野生獼猴桃雜交后代雄性優(yōu)株花粉質(zhì)量鑒定

張琛，郗篤雋，劉輝，黃康康，裴嘉博，駱慧楓

(杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院園藝研究所，浙江杭州 310024)

獼猴桃是雌雄異株果樹，在生產(chǎn)中需配置適宜的授粉樹?；ǚ壑备行?yīng)是指授粉后花粉對(duì)其受精所形成的果實(shí)或種子產(chǎn)生的影響[1]。研究表明，雄株的倍性[2-4]、授粉方式等[5,6]對(duì)果實(shí)坐果率、大小、果皮與果肉顏色、產(chǎn)量等多方面均表現(xiàn)出不同程度的影響，因此優(yōu)良適配雄株的選擇具有重要意義。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)獼猴桃的研究大多集中于雌株品種的選育，對(duì)雄株的選育研究較少。新西蘭20世紀(jì)50年代選育出海沃德等5個(gè)雌性品種適配的雄性品種[7]，中國(guó)科學(xué)院武漢植物園選育出磨山4號(hào)等雄性品種[8]。

目前生產(chǎn)上所用的雄株品種單一，常采用一種雄株點(diǎn)授所有品種的雌株，花粉直感效應(yīng)對(duì)雌性品種的影響被忽略，出現(xiàn)果實(shí)品質(zhì)不高、減產(chǎn)等現(xiàn)象。筆者前期從野生獼猴桃資源中初步選出花期合適、花徑較大的雄株8株，本研究對(duì)其花粉量、花粉活力、花粉萌發(fā)率等指標(biāo)進(jìn)行了測(cè)定，為選出適配性高、性狀優(yōu)良的雄株奠定資源基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

2015年，采集浙江省杭州地區(qū)野生獼猴桃果實(shí)，將其種子播種，獲得野生獼猴桃實(shí)生后代雄株若干份，栽植于杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院基地，現(xiàn)已達(dá)開花樹齡。根據(jù)雄株的花期、花徑、雄蕊數(shù)等參數(shù)初步選出8株雄株優(yōu)株，分別編號(hào)為Y7、Y18、Y30、Y35、Y37、Y43、Y55、Y58。

1.2 試驗(yàn)方法

花期采集各雄株的鈴鐺花，用鑷子剝?nèi)』ㄋ幱诹蛩峒埳?，陰干后裝入玻璃小瓶中，于4℃條件貯存待測(cè)。

花粉量測(cè)定，參照沈根華等[9]方法并略有改動(dòng)，取飽滿且未開裂花藥50粒于離心管中，置于25℃環(huán)境中直至花粉完全散出。加入200g/L六偏磷酸鈉溶液2mL，用漩渦振蕩器制成懸浮液。取懸浮液400μL，加入200g/L六偏磷酸鈉溶液1.6mL，搖勻定容于2mL離心管中。取5μL于載玻片上，倒置生物顯微鏡下觀察，統(tǒng)計(jì)花粉粒數(shù)。重復(fù)3次。每枚花藥的花粉量(花粉粒/花藥)= 每個(gè)載玻片上總花粉粒數(shù)×40。

花粉活力測(cè)定，采用TTC法并稍加改進(jìn)，取少量花粉混勻于0.5%TTC 500μL溶液中，置于35℃恒溫箱中(避光)，染色(染成紅色為有活力)24小時(shí)，吸取少量在顯微鏡下觀察。統(tǒng)計(jì)3個(gè)視野?；ǚ刍盍?%)=著色花粉數(shù)/觀察花粉數(shù)×100。

花粉萌發(fā)率測(cè)定，參照姜雪婷等[10]方法并有所改動(dòng)，使用離心管培養(yǎng)法。培養(yǎng)液成分為蒸餾水+20%蔗糖+0.1%硼酸，pH=6.5。將適量花粉混入培養(yǎng)液中振蕩，25℃培養(yǎng)12小時(shí)。光學(xué)顯微鏡下觀察并統(tǒng)計(jì)花粉萌發(fā)情況。萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)為花粉管長(zhǎng)度大于花粉粒直徑。每個(gè)雄株重復(fù)3次。萌發(fā)率(%)=已萌發(fā)花粉數(shù)/花粉總數(shù)×100。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel和DPS14.5軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用單因素方差分析和LSD法檢測(cè)不同處理間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

8個(gè)野生獼猴桃雄株優(yōu)株中，Y35的花粉量最大，單個(gè)花藥所含花粉量6200粒，顯著高于其他雄株花粉量。Y7、Y18、Y30、Y43的花粉量均在2000粒以上，差異不顯著。Y37、Y55、Y58的單個(gè)花藥所含花粉量低于2000粒，其中Y37最少，為1746.67粒(表1)。

花粉活力，Y7的最高，達(dá)94.60%，顯著高于其他7株(圖1)。Y18、Y58、Y35(圖2)、Y43、Y55、Y37、Y30的活力依次遞減，均未超過25%，Y30花粉活力最低，僅為2.22%(表1)。

表1 幾種野生獼猴桃雄株花粉質(zhì)量測(cè)定

花粉萌發(fā)率，Y7的最高，為76.67%，顯著高于其余7株(圖3)。Y35的次之，為29%，其余雄株的較低，均未超過20%(圖4)。Y30花粉萌發(fā)率最低，僅為0.67%(表1)。8株雄株優(yōu)株中，以Y7的花粉活力與萌發(fā)率高。

3 小結(jié)與討論

獼猴桃生產(chǎn)上對(duì)雄株的選擇大多僅參照與雌株品種花期的適配程度。近年來，因氣候等不確定因素常常發(fā)生花期不遇現(xiàn)象，人工授粉是補(bǔ)足授粉的常見方法。在人工授粉過程中，由雄株花粉質(zhì)量所引起的花粉直感效應(yīng)所帶來的問題表現(xiàn)日益突出。研究表明，雄株品種的選擇對(duì)果實(shí)產(chǎn)量、質(zhì)量有一定的影響，花粉量與產(chǎn)量之間存在顯著的相關(guān)性[11]。近年來，雄株的育種工作被關(guān)注與重視。國(guó)內(nèi)對(duì)雄性品種的選育標(biāo)準(zhǔn)集中體現(xiàn)在花期適配程度、花徑和花粉量大小、花粉萌發(fā)率、花粉親和力等方面。

本試驗(yàn)對(duì)前期從野生獼猴桃資源中初步選出的部分與紅陽獼猴桃花期合適、花徑較大的雄性優(yōu)株8株進(jìn)行花粉指標(biāo)測(cè)定表明，Y35雄株的花粉量大但花粉活力與萌發(fā)率較低。其他雄株花粉量一般，且花粉萌發(fā)率低。在實(shí)際生產(chǎn)過程中，花粉萌發(fā)率低于30%的品種一般不作為授粉品種[9]。Y7雄株的花粉量適中且花粉活力與萌發(fā)率較高，值得關(guān)注。下一步可對(duì)其花粉親和力、授粉后結(jié)實(shí)率、果實(shí)品質(zhì)等方面進(jìn)行研究，以篩選出性狀優(yōu)良、可實(shí)際投入生產(chǎn)應(yīng)用的雄株品種。