(nèi)的生物活性成分包括植物精油、生物堿等,其中植物精油因具有較好的揮發(fā)性,對(duì)害蟲(chóng)具有驅(qū)避或熏殺活性,部分成分還具有引誘、毒殺、種群抑制活性,在倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)防治中有著巨大的發(fā)展?jié)摿?。如通過(guò)水蒸氣蒸餾法從黃荊葉片中獲得的精油對(duì)綠豆象、谷蠹、玉米象、鋸谷盜和赤擬谷盜具有很高的觸殺、驅(qū)避和綜合殺蟲(chóng)毒效,且對(duì)種群有持續(xù)控制作用[9]。植物精油因來(lái)源于自然,具有安全、多作用位點(diǎn)、易降解、資源豐富等特點(diǎn),可成為倉(cāng)儲(chǔ)熏蒸劑的替代藥劑。

    為開(kāi)發(fā)新型綠色環(huán)保倉(cāng)儲(chǔ)熏蒸劑,通過(guò)水蒸氣蒸餾法提取12種香辛料植物精油,密閉空氣熏蒸法研究12種植物精油對(duì)赤擬谷盜和花斑皮蠹的熏蒸活性,篩選高活性精油,為開(kāi)發(fā)綠色安全倉(cāng)儲(chǔ)熏蒸劑提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 植物材料信息

    12種植物信息如表1,植物標(biāo)本均保存于新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院天然產(chǎn)物與化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

    表1 12種植物信息名錄

    1.2 供試?yán)ハx(chóng)

    赤擬谷盜2017年4月引種于河南工業(yè)大學(xué),在新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)天然產(chǎn)物實(shí)驗(yàn)室人工飼養(yǎng),飼養(yǎng)條件:溫度27~28 ℃,相對(duì)濕度75%,避光;將未受污染的健康小麥裝入玻璃瓶中,瓶口涂抹聚四氟乙烯,并用潔凈通氣性良好的紗布封住瓶口,置于培養(yǎng)箱內(nèi)。實(shí)驗(yàn)時(shí)挑取羽化5 d、同一批次、健康的成蟲(chóng)作為試蟲(chóng),不分雄雌[10]。

    花斑皮蠹于2016年5月在實(shí)驗(yàn)室儲(chǔ)藏麥麩中捕獲,由趙莉教授鑒定(新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院昆蟲(chóng)與農(nóng)藥學(xué)系),用干凈麥麩擴(kuò)大飼養(yǎng)2年。飼養(yǎng)條件:溫度27~28 ℃,相對(duì)濕度75%,避光;以無(wú)污染的麥麩為飼料人工飼養(yǎng),其余同赤擬谷盜。實(shí)驗(yàn)時(shí)挑取羽化2 d、同一批次、健康的成蟲(chóng)作為試蟲(chóng),不分雄雌。

    1.3 試劑及儀器

    連續(xù)蒸餾裝置,SHB-III循環(huán)水式真空泵,DZTW型調(diào)溫電熱套,RE-52AA型號(hào)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,數(shù)控升降式水浴鍋,PSX-280H恒溫恒濕箱。

    正己烷、無(wú)水硫酸鈉(分析純)。

    1.4 實(shí)驗(yàn)方法

    1.4.1 植物精油的提取

    于新疆烏魯木齊市北園春市場(chǎng)采購(gòu)12種香料,各3 kg,有水分的整株植物(荊芥)先曬干后使用。采用水蒸氣蒸餾法,取香料植株適量放入到3 000 mL的圓底燒瓶中,加適量水,放在電熱套上連續(xù)蒸餾6 h,蒸餾出的油水混合物用500 mL正己烷萃取,正己烷萃取物經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后,置于40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓蒸發(fā)濃縮,所得殘留的油狀液體即為精油,測(cè)精油比重,收集放入棕色瓶中保存,置于4 ℃冰箱中待用。

    1.4.2 熏蒸活性測(cè)定

    采用密閉空氣熏蒸法,使用30 mL透明樣品瓶作為密閉容器,將濾紙剪出直徑大約為瓶蓋直徑的圓片若干,放置于瓶蓋內(nèi)。以正己烷為溶劑配制一系列等比例溶液,用微量移液槍吸取精油稀釋液10 μL滴到瓶蓋內(nèi)的濾紙上,將瓶蓋置于空氣中揮發(fā)10 s后迅速蓋住瓶蓋,并用封口膜封住。將所有瓶子放置于溫度27~28 ℃、相對(duì)濕度75%的培養(yǎng)箱中。每個(gè)濃度重復(fù)5次,每個(gè)重復(fù)10只試蟲(chóng),空白對(duì)照為10 μL正己烷。24 h后,觀察瓶?jī)?nèi)熏蒸狀況和記錄試蟲(chóng)的死亡情況,死亡標(biāo)準(zhǔn)以小毛筆撥動(dòng)蟲(chóng)體,不動(dòng)者或不能正常爬行視作死亡,根據(jù)觀察數(shù)據(jù)計(jì)算校正死亡率以及半致死濃度。

