長(zhǎng)壽花觀賞價(jià)值及組織培養(yǎng)初步研究

馬 群，薛永飛，齊占濤，郭 妙

(1.大同市城墻帶狀公園管理中心，山西 大同 037004；2.大同市智家堡公園，山西 大同 037004；3.大同市兒童公園，山西 大同 037004)

1 引言

長(zhǎng)壽花(Kalanchoebolssfeldiana)屬景天科伽藍(lán)屬多年生肉質(zhì)草本植物，又名矮生伽藍(lán)菜、圣誕伽藍(lán)菜、壽星花，原產(chǎn)非洲馬達(dá)加斯加島。19世紀(jì)末已開(kāi)始商品生產(chǎn)，現(xiàn)已成為優(yōu)良冬春季室內(nèi)盆花[1]。長(zhǎng)壽花喜溫暖濕潤(rùn)和陽(yáng)光充足環(huán)境，不耐寒，耐干旱，夏季怕高溫，宜良爽氣候，冬季溫度不低于5 ℃；對(duì)土壤要求不嚴(yán)，以肥沃沙壤土為好。盆栽后，在稍濕潤(rùn)環(huán)境下生長(zhǎng)旺盛；過(guò)于干旱或溫度偏低，生長(zhǎng)緩慢，葉片發(fā)紅，花期推遲[3]。當(dāng)前，提高品質(zhì)是國(guó)內(nèi)長(zhǎng)壽花生產(chǎn)者面對(duì)的主要難題[2]。由于長(zhǎng)壽花繁殖系數(shù)低，不能滿(mǎn)足生產(chǎn)的需要，為了提高繁殖系數(shù)，對(duì)長(zhǎng)壽花進(jìn)行了離體快繁技術(shù)的初步研究。

2 長(zhǎng)壽花的概述

2.1 形態(tài)特征及品種

莖直立，株高10～30 cm，株幅15～30 cm；全株光滑無(wú)毛，葉肉質(zhì)，交互對(duì)生；橢圓狀長(zhǎng)圓形，葉片上半部具圓齒或成波狀，下半部全緣，深綠色，有光澤，邊略帶紅色，花朵細(xì)密擁簇成團(tuán)，整體觀賞效果甚佳。圓錐狀聚傘花序，花多數(shù)，花色有緋紅、桃紅、橙紅、黃、橙黃、紫紅、白，花期2～5月[2]。目前長(zhǎng)壽花銷(xiāo)售可大致分為5個(gè)系列[3]。

豐花長(zhǎng)壽是品種花色最多的系列。觀賞效果出色，適合窗臺(tái)、茶幾、餐桌等處擺放[3,4]。迷你系列株形小巧，生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高[4]。光照充足即可，對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求不高，適合新手養(yǎng)殖盆栽。垂吊系列花色較少，常見(jiàn)的有下垂風(fēng)鈴狀花、四角星狀花[4]。特殊品種系列有黃、橙黃、橘黃、白色，特點(diǎn)是葉片鹿角狀，很受追求獨(dú)特的消費(fèi)者喜愛(ài)[3]。重瓣系列總體花期更長(zhǎng)、花色更豐，常見(jiàn)品種主要有：卡羅林(Caroline)、西莫內(nèi)(Simone)、內(nèi)撒利(Nathalie)、阿朱諾(Arjuno)、米蘭達(dá)(Miranda)、塊金(Nugget)系列、四倍體的武爾肯(Vulcan)、肯尼亞山(MountKenya)、薩姆巴(Sumba)、知覺(jué)(Sensation)和科羅納多(Coronado)[3,4]。目前這五個(gè)系列市場(chǎng)銷(xiāo)路都不錯(cuò)，尤其重瓣系列已成為花卉市場(chǎng)的主要利潤(rùn)增長(zhǎng)點(diǎn)[1]。

2.2 栽培技術(shù)

扦插苗上盆時(shí)，腐葉土2份與1份砂或煤渣混合。生長(zhǎng)期盛夏遮蔭時(shí)，保持60%的透光率，春、秋、冬季注意充足光照[1]。天氣干燥，需在植株上及周?chē)鷩娝?，以增加空氣濕度。旺盛生長(zhǎng)期，施肥2～3次/月[3,4]。冬季室內(nèi)10 ℃以上，仍然可以有很好的長(zhǎng)勢(shì)并保持開(kāi)花，室內(nèi)不低于0 ℃可以安全越冬[3,4]。病蟲(chóng)害應(yīng)及時(shí)發(fā)現(xiàn)、及時(shí)防治，保持植株健康生長(zhǎng)。

