某市生豬口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征免疫程序研究與推廣

駱永泉 鄧曉霞 黃詩(shī)惠

摘 要：本文主要探討HP-PRRS減毒活疫苗（TJM-F92株）、高效CSF活疫苗（耐熱保護(hù)劑、細(xì)胞苗）、FMDO型滅活疫苗（O/MYA98/BY/2010株）免疫優(yōu)化方案。通過(guò)采用現(xiàn)代分子免疫學(xué)技術(shù)對(duì)豬FMD、CSF和HP-PRRS免疫程序進(jìn)行研究，為豬FMD、CSF和HP-PRRS預(yù)防控制定出一套有效的免疫程序并進(jìn)行推廣，為某市防控豬FMD、CSF和HP-PRRS提出理論依據(jù)和技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：某市生豬;疫病免疫程序;推廣

一、試驗(yàn)與結(jié)論

（一）材料與方法

1.疫苗?？谔阋逴型滅活疫苗（O/MYA98/BY/2010株）、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-F92株）疫苗來(lái)源于政府采購(gòu)疫苗，廠家為山西隆克爾生物制藥有限公司、豬瘟高效CSF活疫苗（耐熱保護(hù)劑、細(xì)胞苗）。

2.試驗(yàn)動(dòng)物。全部選自文庭養(yǎng)豬場(chǎng)，確保同一試驗(yàn)組的仔豬為同一日齡，健康未免疫。每個(gè)試驗(yàn)組5頭仔豬，對(duì)照組為10頭仔豬，共35頭仔豬。

3.試驗(yàn)區(qū)域某豬場(chǎng)，周邊無(wú)其他豬場(chǎng)。試驗(yàn)仔豬按分組相互隔離。試驗(yàn)場(chǎng)地封閉管理，無(wú)閑雜人等進(jìn)出，由專人負(fù)責(zé)投喂相同飼料，采用相同消毒方式進(jìn)行定期消毒。

4.檢測(cè)試劑?？谔阋逴型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，試劑采購(gòu)于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

5.試驗(yàn)分組。（1）試驗(yàn)1組：于20日齡時(shí)采血，于21日免疫豬瘟苗，于28日齡時(shí)免疫藍(lán)耳苗，于42日齡時(shí)免疫口蹄疫苗并采血，于56日齡時(shí)免疫豬瘟苗并采血，于70日齡時(shí)免疫口蹄疫苗，于92日齡時(shí)采血。（2）試驗(yàn)2組：于14日齡時(shí)采血，于28日齡時(shí)免疫藍(lán)耳苗和豬瘟苗，于42日齡時(shí)免疫口蹄疫苗并采血，于56日齡時(shí)免疫豬瘟苗并采血，于70日齡時(shí)免疫口蹄疫苗，于92日齡時(shí)采血。（3）試驗(yàn)3組：于14日齡時(shí)采血，于28日齡時(shí)免疫藍(lán)耳苗和豬瘟苗，于42日齡時(shí)免疫口蹄疫苗并采血，于56日齡時(shí)免疫藍(lán)耳苗和豬瘟苗并采血，于70日齡時(shí)免疫口蹄疫苗，于92日齡時(shí)采血。（4）試驗(yàn)4組：于14日齡時(shí)采血，于28日齡時(shí)免疫藍(lán)耳苗、豬瘟苗、口蹄疫苗，于42日齡時(shí)免疫口蹄疫苗并采血，于56日齡時(shí)免疫藍(lán)耳苗和豬瘟苗并采血，于70日齡時(shí)免疫口蹄疫苗，于92日齡時(shí)采血。（5）試驗(yàn)5組：于28日齡時(shí)采血，次日免疫藍(lán)耳苗、豬瘟苗、口蹄疫苗，于56日齡時(shí)采血，于70日齡時(shí)免疫藍(lán)耳苗、豬瘟苗、口蹄疫苗并采血，于92日齡時(shí)采血。（6）對(duì)照組：不免疫口蹄疫、豬瘟、藍(lán)耳疫苗。

6.檢測(cè)方法。依據(jù)GB/T18935-2003口蹄疫診斷技術(shù)中的液相阻斷—酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（LpB-ELISA）。具體操作步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

依據(jù)GB/T18090-2008豬繁殖與呼吸綜合診斷方法中的液相阻斷—酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（LpB-ELISA）。具體操作步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

7.儀器。酶標(biāo)儀型號(hào)為帝肯SUNRISE。

8.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析?？谔阋呖贵w以10為底的對(duì)數(shù)進(jìn)行分析比較

（二）結(jié)果與分析

1.免疫程序。

2.不同免疫程序的口蹄疫抗體比較。

從圖1可以看出，試驗(yàn)1、2、3組分別在42日齡注射口蹄疫滅活疫苗后，試驗(yàn)1組抗體水平持續(xù)升高，而試驗(yàn)2、3組抗體水平在短時(shí)間內(nèi)有所下降。試驗(yàn)1、2、3組在70日齡時(shí)進(jìn)行二免后抗體水平都有所升高。試驗(yàn)4、5組在28日齡時(shí)同時(shí)分點(diǎn)注射口蹄疫滅活疫苗、藍(lán)耳活疫苗、豬瘟活疫苗后，抗體水平有所下降，在70日齡進(jìn)行二免后抗體水平緩慢升高。5個(gè)試驗(yàn)組在二免以后抗體水平基本能保持在較高水平上。

