液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定大白菜中15種農(nóng)藥殘留

王緹

摘要：采用液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS-MS）技術(shù)，建立大白菜中15種農(nóng)藥殘留的測(cè)定方法。樣品通過乙腈提取，經(jīng)改良的QuEChERS方法凈化后上機(jī)檢測(cè)，結(jié)果表明：在0.05～0.20 mg/L范圍內(nèi)，15種目標(biāo)物的線性系數(shù)>0.99，回收率為77.4%～95.2%，方法精密度為2.5%～9.6%。該方法簡(jiǎn)單、靈敏、迅速，可滿足日常農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥監(jiān)測(cè)檢測(cè)工作的需要。

關(guān)鍵詞：農(nóng)藥殘留;大白菜;液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜;檢測(cè)

中圖分類號(hào)：S481.8? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? 文章編號(hào)：1674-1161（2020）03-0030-04

大白菜是我國(guó)原產(chǎn)蔬菜，其營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美，耐貯藏、易種植，在我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品市場(chǎng)中占有重要地位。在高溫季節(jié)種植大白菜，容易引發(fā)病蟲害，造成產(chǎn)量減少和品質(zhì)下降，菜農(nóng)往往通過施用大量農(nóng)藥和化肥來(lái)解決此問題，從而導(dǎo)致大白菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)。大白菜在生長(zhǎng)過程中至少要施用兩種以上農(nóng)藥，一是打在根部避免地蛆啃食，二是打在葉子上防止病蟲害，可見僅僅清洗大白菜的外表是不能夠去除農(nóng)藥殘留的。因此，建立一種分析大白菜中多種農(nóng)藥殘留的方法十分重要。

目前農(nóng)產(chǎn)品中多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法主要有速測(cè)法、高效液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法等。隨著科技發(fā)展進(jìn)步，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)逐漸被應(yīng)用于蔬菜、花卉和茶葉的農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，而被檢測(cè)的農(nóng)藥種類也越來(lái)越多、越來(lái)越廣泛。本課題將樣品通過乙腈提取，經(jīng)改良的QuEChERS方法凈化，采用液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜方法，對(duì)大白菜中15種農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 啶蟲脒、涕滅威、阿維菌素、嘧菌酯、多菌靈、克百威、氯蟲苯甲酰胺、滅幼脲、烯酰嗎啉、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、吡蟲啉、甲霜靈、辛硫磷、霜霉威、蟲酰肼：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境監(jiān)測(cè)總站。

1.1.2 試劑 乙腈：色譜純，美國(guó)天地公司;甲醇：色譜純，美國(guó)天地公司;甲酸：色譜純，霍尼韋爾（中國(guó)）有限公司;ProElut QuEChERS產(chǎn)品套裝：規(guī)格為400 mg PSA/400 mg C18/1 200 mg MgSO4等，北京迪科馬科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

K600型食物調(diào)理機(jī)：德國(guó)博朗公司;天平：精確度0.000 1 g，德國(guó)賽多利斯集團(tuán);AH-20型全自動(dòng)均質(zhì)器：?？苾x器（廈門）有限公司;TGL-20B型高速離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器有限公司;LD4-8型離心機(jī)：北京京力離心機(jī)有限公司;Transferpette移液槍：1～10 mL，20～200 μL，100～1 000 μL，德國(guó)普蘭德公司;Dispensette瓶口移液器：2.5～25.0 mL，德國(guó)普蘭德公司;WH300型旋渦混合器：上海安亭科學(xué)儀器有限公司;Thermo TSQ Quantum Ultra液質(zhì)聯(lián)用儀：配電噴霧離子源（ESI），美國(guó)Thermo Fisher公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品采集 抽取當(dāng)季不同地區(qū)的蔬菜大棚、批發(fā)市場(chǎng)和超市等處的大白菜，每個(gè)樣品取3 kg，切塊，攪勻，采用四分法取攪好的樣品約200 g，放入聚乙烯瓶中，貼好標(biāo)簽，于-16～-20 ℃條件下冷凍保存。

1.3.2 QuEChERS前處理方法 1） 樣品提取。取制備好的大白菜樣品10.0 g于離心管中，加入20.0 mL乙腈，在全自動(dòng)均質(zhì)器上充分混勻1 min，取出后加入

1 200 mg MgSO4等鹽類，在離心機(jī)上以5 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心2 min，取出后靜置，以除去水分。2） 樣品凈化。吸取靜置后的上清液10.0 mL，加入帶有N-丙基乙二胺（PSA）和C18等吸附劑的小柱中，在離心機(jī)上以5 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心2 min，以除去雜質(zhì)。取上清液250 μL，加入250 μL純凈水，裝入上機(jī)小瓶，充分混勻后待測(cè)。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)品的配制 采用加標(biāo)回收試驗(yàn)方法。取各標(biāo)準(zhǔn)樣品1 000 mg/L，用甲醇作溶劑，先配制成5 mg/L的混標(biāo)儲(chǔ)備液，再將混標(biāo)儲(chǔ)備液分別稀釋成0.05，0.10，0.20 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，裝入上機(jī)小瓶，待測(cè)。