2.3 目前市場(chǎng)狀況

多年來(lái)，長(zhǎng)壽花一直是普通老百姓喜愛(ài)的花卉之一，能常年保持較好的市場(chǎng)份額，價(jià)格相對(duì)穩(wěn)定，且品種更新?lián)Q代快、緊跟國(guó)外育種公司的腳步[1，2]。多肉植物未來(lái)5年市場(chǎng)銷(xiāo)售仍將處于上升期，利潤(rùn)十分可觀，除去成本和運(yùn)輸、人工等費(fèi)用，一盆普通多肉植物利潤(rùn)為零售價(jià)的50%以上[2]。目前，國(guó)內(nèi)銷(xiāo)售的高品質(zhì)長(zhǎng)壽花大多依賴(lài)荷蘭進(jìn)口，把品質(zhì)提高是國(guó)內(nèi)長(zhǎng)壽花生產(chǎn)者所面對(duì)的主要難題[3]。

2.4 組織培養(yǎng)研究目的

目前，長(zhǎng)壽花在園林中應(yīng)用日益增多，為了提高繁殖系數(shù)，以長(zhǎng)壽花的幼葉和幼莖為外植體，接種在加入不同濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)愈傷組織及叢生芽，對(duì)其進(jìn)行組織培養(yǎng)的初步研究。

3 材料與方法

3.1 材料

長(zhǎng)壽花供試材料均來(lái)自四川農(nóng)業(yè)大學(xué)林木遺傳育種的實(shí)驗(yàn)苗圃。以幼莖和幼葉為材料，取生長(zhǎng)健康的當(dāng)年生枝條若干，除去附著在外植體表面的污物，用濃洗衣粉液浸泡10 min，再用自來(lái)水沖洗2 h[4]。在無(wú)菌條件下，用75%的酒精處理15 s，接著用0.1%升汞溶液分別處理5min和7 min；再用升汞浸泡殺菌、無(wú)菌水漂洗過(guò)程中，間隔1～2 min輕輕攪動(dòng),達(dá)到更好的殺菌和減少升汞殘留的目的[4]。將處理好的外植體放在培養(yǎng)皿的無(wú)菌紗布上，吸取表面水分，然后將外植體剪成約0.5 cm長(zhǎng)的小段，接種在配制好的培養(yǎng)基上。

3.2 試驗(yàn)方案

以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，附加不同的激素構(gòu)成(表1)。將每個(gè)處理分為兩部分，用0.1%升汞溶液分別處理5 min和7 min，觀察不同滅菌時(shí)間對(duì)滅菌效果及外植體成活率的影響。

表1 培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度及其組合

3.3 培養(yǎng)條件

對(duì)取下的莖和葉進(jìn)行常規(guī)消毒。將處理好的莖段和葉片接種到快繁培養(yǎng)基(表1)上，其中瓊脂6～7 g/L，蔗糖30 g/L，pH值調(diào)至7.0左右，高壓蒸汽滅菌18 min。培養(yǎng)溫度為25 ℃，光照周期為8 h/d，弱、散射光。所有試驗(yàn)均使用試管[5]。每個(gè)處理接種15支，每支1個(gè)外植體。培養(yǎng)35 d開(kāi)始統(tǒng)計(jì)愈傷組織塊數(shù)和叢生芽個(gè)數(shù)。

4 結(jié)果與分析

4.1 不同處理愈傷組織誘導(dǎo)的差異

將剪下的葉片、莖段接種在初代培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)8～10 d，愈傷組織在切口處形成，培養(yǎng)基中不同濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及其組合對(duì)長(zhǎng)壽花葉片、莖段形成愈傷組織的時(shí)間、生長(zhǎng)速度、愈傷組織的致密性等方面的影響較為明顯，詳見(jiàn)表2。通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)，不同處理的長(zhǎng)壽花在初代培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織的反應(yīng)不一，主要表現(xiàn)在開(kāi)始產(chǎn)生愈傷的時(shí)間、愈傷組織的生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)狀態(tài)、愈傷組織產(chǎn)生。

