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    “用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)的流動”實驗的分析和拓展

    2020-07-26 08:56:10羅福海張文娟徐亞茹
    生物學(xué)通報 2020年9期
    關(guān)鍵詞:黑藻細(xì)胞質(zhì)葉綠體

    羅福海 張文娟 程 虹 趙 浩 徐亞茹

    (高臺縣第一中學(xué) 甘肅高臺 734300)

    “用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)的流動”是人教版高中生物學(xué)必修1 新教材中的重要實驗之一。此實驗在人教版2004年版生物學(xué)教材中是沒有的,此前教材中實驗為“用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體”,新加入的實驗對學(xué)生科學(xué)素養(yǎng)的培養(yǎng)具有重要作用。通過實驗觀察讓學(xué)生意識到細(xì)胞質(zhì)的流動是一種生命現(xiàn)象;通過觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動,提高學(xué)生科學(xué)探究的實踐能力。

    細(xì)胞質(zhì)是細(xì)胞代謝的主要部位,細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)并不是靜止的,而是持續(xù)地在細(xì)胞內(nèi)順著環(huán)形路線流動,這是觀察細(xì)胞質(zhì)流動實驗的理論基礎(chǔ)。葉綠體是植物光合作用的重要細(xì)胞器,由于其存在于細(xì)胞質(zhì)中,因此,觀察細(xì)胞質(zhì)流動的同時還可觀察到葉綠體[1]。盡管實驗易于操作,但在教學(xué)及實際實驗過程,學(xué)生還存在很多疑惑,筆者結(jié)合實驗情況對本實驗進行了一定的分析和拓展,以期為學(xué)生的學(xué)習(xí)和教師的教學(xué)提供參考。

    1 實驗?zāi)康囊螅?]

    觀察葉綠體的形態(tài)、數(shù)量和分布特點;觀察細(xì)胞質(zhì)的流動情況。

    2 實驗材料器具[1]

    新鮮的黑藻(或蘚類的小葉),顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、培養(yǎng)皿、臺燈等。

    3 實驗流程[1]

    1)將黑藻置于25℃左右的水中,以較強的光線照射30 min 以上。

    2)向載玻片中央滴一滴清水,用鑷子取一片幼嫩的黑藻葉片,放在清水中展平,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片。在實驗過程中,臨時裝片要始終保持有水狀態(tài)。

    3)先在低倍鏡下找到細(xì)胞,然后用高倍鏡觀察葉綠體的形態(tài)、數(shù)量和分布特點。

    4)以葉綠體作為標(biāo)志物,觀察細(xì)胞質(zhì)流動的速度和方向。

    4 實驗分析

    1)葉綠體的形態(tài)和分布是怎樣的? 高倍顯微鏡下觀察到的葉綠體為綠色、橢球形或球形,沿黑藻細(xì)胞邊緣分布,如圖1所示,綠色植物的葉綠體無需染色即可觀察到。

    圖1 顯微鏡下葉綠體的形態(tài)及分布[1]

    2)選用黑藻的幼嫩葉片作為觀察材料有什么好處? 黑藻葉片薄,細(xì)胞內(nèi)葉綠體多且體積大。在細(xì)胞質(zhì)流動過程中,伴隨著葉綠體的運動,因此,很容易在顯微鏡下被觀察到。

    3)觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)的流動2 個實驗是否沖突?活細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷流動的狀態(tài)。細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)是無色透明的,不容易直接觀察其是否流動。葉綠體是綠色植物葉肉細(xì)胞中的一種常見結(jié)構(gòu),呈綠色,散布于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。選擇葉綠體作為標(biāo)志物,可觀察植物細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)的流動。因此,2 個實驗是相輔相成的,如果合理地選擇了實驗材料,則可將2 個實驗結(jié)合起來同時完成[2]。

