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    決明子炮炙前后對(duì)菊楂決明飲有效成分及瀉下作用的影響

    2023-11-07 04:42:44李筱玲鄧寒霜霍鴻飛張亦琳
    食品與藥品 2023年5期
    關(guān)鍵詞:瀉下決明子蒽醌

    李筱玲,鄧寒霜,霍鴻飛,張亦琳

    (1. 商洛學(xué)院 生物醫(yī)藥與食品工程學(xué)院,陜西 商洛 726000;2. 陜西秦嶺特色生物資源產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院,陜西 商洛 726000)

    菊楂決明飲為民間驗(yàn)方,具有平肝疏風(fēng)、活血化瘀、潤(rùn)腸通便、降血壓等功效,由菊花、生山楂片、決明子三味中藥組成,其制備方法為取菊花10 g,生山楂片、決明子各15 g,用水煎煮2次后,合并煎煮液即得?,F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn),菊楂決明飲對(duì)于高血壓和高血脂患者具有較好的療效,對(duì)陰虛陽(yáng)亢、大便秘結(jié)等癥更有效,有預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化(AS)和心腦血管病作用[1]。菊楂決明飲可藥食兩用,民間多作為茶飲,是用來(lái)治療心腦血管疾病常用的中醫(yī)食療方,長(zhǎng)期服用可降血壓、降血脂、減肥,特別適用于中老年人。處方中的決明子為豆科植物決明或小決明的干燥成熟種子,主要有效成分是蒽醌類和萘并吡喃酮類[2]。橙黃決明素是決明子中重要的蒽醌類成分,能明顯降低高血脂癥大鼠體內(nèi)的膽固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白膽固醇的含量[3],主要副作用為腸蠕動(dòng)增加、大便松軟、排便次數(shù)增加等[4]。本文擬通過(guò)探究生決明和不同炮制工藝炒決明對(duì)菊楂決明飲中有效成分溶出及其瀉下作用的影響情況,為臨床依據(jù)患者實(shí)際選用不同決明子炮制品制備菊楂決明飲提供幫助。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器

    TB-215D電子天平[丹佛儀器(北京)];TDL-40C離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(北京科技永興儀器公司);KH5200E超聲波清洗儀(昆山市科學(xué)儀器公司);LC-20A高效液相色譜儀[日本島津(中國(guó))]。

    1.2 試藥和動(dòng)物

    菊花(批號(hào):20180424)、山楂(批號(hào):20180607)、決明子(批號(hào):20180738)(國(guó)藥控股商洛大藥房);橙黃決明素對(duì)照品(批號(hào):B W B 5 0 1 7 9)、大黃酚對(duì)照品(批號(hào):BWB50252)(北京世紀(jì)奧科);復(fù)方地芬諾酯片(批號(hào):20191102,長(zhǎng)春長(zhǎng)江制藥);麻仁丸(批號(hào):200606,湖北諾得勝制藥)。SPF級(jí)昆明小鼠,體重20~30 g,共70只[西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,許可證:SCXK(陜)2008-001]。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 不同炮制規(guī)格決明子的制備

    生決明:取決明子凈制去雜,即得。

    炒決明:取9份生決明,每份約200 g,分3組。分別于160,180,210 ℃下炒制12 min,取出,放涼,即得。

    2.2 菊楂決明飲中有效成分含量測(cè)定

    2.2.1 色譜條件 色譜柱:Hypersil Gold十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6 mm×250 mm,5 μm);流動(dòng)相:乙腈(A)-0.1 %磷酸溶液(B),梯度洗脫(0~15 min,40 %A;15~30 min,40 %~90 %A;30~40 min,90 % A);檢測(cè)波長(zhǎng):284 nm。進(jìn)樣量:10 μl;流速:1.0 ml/min[5]。

    2.2.2 混合對(duì)照品溶液的制備 精密稱取大黃酚8.4 mg、橙黃決明素5.33 mg,用乙酸乙酯-無(wú)水乙醇(1:2)混合溶劑溶解、定溶至25 ml,精密量取上述溶液1 ml用相同溶劑定溶至10 ml,即得。

    2.2.3 供試品溶液制備 取菊花、山楂、決明子藥材適量,粉碎后過(guò)50目篩。分別精密稱取上述藥材粉末,菊花1.0 g 、山楂1.5 g、決明子1.5 g,置入具塞三角瓶中,精密加入80 %乙醇100 ml,塞密,稱定重量,于65 ℃超聲提取50 min,再次稱定重量,以80 %乙醇補(bǔ)足失重,過(guò)濾,取續(xù)濾液,即得。

    2.2.4 線性關(guān)系考察 分別精密吸取2.2.2項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液2,4,8,10,16,20 μl注入液相色譜儀,按2.2.1項(xiàng)下條件進(jìn)樣分析。以峰面積為縱坐標(biāo)(Y),以濃度(μg/ml)為橫坐標(biāo)(X),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程。得大黃酚標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:Y=1×106X+19387,R2=0.9991,表明大黃酚在濃度4.26~42.6 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。橙黃決明素的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:Y=7×106X+6170.7,R2=0.9999;表明橙黃決明素在濃度為6.72~67.2 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    2.2.5 含量測(cè)定及結(jié)果分析 按照2.2.3項(xiàng)下方法,分別用生決明、炒決明制備菊楂決明飲供試品溶液,照2.2.1項(xiàng)下條件進(jìn)樣分析,結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 不同處理菊楂決明飲中有效成分含量

    由表1可見(jiàn),炒決明中橙黃決明素及大黃酚含量明顯比生品高,其中180 ℃炒決明樣品的橙黃決明素含量最高,210 ℃炒決明的大黃酚含量最高。分析原因可能是決明子中所含蒽醌苷在炒制過(guò)程中受熱分解為苷元所致。