表2 不同處理愈傷組織的誘導(dǎo)情況

從表2可以看出，NAA濃度較高時(shí)，誘導(dǎo)形成的愈傷組織疏松、透明、濕潤(rùn)、生長(zhǎng)迅速，接種后8～10 d開(kāi)始有愈傷組織在切口處形成，10～15 d進(jìn)入迅速生長(zhǎng)期。2,4-D在低濃度下(不大于1.0 mg/L)，愈傷組織誘導(dǎo)率較低、黃綠色、致密、生長(zhǎng)緩慢、易褐化；高濃度下(大于1.0 mg/L)愈傷組織墨綠色、黏稠、濕潤(rùn)、生長(zhǎng)慢、不褐化。6-BA濃度較高的處理在接種后10～11 d開(kāi)始有愈傷組織在切口處形成，15～20 d進(jìn)入迅速生長(zhǎng)期。

2,4-D的濃度對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響比較明顯，NAA的濃度對(duì)愈傷組織質(zhì)量或狀態(tài)影響較大。當(dāng)NAA濃度一定時(shí)，愈傷組織誘導(dǎo)率和增殖情況隨6-BA濃度的升高而增加，生長(zhǎng)狀況變化不大。因此，在長(zhǎng)壽花愈傷組織誘導(dǎo)和增殖中，適當(dāng)提高培養(yǎng)基中的6-BA濃度和降低NAA濃度，可提高誘導(dǎo)率和增殖情況，并獲取較高質(zhì)量的愈傷組織。

4.2 不同處理叢生芽誘導(dǎo)的差異

由表3可以看出，2,4-D 的濃度對(duì)誘導(dǎo)芽數(shù)的影響較大，如濃度為1.0 mg/L時(shí)，誘導(dǎo)的叢生芽芽數(shù)多、無(wú)失綠現(xiàn)象，而濃度為1.5 mg/L時(shí)，芽數(shù)少、有部分失綠現(xiàn)象。6-BA 較高時(shí)，誘導(dǎo)芽數(shù)較高。NAA的濃度對(duì)誘導(dǎo)芽數(shù)的影響不大。

4.3 不同滅菌時(shí)間對(duì)外植體滅菌效果的影響

由表4可以看出，升汞處理時(shí)間為7 min的材料污染率較低，外植體成活率較高。從死亡材料來(lái)看，多為切割較小的材料。所以，對(duì)于長(zhǎng)壽花外植體的表面滅菌處理時(shí)間，應(yīng)按取材的老嫩程度做適當(dāng)調(diào)整，升汞處理時(shí)間7 min為宜。

表3 不同處理叢生芽的誘導(dǎo)情況

表4 不同滅菌時(shí)間對(duì)滅菌效果及外植體成活率的影響

5 結(jié)論與討論

5.1 結(jié)論

通過(guò)對(duì)長(zhǎng)壽花在不同濃度、不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的組合上誘導(dǎo)愈傷組織和增殖情況的研究，從愈傷組織的致密性、較高的誘導(dǎo)率和較好的增殖情況綜合得出，適合長(zhǎng)壽花愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+2，4-D(1.0 mg/L)+6-BA(1.5 mg/L)+NAA(1.0 mg/L)+蔗糖(30 g/L)+瓊脂(6-7 g/L)。2,4-D 的濃度對(duì)誘導(dǎo)芽數(shù)的影響較大。長(zhǎng)壽花升汞處理時(shí)間7 min為宜，外植體的表面滅菌處理時(shí)間，應(yīng)按取材的老嫩程度做適當(dāng)調(diào)整。

5.2 討論

在植物組織初代培養(yǎng)中，污染直接影響無(wú)性系建立的速度[7]。就長(zhǎng)壽花而言，在切口處流出的大量汁液，常導(dǎo)致細(xì)菌性污染，可能與汁液包裹著雜菌一起附著在外植體表面，造成升汞觸殺困難有關(guān)。本試驗(yàn)中用0.1%升汞溶液處理外植體7 min，除去附著在外植體表面的汁液，減少污染的效果明顯，但不能減輕褐化，且消毒時(shí)間梯度偏少，時(shí)間跨度偏小。