    校正死亡率=100%×(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)

    半致死濃度(LC50)即引起50%試蟲(chóng)死亡率的濃度,利用Excel和SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 植物精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸活性

    赤擬谷盜成蟲(chóng)經(jīng)12種植物精油熏蒸處理24 h后,校正死亡率如表2。結(jié)果表明,12種香料植物精油對(duì)赤擬谷盜成蟲(chóng)均具有一定的熏蒸活性。在供試濃度下,赤擬谷盜成蟲(chóng)對(duì)大蒜、桂皮精油均表現(xiàn)出極高的敏感度,尤其是大蒜油,在3種測(cè)試濃度166.67、33.33、6.67 μL/L下的熏蒸致死率始終高達(dá)100%,肉桂精油則為96.67%、96.30%和92.13%,與大蒜精油的熏蒸活性無(wú)顯著差異,活性相當(dāng)。

    表2 赤擬谷盜經(jīng)植物精油熏蒸處理24 h后的死亡率/%

    孜然、八角茴香和香葉3種精油在濃度為166.67、33.33 μL/L時(shí),活性較好,與大蒜精油相比無(wú)差異,活性相當(dāng),但在低濃度6.67 μL/L時(shí),熏蒸活性下降,與大蒜油活性差異顯著,弱于大蒜油?;ń贰⑶嗷ń泛托≤钕憔驮诟邼舛?66.67 μL/L時(shí),與大蒜油的活性相當(dāng),無(wú)顯著差異,在濃度為33.33、6.67 μL/L時(shí),3種香料精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸活性弱于大蒜油。

    黑胡椒、荊芥、丁香精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸較弱,姜黃精油在所試濃度對(duì)赤擬谷盜沒(méi)有熏蒸活性。

    根據(jù)表2所示結(jié)果,比較同一濃度下不同種精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸活性差異,從中篩選出高活性精油:大蒜、肉桂、八角茴香、小茴香和花椒,5種植物精油按照1.4.2所示方法進(jìn)行熏蒸活性測(cè)定。

    5種植物精油對(duì)赤擬谷盜的LC50值見(jiàn)表3,大蒜精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸活性最強(qiáng),其次是花椒精油和小茴香精油。八角茴香精油與肉桂精油的生物活性相差不大。

    表3 植物精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸活性

    2.2 植物精油對(duì)花斑皮蠹的熏蒸活性

    花斑皮蠹經(jīng)12種植物精油熏蒸處理24 h后,校正死亡率如表4所示。大蒜、肉桂和小茴香精油對(duì)花斑皮蠹成蟲(chóng)的熏蒸活性最強(qiáng),在3個(gè)供試濃度下,致死率始終高達(dá)100%。花椒油和八角茴香油在濃度為166.67、33.33 μL/L時(shí),活性較好,與大蒜精油相比無(wú)差異,活性相當(dāng);在低濃度6.67 μL/L時(shí),八角茴香精油的熏蒸活性為81.76%,稍弱于大蒜油,但花椒精油的熏蒸活性明顯下降,與大蒜油具有顯著差異。

    表4 花斑皮蠹經(jīng)植物精油處理24 h后的校正死亡率(%)

    孜然、青花椒和香葉精油在高濃度166.67 μL/L時(shí),與大蒜油的活性相當(dāng),無(wú)顯著差異;在濃度為33.33 μL/L時(shí),4種精油的熏蒸活性稍弱于大蒜油;在低濃度6.67 μL/L時(shí),3種精油的致死率明顯下降,顯著弱于大蒜油。

    黑胡椒在166.67 μL/L時(shí)對(duì)花斑皮蠹成蟲(chóng)具有一定的熏蒸活性,致死率為47.69%,但明顯弱于以上8種精油。丁香、荊芥和姜黃3種精油的熏蒸活性較弱,甚至無(wú)活性。

    根據(jù)12種植物精油對(duì)花斑皮蠹的致死率,比較精油對(duì)試蟲(chóng)的熏蒸活性差異,篩選出高活性精油:大蒜、肉桂、小茴香和八角茴香,測(cè)定4種精油的LC50,結(jié)果見(jiàn)表5。

    表5 植物精油對(duì)花斑皮蠹的熏蒸活性

    大蒜的熏蒸活性最好,肉桂精油的熏蒸活性次之。

    3 討論

    植物精油來(lái)源于自然、成分多樣,具有高選擇性、低毒、多作用位點(diǎn)等優(yōu)勢(shì),可成為安全、有效、環(huán)保的新型倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)防治替代藥物,符合倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)綠色防治的要求,是倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)防治藥劑開(kāi)發(fā)的一大熱點(diǎn)。

