潔癬酊臨床安全性實驗研究*

張青葉，賈育蓉，王 敏

(甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050)

潔癬酊作為甘肅省中醫(yī)院皮膚科協(xié)定處方已在臨床應(yīng)用十余年，但由于客觀條件限制，一直未能對該方劑的藥理、毒理、藥物安全性等作出系統(tǒng)研究。本實驗旨在研究該方劑的安全性以及治療的機(jī)制，使我科現(xiàn)有的、臨床療效確切的一些外用制劑規(guī)范化，以便使該系列制劑更安全和有效地為廣大患者服務(wù)。

1 實驗材料

1.1 藥 品

潔癬酊藥物組成：苦參100 g，百部30 g，白鮮皮50 g，蛇床子50 g，地膚子50 g，土茯苓50 g，共六種。通過制備、提取制成可以涂抹皮膚的酊劑供實驗用。

1.2 儀器和試劑

藥品(供試品：潔癬酊；對照品：蜂蜜；陽性致敏物：2.4二硝基氯苯，批號930806，軍事科學(xué)院藥材供應(yīng)站)，用丙酮配置1.0 % 的致敏濃度和0.1 %的激發(fā)濃度。

1.3 動 物

SPF級、體重(155±10)g，SD大鼠，雌雄各半，由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 急性毒性實驗

經(jīng)多次預(yù)實驗，測得潔癬酊實驗用大鼠未出現(xiàn)急性毒性結(jié)果。

2.1.1 實驗方法

取大鼠30只，按體重隨機(jī)分為三組，給藥前24 h用剪刀將大鼠背部脊柱兩側(cè)的毛剪掉，剪毛范圍相當(dāng)于體表面積的10 %左右。第一組為空白對照組，不使用任何藥物。第二組為實驗組，局部外涂潔癬酊0.5 mL/體重·g，1 d 2次。第三組為對照組，給予對照蜂蜜0.01 g/體重·g，1 d 2次。連續(xù)觀察24 h、48 h、72 h大鼠的行為活動、呼吸、皮毛光澤、飲食、眼和黏膜、體重和死亡情況。

2.1.2 結(jié) 果

潔癬酊實驗組、空白對照組、對照組大鼠均未出現(xiàn)異常。

2.2 皮膚刺激實驗

2.2.1 實驗方法

取大鼠30只，按體重隨機(jī)分為三組，每組10只，完整皮膚。給藥前24 h用將大鼠背部脊柱兩側(cè)毛剪掉，剪毛面積為每側(cè)約5 cm2，每組大鼠一側(cè)背部均涂敷潔癬酊0.5 mL/體重·g，另一側(cè)背部均涂敷蜂蜜0.01 g/體重·g，持續(xù)24 h后，用溫水洗凈藥物。分別觀察涂抹部位1 h、24 h、48 h、72 h的皮膚刺激反應(yīng)，按表1、表2進(jìn)行皮膚刺激反應(yīng)評分及強(qiáng)度評價。

表1 皮膚刺激性反應(yīng)評分表

表2 皮膚刺激性評價標(biāo)準(zhǔn)

2.2.2 結(jié) 果

結(jié)果表明，潔癬酊對完整皮膚的刺激反應(yīng)積分值為小于0.1，即潔癬酊對完整皮膚無刺激性；停藥72 h后，刺激現(xiàn)象基本消失。見表3。

表3 潔癬酊對大鼠完整皮膚刺激反應(yīng)實驗結(jié)果

2.3 皮膚過敏實驗

2.3.1 實驗方法

取體重(155±10 g)大鼠30只，隨機(jī)分為三組，分實驗組(潔癬酊組)、空白對照組(清潔飲用水)和陽性對照組2.4-二硝基氯苯，每組10只，雌雄兼用。進(jìn)行致敏與激發(fā)試驗(劑量同前，均勻覆蓋剪毛區(qū)域)。給藥前24 h用剪刀將大鼠背部脊柱兩側(cè)毛剪掉，剪毛面積每側(cè)約3 cm×3 cm，給藥組每只大鼠左側(cè)脫毛區(qū)涂敷供試品1 mL。第7天和第14天以同法分別給藥1次，空白對照組涂敷對照品1 mL，陽性對照組涂敷0.1 % 2.4-二硝基氯苯0.2 mL，方法同給藥組。于末次給藥后14 d，給藥組每只大鼠在右側(cè)脫毛區(qū)涂敷供試品1 mL，6 h后觀察，然后分別于1 h、24 h、48 h、72 h再次觀察皮膚過敏反應(yīng)情況，空白對照組和陽性對照組分別給予對照品1 mL，0.1 % 2.4-二硝基氯苯 0.2 mL，方法同給藥組。按表4記錄時間過敏反應(yīng)分值，計算過敏率并按表5評價藥物的致敏性。

2.3.2 結(jié) 果

空白對照組和實驗組大鼠于涂抹潔癬酊后分別于1 h、24 h、48 h、72 h皮膚未見過敏反應(yīng)，實驗對照組動物于激發(fā)接觸后均出現(xiàn)過敏反應(yīng)癥狀。各組反應(yīng)分值見表6。

表4 皮膚過敏反應(yīng)程度評分標(biāo)準(zhǔn)

表5 皮膚致敏性評價標(biāo)準(zhǔn)

表6 潔癬酊對大鼠皮膚反應(yīng)過敏反應(yīng)實驗結(jié)果

3 討 論

本研究通過大鼠自主活動、皮膚、黏膜等情況證明潔癬酊的臨床使用安全性，結(jié)果證明潔癬酊安全無毒，對完整皮膚無刺激、無致敏現(xiàn)象。實驗中酊劑本身是95 %乙醇配制的賦形劑，這種劑型可對破損皮膚產(chǎn)生輕微刺激。皮膚長期反復(fù)接觸乙醇易造成皮膚干燥、脫屑、皸裂和發(fā)生皮炎等不良反應(yīng)，并對破損皮膚有刺激性[1]。有研究表明[2]，乙醇可改變皮膚表層結(jié)構(gòu)，使角質(zhì)層脂質(zhì)發(fā)生溶解而變得疏松，加劇皮膚局部用藥吸收后產(chǎn)生的全身毒性。但該實驗中大鼠未出現(xiàn)全身毒性反應(yīng)，今后實驗可通過藥物濃度及用藥時間等方面進(jìn)一步驗證。