    4)是否大多數(shù)植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)不流動,只有黑藻等少數(shù)植物的細(xì)胞質(zhì)才流動? 細(xì)胞質(zhì)流動又稱胞質(zhì)運動,是指在活細(xì)胞中,細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)處于不斷的運動狀態(tài),能帶動其中的細(xì)胞器在細(xì)胞內(nèi)作有規(guī)則的持續(xù)的流動。因此,只要是活細(xì)胞都有細(xì)胞質(zhì)流動的現(xiàn)象,例如,植物的根尖等,只是由于黑藻等植物材料便于觀察。

    5)在強光照射下,葉綠體的向光面有何變化?葉綠體的形態(tài)和分布有利于接受光照,進行光合作用。呈橢球形的葉綠體大多在不同光照條件下會改變方向。在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源;在強光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源。這使得葉綠體在弱光下能接受較多的光照,在強光下能避免葉綠體被灼傷。同時,植物在光照強度不斷減弱的情況下,會通過增加葉綠素含量以增加對光的吸收,從而增強對弱光的適應(yīng)性。

    6)若視野中某細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)的流動方向為順時針,則在裝片中該細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)的實際流動方向是怎樣的?答案是仍為順時針。根據(jù)顯微鏡的成像原理可判斷實際物與視野中像呈水平旋轉(zhuǎn)180°結(jié)果,故視野中觀察到為順時針,則在裝片中實際流動方向仍為順時針。

    7)細(xì)胞質(zhì)的流動有什么意義? 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的流動,促進了細(xì)胞與周圍環(huán)境及細(xì)胞內(nèi)部各部分之間的物質(zhì)交換和信息傳遞,有利于細(xì)胞內(nèi)代謝反應(yīng)有條不紊地進行。

    5 實驗拓展

    1)除黑藻葉細(xì)胞外,還有哪些植物材料適合觀察細(xì)胞質(zhì)流動? 通過反復(fù)實驗并且進行對比后發(fā)現(xiàn),用新鮮濃綠的大白菜、菠菜等幼苗嫩葉作為材料,實驗也可取得較好的效果,且這些材料具有取材容易的特點。在取用菠菜葉進行實驗時,由于表皮細(xì)胞除保衛(wèi)細(xì)胞外,一般不含葉綠體,而葉肉細(xì)胞含較多的葉綠體,故要取略帶些葉肉的下表皮[3]。

    2)動物細(xì)胞是否有細(xì)胞質(zhì)流動? 若有如何觀察? 依據(jù)之前分析,只要是活細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)都應(yīng)是流動的。對人口腔上皮細(xì)胞進行實驗,觀察發(fā)現(xiàn)確實存在細(xì)胞質(zhì)的流動,說明動物細(xì)胞也存在細(xì)胞質(zhì)流動,細(xì)胞質(zhì)流動不是綠色植物細(xì)胞特有的。用人口腔上皮細(xì)胞進行實驗觀察時需要用線粒體(健那綠染色)做細(xì)胞質(zhì)流動的標(biāo)志。葉綠體不是觀察細(xì)胞質(zhì)流動的唯一標(biāo)志。

    3)同一葉片中所有細(xì)胞中的葉綠體的運動方向都為順向?還是都為逆向?還是既有順向又有逆向?通過觀察發(fā)現(xiàn),相鄰3 個細(xì)胞的葉綠體運動方向具有不同形式:都是逆向、都是順向、2 個逆向1 順向、或2 個順向1 個逆向(圖2)。

    圖2 葉綠體的運動方向

    3)在做實驗過程中,有的葉正面朝上,有的葉背面朝上,針對黑藻同一個葉片的同一個細(xì)胞,其葉綠體的運動方向?qū)⑷绾危拷Y(jié)果表明,如果正放是逆向運動,反放則是順向運動(圖3),直至細(xì)胞逐漸死亡,胞質(zhì)運動停止,反之亦然。

    圖3 不同放置黑藻同一細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)流動

    4)哪些因素可能影響細(xì)胞質(zhì)流動的速度和方向?如何設(shè)計實驗進行驗證?細(xì)胞質(zhì)流動速率可作為植物細(xì)胞活性狀態(tài)的一種特征性參數(shù),凡能影響細(xì)胞活性的因素,均可影響細(xì)胞質(zhì)流動[4]。溫度、光照強度、pH 值、生長素環(huán)境脅迫等均會影響細(xì)胞質(zhì)流動。故本實驗設(shè)置容易獲取、易于操作的溫度、光照強度、能量的改變3 個方面進行實驗。