    2.3 決明子炮制規(guī)格對(duì)菊楂決明飲瀉下作用的影響

    2.3.1 受試藥物的制備

    2.3.1.1 稱取菊花10 g、山楂15 g、決明子(搗碎)15 g置入容器,加水煎煮3次。前兩次液料比為8:1,煎煮時(shí)間30 min;最后1次為液料比為6:1,煎煮時(shí)間20 min。過(guò)濾,合并3次濾液,減壓濃縮至含決明子原藥0.375 g/ml的藥液,即得菊楂決明飲藥液,冷藏備用。

    2.3.1.2 取復(fù)方地芬諾(每片含鹽酸地芬諾酯2.5 mg)研磨成粉后加水配制成混懸液。

    2.3.1.3 麻仁丸研磨粉碎加水制得所需濃度的混懸液。給藥前先將藥液配成含2 %墨汁的受試藥物。

    2.3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組給藥方案 取SPF級(jí)昆明小鼠70只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為7組,每組10只。第一組為復(fù)方地芬諾酯模型組(10 mg/kg灌胃);第2組為麻仁丸陽(yáng)性對(duì)照組(4 g/kg灌胃);第3~6組分別為生決明組、160 ℃炒決明組、180 ℃炒決明組、210 ℃炒決明組,給藥量為相當(dāng)于原藥7.5 g/kg;第7組為生理鹽水組,給藥與生決明組等量,苦味酸標(biāo)記。

    2.3.3 小鼠便秘模型的制備 各組小鼠禁食不禁水24 h后,除生理鹽水組給予生理鹽水(0.02 ml/g體重),其他各組灌胃10 mg/kg的復(fù)方地芬諾酯,計(jì)時(shí)30 min后建立便秘模型。模型組與生理鹽水組小鼠的首次排黑便時(shí)間和黑便數(shù)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,則說(shuō)明小鼠便秘模型建立成功[6]。

    2.3.4 瀉下排便實(shí)驗(yàn)方法 造模成功后,實(shí)驗(yàn)當(dāng)天小鼠禁食4 h,各給藥組分別灌胃含2 %墨汁的受試藥液,生理鹽水對(duì)照組和模型組灌胃含2 %墨汁的生理鹽水,給藥體積為0.2 ml/10g體重。灌胃后小鼠均單籠飼養(yǎng),并恢復(fù)正常飼料和飲水,然后觀察瀉下情況。連續(xù)記錄6 h內(nèi)每只小鼠開(kāi)始排出黑便的時(shí)間及6 h黑便總數(shù)量。比較生決明與炒決明子的菊楂決明飲對(duì)便秘型小鼠排便的影響差異性[7]。

    2.3.5 菊楂決明飲瀉下作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 觀察、記錄首次排黑便時(shí)間和黑便數(shù)至給藥6 h后。采用SPSS19.0(中文版)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和均值分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)(±s)表示,各組間比較采用t檢驗(yàn),P<0.05具有顯著統(tǒng)計(jì)意義,P<0.01表示差異具有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表2~4。

    表2 不同處理菊楂決明飲對(duì)小鼠排便的影響

    表3 不同處理組實(shí)驗(yàn)小鼠首次排黑便時(shí)間對(duì)照表

    表4 炮制前后不同組6 h黑便點(diǎn)數(shù)對(duì)照表

    由表2可見(jiàn),模型組首次排黑便時(shí)間最晚,6 h后黑便點(diǎn)數(shù)最少;麻仁丸組明顯比模型組的首次排黑便時(shí)間最早,6 h后黑便點(diǎn)數(shù)最多;由表3和表4可見(jiàn),模型組與生理鹽水對(duì)照組比較,黑便總點(diǎn)數(shù)和開(kāi)始排黑便時(shí)間有明顯差異(P<0.01),表明便秘模型建立成功。炒決明組與生決明組比較,首次排黑便時(shí)間明顯更晚、6 h黑便點(diǎn)數(shù)明顯更少(P<0.01),且炒制溫度越高,實(shí)驗(yàn)小鼠首次排便時(shí)間越晚、排便量越少,表明以炒制決明子制備菊楂決明飲,可顯著降低其瀉下作用。分析原因可能是炒制高溫時(shí),決明子中的瀉下成分蒽醌苷受熱分解,同時(shí)決明子中油脂也會(huì)部分破壞,造成瀉下作用減弱。

    3 結(jié)論與討論

    本文研究發(fā)現(xiàn),以炒決明子制備的菊楂決明飲中大黃酚、橙黃決明素含量較生決明有明顯增加,同時(shí)其瀉下的作用也得到明顯緩和,表明炒制有助于具有瀉下作用的蒽醌苷類成分分解為游離蒽醌,有助于降血壓、降血脂類有效成分的溶出。有鑒于此,臨床應(yīng)用菊楂決明飲時(shí),應(yīng)視患者辨證情況選用不同炮制規(guī)格的決明子組方。辨證論治是中醫(yī)獨(dú)有特色,中藥藥味不變時(shí),可通過(guò)中藥炮制來(lái)調(diào)整或者糾正藥物的偏性、緩和藥性[8-9]。決明子經(jīng)過(guò)炒制后瀉下作用緩和,用于菊楂決明飲中,使該方的瀉下作用相應(yīng)減弱。因此對(duì)于高血脂人群,脾虛便溏者,在服用菊楂決明飲時(shí)應(yīng)選用炒決明,以避免出現(xiàn)腹瀉等不良反應(yīng)。

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