新冠肺炎疫情下發(fā)熱患者檢測甲乙型流感病毒抗原的意義

楊皓云，趙清，謝慈嘉

(廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州)

0 引言

流行性感冒(流感)是由流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病,嚴(yán)重危害人民群眾健康。流感病毒屬于正粘病毒科,是單股,負(fù)鏈,分節(jié)段的RNA 病毒，根據(jù)病毒核蛋白和基質(zhì)蛋白,分為甲,乙,丙,丁(或 A,B,C,D)四型，目前感染人的主要是甲型流感病毒中的 H1N1,H3N2 亞型及乙型流感病毒中的Victoria和 Yamagata系。臨床癥狀主要為發(fā)熱,頭痛,肌痛和全身不適，體溫可達(dá) 39℃～40℃,可有畏寒,寒戰(zhàn),多伴全身肌肉關(guān)節(jié)酸痛,乏力,食欲減退等全身癥狀,常有咽喉痛,干咳,可有鼻塞, 流涕,胸骨后不適等[1]。

在體溫調(diào)節(jié)中樞的調(diào)控下，機體的產(chǎn)熱和散熱過程經(jīng)常保持動態(tài)平衡，當(dāng)機體在致熱源作用下或體溫中樞的功能障礙時，使產(chǎn)熱過程增加，而散熱不能相應(yīng)地隨之增加或散熱減少，體溫升高超過正常范圍，稱為發(fā)熱。可引起典型發(fā)熱的疾病超過200種，總結(jié)為四大類：感染性疾病、腫瘤性疾病、非感染性炎癥性疾病、其他疾病。其發(fā)熱病因會受患者所屬的地區(qū)、時期、年齡以及醫(yī)療資源的不同而造成構(gòu)成比例差異[2]。此外還有不明原因的發(fā)熱，診斷難度高，病情復(fù)雜[3]。

預(yù)防流感，查找發(fā)熱原因，就必須盡快鑒別診斷，然后進一步處理，從而防止流感或其它疾病的大范圍暴發(fā)。本文通過收集廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院2019年1月～2020年1月發(fā)熱就診并進行甲/乙型流感病毒抗原檢測的病例，分析本地流感感染狀況，探討其流行特性，為加強流感預(yù)防控制提供幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院2019年1月至2020年1月發(fā)熱就診并進行甲/乙型流感病毒抗原檢測的患者共1251例。其中男690例，女561例，年齡1-71歲。

1.2 檢測原理

診斷試劑為廣州萬孚生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的甲型/乙型流感病毒抗原檢測試劑（膠體金法）試劑盒，檢測標(biāo)本為患者咽喉分泌物拭子。該試劑盒利用免疫層析技術(shù)，采用雙抗體夾心法檢測甲型和乙型流感病毒抗原。檢測時，將處理后的待測樣品滴加于測試卡的加樣孔，當(dāng)待測樣本中含有甲型和（或）乙型流感病毒抗原且抗原濃度高于最低檢出限時，甲型和（或）乙型流感病毒先和標(biāo)記抗體形成反應(yīng)復(fù)合物，在層析作用下，反應(yīng)復(fù)合物沿著硝酸纖維膜向前移動，分別被硝酸纖維膜上檢測區(qū)（2）和（或）（1）區(qū)預(yù)先包被的甲型流感病毒核蛋白單克隆抗體和（或）乙型流感病毒核蛋白單克隆抗體捕獲，在檢測區(qū)（2）和（或）（1）區(qū)上最終形成一條紅色/粉色反應(yīng)線，此時結(jié)果為陽性；相反，當(dāng)樣本不含甲型和乙型流感病毒抗原或者抗原濃度低于最低檢出限時，則檢測區(qū)無紅色/粉色反應(yīng)線出現(xiàn)，此時結(jié)果為陰性。無論樣本是否含有甲型或乙型流感病毒抗原，質(zhì)控區(qū)（C）都會形成一條紅色/粉色反應(yīng)線。

1.3 結(jié)果判斷

甲流陽性：兩條紅色/粉色反應(yīng)線出現(xiàn)，一條在2區(qū)，一條在C區(qū)。乙流陽性：兩條紅色/粉色反應(yīng)線出現(xiàn)，一條在1區(qū)，一條在C區(qū)。甲乙流陽性：三條紅色/粉色反應(yīng)線出現(xiàn)，一條在2區(qū)，一條在1區(qū)，一條在C區(qū)。

無效測試：質(zhì)控區(qū)（C）無紅色/粉色反應(yīng)線出現(xiàn)，檢測無效，需用新測試卡重測。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 22 、WPS Excel軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.005為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 在1251份鼻咽拭子標(biāo)本中，共檢測甲流抗原陽性375例，陽性率29.98%，其中男性標(biāo)本690份，陽性標(biāo)本209例，陽性率30.29%；女性標(biāo)本561份，陽性標(biāo)本166例，陽性率29.59%,兩組差異無顯著性（P=0.788）。將收集的標(biāo)本按0～10歲、11～20歲、21～30歲、31～40、41～50歲 和＞51歲分成6個年齡組，其份數(shù)及陽性率見表1，組間存顯著性差異（P=0.000)，1～20歲陽性率最高。詳見表1。