1.3.4 上機(jī)測(cè)定

1） 色譜條件。色譜柱：Hypersil GOLD-C18柱（100 mm×2.1 mm，3 μm）;柱溫：30 ℃;進(jìn)樣量：10 μL;流動(dòng)相：0.1%甲酸水溶液和甲醇溶液，梯度洗脫順序見表1。

2） 質(zhì)譜條件。電噴霧離子源，正離子掃描，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。電噴霧電壓：4 300 V，離子源溫度：320 ℃;霧化器壓力：35 psi;碰撞氣流速：9 L/min;定性離子對(duì)、定量離子對(duì)和碰撞能量見表2，混合標(biāo)準(zhǔn)樣品的總離子流色譜圖如圖1所示。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系

以待測(cè)物濃度為橫坐標(biāo)（x），以峰面積為縱坐標(biāo)（Y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)（r2）見表3。

由表3可知：線性系數(shù)>0.99，試驗(yàn)結(jié)果符合GB/T 27417—2017《合格評(píng)定 化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》的技術(shù)要求。

2.2 平均回收率與方法精密度

空白樣品分別添加0.05，0.10，0.20 mg/L 3種不同濃度的農(nóng)藥，每組做2個(gè)添加平行，添加回收率換算成平均值，平均加標(biāo)回收率和方法精密度檢測(cè)結(jié)果見表4。

由表4可知：15種農(nóng)藥的3種添加水平回收率在77.4%～95.2%之間，方法精密度在2.5%～9.6%之間，試驗(yàn)結(jié)果符合GB/T 27404—2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》的技術(shù)要求。0.05 mg/L濃度的回收率和精密度明顯比0.10 mg/L與0.20 mg/L濃度的好，結(jié)果更接近100%。此方法比較可靠，前處理方法與儀器條件都比較成熟，不僅節(jié)省了樣品和試劑的消耗，也大大縮短了前處理時(shí)間，結(jié)果也比較準(zhǔn)確。

3 結(jié)論

采用先進(jìn)的液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，結(jié)合并改良目前普遍應(yīng)用的QuEChERS前處理方法，測(cè)定大白菜中多種農(nóng)藥的殘留。此方法省時(shí)省力、操作簡(jiǎn)便，而且重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確度高，不僅可以滿足現(xiàn)代社會(huì)所需要的簡(jiǎn)便、靈敏、迅速、準(zhǔn)確的多農(nóng)藥殘留分析要求，而且可以利用最前沿的現(xiàn)代化檢測(cè)手段，為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)檢測(cè)提供可靠的技術(shù)保障。

參考文獻(xiàn)

[1] 張文錦，劉本甫.QuEChERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定農(nóng)田土壤中3種嘧啶類殺菌劑的殘留量[J].理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊(cè)，2019，55（12）：1 463-1 465.

[2] 陶云鋒，陸亮.比較液-質(zhì)聯(lián)用法與高效液相色譜法對(duì)水中苯胺和聯(lián)苯胺的同步測(cè)定[J].廣州化學(xué)，2019，44（6）：9-15.

[3] 饒楠.70%吡唑醚菌酯·丙森鋅和50%氟啶蟲酰胺DF的制備及應(yīng)用研究[D].南昌：江西科技師范大學(xué)，2019.

[4] 余曉玲.豬場(chǎng)廢水中四環(huán)素類抗生素對(duì)斑馬魚抗氧化效應(yīng)毒理研究[D].南昌：南昌大學(xué)，2019.

[5] 劉偉婷.基于分子印跡及分子對(duì)接雙策略技術(shù)研究苦豆子中抗腫瘤活性成分[D].南昌：江西中醫(yī)藥大學(xué)，2019.

Determination of 15 Pesticide Residues in Chinese Cabbage by

Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

WANG Ti

（Liaoning Inspection， Examination & Certification Centre， Shenyang 110034， China）

Abstract： A method for the determination of 15 pesticide residues in Chinese cabbage was established by using liquid chromatography-tandem mass spectrometry （LC-MS-MS）.The samples were extracted by acetonitrile， purified by the improved QuEChERS method and then tested by the machine. The results showed that： Within the range of 0.05～0.20 mg/L， the linear coefficient of 15 target substances was > 0.99， the recovery rate was 77.4%～95.2%， and the precision of the method was 2.5%～9.6%. The method is simple， sensitive and rapid， which can meet the needs of daily agricultural pesticide monitoring and testing.

Key words： pesticide residue; Chinese cabbage; liquid chromatography-tandem mass spectrometry; detection