    本研究選用的12種植物精油(除姜黃精油)對(duì)赤擬谷盜、花斑皮蠹均具有一定的熏蒸活性。不同植物精油對(duì)兩種倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)的敏感度不同,在同一濃度下,丁香、孜然和荊芥精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸致死率高于花斑皮蠹,桂皮、八角茴香和小茴香對(duì)花斑皮蠹的熏蒸致死率略高于赤擬谷盜,但差異不大,12種植物精油對(duì)兩種倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)的熏蒸活性基本保持一致。

    12種植物精油中,5種香辛料精油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸活性最好,從強(qiáng)到弱依次為:大蒜、花椒、小茴香、桂皮和八角,LC50分別為0.71、1.15、1.39、1.58、1.73 mg/L。與文獻(xiàn)中使用相同熏蒸活性測(cè)定方法的植物相比,本實(shí)驗(yàn)中5種香辛料精油對(duì)赤擬谷盜的活性較好,強(qiáng)于藍(lán)桉葉油(LC50為6.44 μL/L)[11]、側(cè)柏葉精油(LC50為39.25 mg/L)[12]、甘菊揮發(fā)油(LC50為14.40 mg/L)[13]、海芒果葉揮發(fā)油(LC50為2.02 mg/L)[14]、連翹揮發(fā)油(LC50為7.68mg/L)[15]、艷山姜葉揮發(fā)油(LC50為5.19 mg/L)[16]。陸馳宇等[17]研究了八角茴香油對(duì)赤擬谷盜的熏蒸活性,LC50值為9.64 μL/L,弱于本研究中八角茴香的熏蒸活性,這可能與二者產(chǎn)地不同、精油提取方法不同有關(guān)。

    4種精油對(duì)花斑皮蠹的熏蒸活性最好:大蒜、肉桂皮、小茴香和八角茴香,LC50分別為0.41、1.03、2.92、3.28 mg/L。關(guān)于花斑皮蠹的文獻(xiàn)研究較少,僑卿梅等[18]測(cè)定了肉桂、青蒿、生姜和蛇床子4種植物精油對(duì)花斑皮蠹的熏蒸活性,結(jié)果表明,肉桂精油和青蒿精油在40 μL/L劑量下對(duì)花斑皮蠹的成蟲(chóng)有較強(qiáng)的熏殺效果,熏蒸12 h后成蟲(chóng)死亡率即達(dá)100%,但并未測(cè)定肉桂精油的LC50,因此無(wú)法比較精油之間的活性差異。

    12種植物精油中,大蒜對(duì)兩種倉(cāng)儲(chǔ)害蟲(chóng)的熏蒸活性最強(qiáng),明顯強(qiáng)于其他活性植物。此外,大蒜精油對(duì)越冬型梨木虱[19]、谷蠹、赤擬谷盜(觸殺、胃毒作用)、書(shū)虱[20]、銹赤扁谷盜[21]、綠豆象[22]具有較好的殺蟲(chóng)、驅(qū)避、控制種群等活性,表示大蒜精油具有較好的生物活性,值得開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。大蒜的價(jià)格低廉,來(lái)源豐富,在我國(guó)種植面積廣泛,容易獲得,也可直接購(gòu)買(mǎi)大蒜油;大蒜本身又是一種保健食品,對(duì)人、畜無(wú)任何毒副作用。因此是一種理想可開(kāi)發(fā)的天然植物源農(nóng)藥。

    植物源農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用主要包括兩方面,一是直接應(yīng)用植物體或粗提物,如平常的生活儲(chǔ)藏中可以直接將大蒜搗碎,置于密閉空間防治害蟲(chóng),且由于大蒜具有廣譜抑菌作用,可病蟲(chóng)兼治。二是以精油中的關(guān)鍵化合物為模板合成新藥劑,據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道大蒜精油的關(guān)鍵活性成分為二烯丙基單硫醚、二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚[19, 20],關(guān)鍵活性成分可作為先導(dǎo)化合物,為合成新型倉(cāng)儲(chǔ)熏蒸劑提供化學(xué)結(jié)構(gòu)。

    4 結(jié)論

    8種植物精油(大蒜、肉桂、小茴香、八角茴香、花椒、孜然、香葉和青花椒)對(duì)赤擬谷盜成蟲(chóng)、花斑皮蠹成蟲(chóng)具有較好的熏蒸活性,其中大蒜油的活性最好。大蒜是人類(lèi)餐桌上必不可少的香辛料植物,具有抗癌、殺菌等作用,對(duì)人類(lèi)有較好的保健效果。因此,大蒜精油可作為安全、環(huán)保、高效的綠色植物源藥劑在倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)安全使用,既能防蟲(chóng)又能抑菌,且對(duì)人類(lèi)無(wú)毒。

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