液液萃取-高效液相色譜法測(cè)定飲用水源地中西維因

朱小亮，許亞南

(江蘇省宿遷環(huán)境監(jiān)測(cè)中心，江蘇 宿遷 223800)

西維因又名甲萘威，是一種廣泛應(yīng)用的氨基甲酸酯類(lèi)廣譜殺蟲(chóng)劑，性質(zhì)穩(wěn)定不易分解，對(duì)生物體具有高毒性，如肌肉顫動(dòng)、流淚、瞳孔縮小等乙酰膽堿酯酶抑制癥狀，甚至致癌性[1]。因此，必須對(duì)水環(huán)境中西維因進(jìn)行有效監(jiān)測(cè)。

隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，較多的檢測(cè)方法被報(bào)道。目前，主要檢測(cè)方法有氣相色譜法[2]、氣相色譜-質(zhì)譜法[3]、高效液相色譜法[4-5]、高效液相色譜-質(zhì)譜法[6-7]、超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[8-9]。但方法主要是采用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)或液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備要求較高，檢測(cè)成本昂貴。本研究建立了液液萃取-高效液相色譜測(cè)定飲用水源地中西維因的方法。水樣經(jīng)二氯甲烷萃取、氮吹濃縮后，用甲醇定容至2 mL直接測(cè)定，樣品前處理操作簡(jiǎn)捷、靈敏度高、方法穩(wěn)定。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 儀器與試劑

安捷倫1260液相色譜儀(配備二極管陣列檢測(cè)器DAD)、ZORBAX Eclipse XDB-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，美國(guó)安捷倫科技公司；RAPid VAP?樣品快速濃縮儀，美國(guó)LABCONCO；UPC-20UV康銘超純水機(jī)，北京康銘時(shí)代公司。

西維因標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度為100 μg/mL)，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所；無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉，分析純，國(guó)藥試劑；實(shí)驗(yàn)室用水為自制高純水。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

按照逐級(jí)稀釋的方式配制標(biāo)準(zhǔn)濃度點(diǎn)，先將西維因(100 μg/mL)標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋為濃度為20 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，充分搖均備用。將西維因標(biāo)準(zhǔn)使用液用甲醇稀釋為0、0.02、0.2、0.4、0.6、1.0、2.0 μg/mL七個(gè)濃度點(diǎn)，按照儀器優(yōu)化條件進(jìn)行測(cè)定。

1.3 前處理方法

準(zhǔn)確量取待測(cè)樣品100 mL置于250 mL分液漏斗中，向其中加入NaCl固體5 g，充分搖均后向樣品中加入二氯甲烷10 mL，把分液漏斗置于萃取振蕩儀上充分震蕩萃取5 min后，靜置，充分分層，有機(jī)相通過(guò)無(wú)水硫酸鈉除水后，接入濃縮瓶中；上層樣品再加入10 mL二氯甲烷以同樣方式再次萃取。最后萃取液通過(guò)氮吹濃縮儀濃縮至近干，用甲醇定容至2 mL，混勻，過(guò)0.45 μm濾膜后入2 mL的色譜瓶中，待測(cè)。

1.4 色譜條件

色譜柱為Eclipse XDB-C18反向柱(4.6 mm×200 mm，5 μm)；流動(dòng)相為甲醇∶水=55∶45(V/V)；流速為0.5 mL/min；柱溫為40 ℃；二極管陣列檢測(cè)器(DAD)波長(zhǎng)：220 nm；進(jìn)樣量：5.0 μL。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜特性

將濃度均為1.0 μg/mL西維因標(biāo)準(zhǔn)溶液，流動(dòng)相甲醇∶水=55∶45(V/V)，流速為0.5 mL/min，按照測(cè)試方法分析，色譜圖見(jiàn)圖1。由圖1可知，西維因在色譜圖上出現(xiàn)明顯峰，分離完全，無(wú)拖尾現(xiàn)象，基線(xiàn)平穩(wěn)，可用于西維因的定量分析。

圖1 西維因色譜圖

2.2 分析波長(zhǎng)的選擇

圖2 西維因紫外波長(zhǎng)掃描圖

使用二極管陣列檢測(cè)器(DAD)對(duì)濃度為1.0 μg/mL西維因標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行全波段(190～400 nm)掃描，以選擇最佳檢測(cè)波長(zhǎng)，掃描譜圖見(jiàn)圖2。由圖2知，西維因在220 nm與280 nm處有兩個(gè)吸收峰，其中在220 nm處的吸收強(qiáng)度較強(qiáng)，故選擇220 nm作為同時(shí)測(cè)定西維因最佳吸收波長(zhǎng)。

2.3 流動(dòng)相及流速選擇

本實(shí)驗(yàn)以甲醇-水(55∶45，V/V)作為流動(dòng)相進(jìn)行分離效果試驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)此流動(dòng)相體系能對(duì)西維因進(jìn)行分離，同時(shí)甲醇具有柱壓低，分離快，峰對(duì)稱(chēng)尖銳，故本實(shí)驗(yàn)選擇甲醇-水為流動(dòng)相。在西維因濃度均為1.0 μg/mL，在甲醇-水=55∶45(V/V)流動(dòng)相下，對(duì)0.5 mL/min、0.8 mL/min、1.0 mL/min三種流動(dòng)相流速進(jìn)行分離效果試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隨著流速增加，峰形變寬，不利于定量分析，故本實(shí)驗(yàn)選擇流動(dòng)相流速為0.5 mL/min。

2.4 線(xiàn)性關(guān)系及檢出限

在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，按照逐級(jí)稀釋的方式，分別配制濃度為0、0.02、0.2、0.4、0.6、1.0、2.0 μg/mL的西維因標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照檢測(cè)方法通過(guò)高效液相色譜進(jìn)行測(cè)定，色譜圖見(jiàn)圖3。表明：在0～2.0 μg/mL范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好線(xiàn)性相關(guān)性，西維因曲線(xiàn)方程為y=376.4x+3.956，相關(guān)系數(shù)r=0.9999；對(duì)濃度為0.02 μg/mL西維因連續(xù)測(cè)定7次，取測(cè)定值標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍作為方法檢出限，西維因檢出限為0.05 μg/L。

圖3 不同濃度下西維因色譜圖和線(xiàn)性方程

2.5 精密度和準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

配制0.2 μg/mL的西維因標(biāo)準(zhǔn)溶液，在最佳的實(shí)驗(yàn)條件下，考察方法的準(zhǔn)確度及回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。從表中知，該方法相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.0%～4.2%，平均值為3.4%，回收率為89.9%～103.2%，平均回收率為98.2%。實(shí)驗(yàn)表明該法準(zhǔn)確度及準(zhǔn)確度較高，可用于飲用水源地中西維因測(cè)定。

表1 精密度及回收率實(shí)驗(yàn)

2.6 樣品測(cè)定

在最佳檢測(cè)條件下，采集宿遷駱馬湖飲用水源地3個(gè)水樣，按照檢測(cè)方法進(jìn)行萃取、濃縮、定容后進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)飲用水源地3個(gè)水樣均未檢出西維因。

3 結(jié) 論

通過(guò)優(yōu)化色譜工作條件，建立了液液萃取-高效液相色譜測(cè)定西維因的方法。在0～2.0 μg/mL范圍內(nèi)，呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性關(guān)系，西維因曲線(xiàn)方程為y=367.4x+3.956，相關(guān)系數(shù)r=0.9999，檢出限分為0.05 μg/L。該方法穩(wěn)定性好，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，滿(mǎn)足于飲用水源地水中西維因的測(cè)定。