    ①溫度??赏ㄟ^水浴加熱或直接加熱的方式進行不同溫度處理。實驗設(shè)計如表1,分別在對應(yīng)溫度下處理10 min 后,按實驗流程進行觀察。由于本實驗無需嚴(yán)格定量觀察,因此為比較實驗結(jié)果,可讓多組同時進行操作,觀察不同處理下的黑藻葉片。通過觀察發(fā)現(xiàn),第3 組細(xì)胞質(zhì)流動的速度最快,但運動方向不受影響,與放置有關(guān)。實驗結(jié)果表明,溫度會影響細(xì)胞質(zhì)流動的速度,隨著溫度升高,細(xì)胞質(zhì)流動的速度加快,但溫度超過一定的范圍后,細(xì)胞質(zhì)流動的速度又會減慢,推測原因是細(xì)胞質(zhì)流動的動力來源于呼吸作用,而溫度過低和過高都會抑制呼吸作用有關(guān)酶的活性,從而影響能量供應(yīng)。

    表1 溫度對細(xì)胞質(zhì)流動的影響

    ②光照強度??赏ㄟ^不同功率的燈泡進行不同光照強度的處理。與設(shè)計具體的光照強度進行實驗相比,本實驗簡單、易操作,可行性強,且能達(dá)到預(yù)期實驗效果,具有一定的優(yōu)點。具體實驗設(shè)計如表2,分別在對應(yīng)燈泡下處理10 min 后,按實驗流程進行觀察。本探究實驗也可讓多組同時進行操作,觀察不同處理下的黑藻葉片。通過觀察發(fā)現(xiàn),第3 組黑藻細(xì)胞質(zhì)流動的速度最快,但方向不受影響,與放置有關(guān)。實驗結(jié)果表明,光照強度會影響細(xì)胞質(zhì)流動的速度,一定范圍內(nèi)隨著光照強度的增加,細(xì)胞質(zhì)流動的速度加快,光照強度過高會抑制細(xì)胞質(zhì)流動的速度。

    表2 光照強度對細(xì)胞質(zhì)流動的影響

    ③能量。由于細(xì)胞質(zhì)流動需要消耗細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的ATP,可通過添加適宜濃度葡萄糖溶液供應(yīng)細(xì)胞呼吸產(chǎn)生ATP,或通過2% H2O2溶液抑制細(xì)胞呼吸的方法進行對照實驗[5],故設(shè)置清水組、0.5%葡萄糖溶液組及2% H2O2溶液組進行處理。實驗設(shè)計如表3,分別在對應(yīng)等量溶液下處理10 min 后,按實驗流程進行觀察。通過觀察發(fā)現(xiàn),第2 組黑藻細(xì)胞質(zhì)流動的速度最快,但方向不受影響。實驗結(jié)果表明,一定濃度的葡萄糖供應(yīng)可促進細(xì)胞質(zhì)流動的速度,而2% H2O2溶液處理的黑藻細(xì)胞葉綠體顏色和運動速度都會發(fā)生變化,使細(xì)胞質(zhì)流動的速度變慢,表明能量的正常供應(yīng)是細(xì)胞質(zhì)流動所必需的。

    表3 能量改變對細(xì)胞質(zhì)流動的影響

    溫度、光照強度、能量的改變都能通過影響細(xì)胞的生理活性進而影響細(xì)胞質(zhì)的流動。以上3 個實驗所需條件、材料及試劑都是常用的,所有學(xué)校都可開展相關(guān)拓展實驗。此實驗的拓展設(shè)計目的也是讓學(xué)生都可參與、體驗觀察細(xì)胞質(zhì)的流動,此舉能極大提升實驗可操作性,也能幫助學(xué)生理解溫度、光照強度和能量的改變對植物細(xì)胞生命活動的重要影響。

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