3.不同免疫程序的豬瘟抗體比較。

從圖2可以看出，試驗(yàn)1組在21日齡一免后一個(gè)月才產(chǎn)生少量抗體，在56日齡二免后一個(gè)月才得到100%抗體陽(yáng)性率。試驗(yàn)2組在28日齡一免后一個(gè)月達(dá)到100%抗體陽(yáng)性率，在56日齡二免后一個(gè)月抗體陽(yáng)性率為0。試驗(yàn)3組僅在42日齡時(shí)獲得了80%的抗體陽(yáng)性率，之后抗體陽(yáng)性率均為0。試驗(yàn)4組在二免后的抗體陽(yáng)性率不及一免后一個(gè)月時(shí)的高。試驗(yàn)5組在28日齡時(shí)同時(shí)分點(diǎn)注射口蹄疫滅活疫苗、藍(lán)耳活疫苗、豬瘟活疫苗后，抗體陽(yáng)性率有所下降，在一個(gè)月后有所上升，在70日齡二免后保持100%抗體陽(yáng)性率。

4.不同免疫程序的豬繁殖與呼吸綜合征抗體比較。

從圖3可以看出，試驗(yàn)1、2、3、4組在首次采血時(shí)均有母源抗體。試驗(yàn)1組在28日齡免疫藍(lán)耳苗后，抗體陽(yáng)性率逐漸升高。試驗(yàn)2、3、4組在28日齡同時(shí)分點(diǎn)注射藍(lán)耳苗和豬瘟苗兩周后，抗體陽(yáng)性率就達(dá)到了100%（之后兩組有無(wú)二免藍(lán)耳都對(duì)抗體陽(yáng)性率無(wú)影響）。試驗(yàn)4組在28日齡時(shí)，同時(shí)分點(diǎn)注射口蹄疫、藍(lán)耳和豬瘟三種疫苗后直到56日齡時(shí)，才產(chǎn)生了抗體。而試驗(yàn)5組采取同種方式注射三種疫苗后，在42日齡時(shí)就有了80%抗體陽(yáng)性率，56日齡達(dá)到了100%抗體陽(yáng)性率。

（三）討論

對(duì)比幾種免疫程序，可以看出，試驗(yàn)1組采用的單點(diǎn)單次注射疫苗，三種疫苗抗體產(chǎn)生良好，口蹄疫抗體水平持續(xù)走高，豬瘟、藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率較高。試驗(yàn)2組免疫兩次豬瘟后最終豬瘟抗體反而為0，藍(lán)耳只免疫一次，抗體水平良好，口蹄疫抗體經(jīng)歷了降低到升高的過(guò)程。試驗(yàn)3組與2組類似，免疫兩次豬瘟后最終豬瘟抗體反而為0，藍(lán)耳免疫了兩次，抗體水平良好，口蹄疫抗體經(jīng)歷了降低到升高的過(guò)程。試驗(yàn)4組同時(shí)首免三種疫苗，豬瘟在42日齡時(shí)有較高的抗體陽(yáng)性率，單獨(dú)補(bǔ)免豬瘟后，豬瘟抗體有所上高。口蹄疫與2、3組類似，都在緩慢降低后又升高。藍(lán)耳只免疫了一次，在56日齡時(shí)才得到了抗體陽(yáng)性率。試驗(yàn)5組是兩次三種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射，口蹄疫水平相比其他組稍微高一些，也有短期的下降。豬瘟和藍(lán)耳在56日齡后抗體陽(yáng)性率保持在100%。

二、推廣與效果

（一）免疫推廣

在全市范圍內(nèi)推廣使用試驗(yàn)3組、4組和5組的免疫程序，搜集2014年-2016年間的檢測(cè)數(shù)據(jù)，并對(duì)其效果進(jìn)行比較。由表2可以看出，在實(shí)際推廣中，口蹄疫單獨(dú)免疫和口蹄疫與藍(lán)耳、豬瘟一起免疫沒(méi)顯著差異。而口蹄疫、豬瘟和藍(lán)耳同時(shí)免疫，對(duì)藍(lán)耳效果無(wú)影響。幾種方法中，口蹄疫抗體效果無(wú)影響，藍(lán)耳效果無(wú)影響。

（二）流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

從2016年和2013年的生豬疫病流行病學(xué)調(diào)查情況看，賀州市生豬疫病的發(fā)病率、病死率以及生豬的死亡率都有極大地降低，2016年與2013年比賀州市生豬發(fā)病率下降了5.13個(gè)百分點(diǎn)，生豬死亡率下降了6.96個(gè)百分點(diǎn)，生豬死亡率年平均下降2.32個(gè)百分點(diǎn)。

（三）推廣應(yīng)用前景

從2016年和2013年的生豬疫病流行病學(xué)調(diào)查情況看，賀州市生豬疫病的發(fā)病率、病死率以及生豬的死亡率都有極大地降低，2016年與2013年比賀州市生豬發(fā)病率下降了5.13個(gè)百分點(diǎn)，生豬死亡率下降了6.96個(gè)百分點(diǎn)，生豬死亡率年平均下降2.32個(gè)百分點(diǎn)。豬口蹄疫、豬瘟、豬高致病性藍(lán)耳病等重大動(dòng)物疫病的強(qiáng)制免疫技術(shù)的推廣，保障了賀州市生豬健康穩(wěn)定的發(fā)展，確保了生豬養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益的提高。通過(guò)該項(xiàng)目的實(shí)施，將全面提高賀州市豬FMD、CSF和HP-PRRS防控等重大疫病預(yù)防、控制水平。