表1 各年齡階段甲流陽性率比較

2.2 檢測乙流抗原陽性52例，陽性率4.16%，其中男性標(biāo)本690份，陽性標(biāo)本34例，陽性率4.93%%；女性標(biāo)本561份，陽性標(biāo)本18例，陽性率3.21%,兩組差異無顯著性（P=0.13）。將 收 集 的 標(biāo) 本 按0～10歲、11～20歲、21～30歲、31～40、41～50歲和＞51歲分成6個年齡組，其份數(shù)及陽性率見表2，組間存顯著性差異（P=0.001)，1～10歲陽性率最高。詳見表2。

2.3 甲流，乙流混合陽性2例,陽性率0.16%，陽性標(biāo)本量過少，無統(tǒng)計學(xué)意義。

3 討論

在近100年間，世界發(fā)生過多次流感病毒全球性感染，甚至大暴發(fā)。其中最嚴(yán)重的大流行為1918年于西班牙暴發(fā)起的H1NI型流感，共造成約5000萬人死亡。據(jù)WHO統(tǒng)計，全球每年大約有300～500萬流感病毒感染病例以及25～50萬的死亡病例[4]。

越來越多研究表明，熱帶地區(qū)尤其在亞洲，流感的季節(jié)性呈高度多樣化，既有季節(jié)性周期流行，也有全年循環(huán)[1]。2019年第49周，我國內(nèi)地南北方省份流感活動水平繼續(xù)呈升高趨勢，暴發(fā)疫情數(shù)明顯增多，我國部分省份已經(jīng)進入今年的冬季流行季，西南地區(qū)省份水平較高，處于中等流行水平[5]。廣州地區(qū)的春季以多雨、霧霾為主，濕暖回潮，室內(nèi)空氣流動差，況且城市人口密度大，在某些密閉的公共場所容易被人流感病毒經(jīng)飛沫途徑感染[6]。

既往有調(diào)查發(fā)現(xiàn)，甲型流感的高峰會出現(xiàn)在1月份，乙型流感的高峰即出現(xiàn)在3月份，乙型流感的峰值會滯后于甲型流感大約2個月，流感流行的季節(jié)以甲型流感病毒為主，病例數(shù)明顯多于乙型流感，流感流行季節(jié)后期即乙型流感病例逐漸增多，反而超過甲型流感病例數(shù)[7]，但在本次統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)中并未出現(xiàn)乙型流感病例多于甲的情況。

醫(yī)護人員憑借發(fā)病初始癥狀來對疾病做出初步診斷、分診，這對于在患者疾病本身的治療和控制疾病的傳播來說是尤為重要的。但發(fā)熱類疾病早期臨床癥狀不明顯或部分類同，所以快速診斷出流感引起的發(fā)熱即起到重要作用。目前，流感病毒實驗室檢測方法主要有流感病毒培養(yǎng)、流感病毒抗原檢測、流感病毒核酸檢測、病毒血清學(xué)檢測等，RT-PCR 是檢測流感病毒最有效的核酸檢測技術(shù),目前已取代病毒分離培養(yǎng)成為流感診斷的金標(biāo)準(zhǔn)[4]。但由于RT-PCR技術(shù)實驗設(shè)備成本高、實驗室條件要求高、技術(shù)人員培訓(xùn)周期長，檢測時間長，故不適合于大規(guī)模和社區(qū)醫(yī)院流感病例的快速篩查工作。

膠體金免疫層析法發(fā)展到現(xiàn)在已經(jīng)是一種常見的免疫學(xué)檢測技術(shù)，其核心是對流行性感冒病毒核心蛋白進行檢測，且有操作簡單、穩(wěn)定性好、檢測時間短、對操作人員的要求低等特點，且能在現(xiàn)場或床旁完成檢測[8]。以膠體金法進行流感抗原快速檢測，可在15分鐘內(nèi)獲得檢測結(jié)果，具有中度的敏感性（50%～70%）及高度特異性（90%），操作簡便，是常用的床旁快速檢測方法，可同時區(qū)分甲流和乙流感染[1]。

表2 各年齡階段乙流陽性率比較

既往對于發(fā)熱類疾病，通常依靠醫(yī)生的臨床經(jīng)驗或某些特異性不高的檢查結(jié)果進行診斷，容易出現(xiàn)誤診、漏診和濫用抗生素的情況。而應(yīng)用膠體金免疫層析法快速檢測甲/乙型流感抗原后，臨床醫(yī)生可依據(jù)檢測結(jié)果并結(jié)合臨床癥狀判斷患者感染流感病毒與否，從而及時進行科學(xué)合理對癥治療。

門診作為醫(yī)院的第一道屏障，對發(fā)熱患者的診斷及后續(xù)治療顯得格外重要，進行甲/乙型流感病毒抗原檢測，盡早診斷使感染者得到及時治療，對不明原因發(fā)熱的患者盡早進行進一步的檢查鑒別，比如病毒核酸檢測，以采取有效措施控制疾病的傳播蔓延。因此膠體金免疫層析法快速檢測甲/乙型流感病毒抗原在對流感的診斷、減少抗生素濫用、不明原因發(fā)熱的鑒別排查和流行病控制等方面具有十分重要的意義。