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    唐古特大黃不同提取物抗痛風(fēng)作用比較研究

    2020-06-10 05:48:18王紅娟呂小旭王芳鄒家棟張旭東
    甘肅科技縱橫 2020年12期
    關(guān)鍵詞:痛風(fēng)尿酸

    王紅娟 呂小旭 王芳 鄒家棟 張旭東

    摘要:目的:對(duì)比唐古特大黃的不同提取物抗痛風(fēng)作用。方法:選取體重相近的Wistar大鼠并分組,通過(guò)次黃嘌呤及氧嗪酸鉀建立痛風(fēng)性腎病模型,給予唐古特大黃水、甲醇和酸水解高(5g·kg-1)低劑量(1.25g·kg-1)的提取物,實(shí)驗(yàn)中另設(shè)空白組、陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組。測(cè)定大鼠腎臟指數(shù)及大鼠血液中尿酸值來(lái)考察抗痛風(fēng)作用。結(jié)果:唐古特大黃不同提取物抗痛風(fēng)作用存在顯著性差異,以酸水解提取物效果最好,其次為甲醇提取物和水提取物。結(jié)論:唐古特大黃的酸水解提取物有較強(qiáng)的抗痛風(fēng)作用,其中酸水解提取物含有游離的蒽醌類成分最多,其作用機(jī)制需進(jìn)一步研究,此為唐古特大黃的開(kāi)發(fā)利用提供了依據(jù)。

    關(guān)鍵詞:唐古特大黃;痛風(fēng);腎臟指數(shù);尿酸

    中圖分類號(hào):R589.7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    近年痛風(fēng)患者越來(lái)越多,而痛風(fēng)與血液中尿酸含量過(guò)高有關(guān)。唐古特大黃具有解熱抗炎解毒,抗痛風(fēng),活血涼血,瀉下攻積,清熱瀉火,止血,活血化瘀之功效。現(xiàn)代藥理作用表明,唐古特大黃具有抗炎、瀉下、抗腫瘤和抑制肺纖維化等方面作用,同時(shí)也有將唐古特大黃作為臨床治療痛風(fēng)性腎病常用藥物的研究。本文所研究的唐古特大黃為蓼科植物唐古特大黃(Rheklm tanguticum Maxim.ex Bam)的干燥根及根莖,主產(chǎn)于青海、甘肅、西藏等地,主要以野生品種為主。對(duì)現(xiàn)有唐古特大黃藥理作用的研究基礎(chǔ)上,對(duì)唐古特大黃水提取物、甲醇提取物和酸水解提取物治療痛風(fēng)作用進(jìn)行了比較研究。

    1材料與方法

    1.1材料

    1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    wistar大鼠,雌雄各半,體重180-220g,均由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,生產(chǎn)許可證號(hào):(甘)20150001。喂養(yǎng)于本學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物房,給予正常大鼠飼料飼喂,自由飲水,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

    1.1.2藥物及試劑

    唐古特唐古特大黃為野生品種,采自六盤山地區(qū),經(jīng)本院程亞青教授鑒定為蓼科植物唐古特大黃(Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.的干燥根及根莖。氧嗪酸鉀(武漢遠(yuǎn)成共創(chuàng)科技有限公司,批號(hào):00164);次黃嘌呤(武漢遠(yuǎn)成共創(chuàng)科技有限公司,批號(hào):00164);苯溴馬?。ǖ聡?guó)赫曼大藥廠,批號(hào):1681550);尿酸測(cè)定試劑盒(上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司,批號(hào):D18010231);甲醇(天津市大茂化學(xué)試劑廠,分析純,批號(hào):20170824);乙醚(天津市大茂化學(xué)試劑廠,分析純,批號(hào):20180325);水為蒸餾水。

    1.1.3實(shí)驗(yàn)儀器

    cs系列全自動(dòng)生化分析儀(長(zhǎng)春迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司);Bs224s電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);12號(hào)大鼠直形灌胃針(浙江省寧??h電子醫(yī)藥儀器廠,批號(hào):GJ8301-A);5mL一次性使用人體靜脈血樣采集容器(瀏陽(yáng)市三力醫(yī)用科技發(fā)展有限公司,批號(hào):GA5011);H-1650R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司);TDL-40B臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠制造)。

    1.2方法

    1.2.1藥物組處理方法

    唐古特大黃蒸餾水煎煮兩次,合并煎煮液,濃縮成1g·mL-1的溶液,為水提取組;唐古特大黃甲醇加熱回流提取兩次,合并提取液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)為流浸膏,加蒸餾水成1g·mL-1的混懸液,為甲醇提取組;唐古特大黃8%鹽酸酸水解后,再用乙醚加熱回流提取,合并濾液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干乙醚后,加蒸餾水成1g·mL-1的混懸液,為酸水解提取組。

    1.2.2高尿酸血癥動(dòng)物模型的建立

    90只Wistar大鼠,雌雄各半,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,分為9組,空白組、陰性對(duì)照組生理鹽水,陽(yáng)性對(duì)照組苯溴馬?。?.01g·kg-1),藥物組6組,為唐古特大黃水提取、甲醇提取和酸水解提取高(5g·kg-1)低劑量(1.25g·kg-1)組。每組10只,除空白組外每組大鼠灌胃次黃嘌呤(1g·kg-1),同時(shí)皮下注射氧嗪酸鉀(250mg·kg-1)建立大鼠急性高尿酸血癥模型。造模1h后,稱重并按不同劑量灌胃,陰性對(duì)照組給予相同體積的生理鹽水,陽(yáng)性對(duì)照組給予相應(yīng)劑量的苯溴馬隆,給藥2h后,斷頭采血,測(cè)定血尿酸含量。

    1.2.3大鼠尿酸型腎病模型的建立

    90只Wistar大鼠,雌雄各半,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,分為9組,空白組、陰性對(duì)照組生理鹽水,陽(yáng)性對(duì)照組苯溴馬?。?.01g·kg-1),藥物組6組。大鼠灌胃氧嗪酸鉀(400mg·kg-1)2mL構(gòu)建大鼠尿酸型腎病模型,空白對(duì)照組灌胃等體積生理鹽水。藥物組同1.2.2項(xiàng)下方法給藥,早中晚各給藥1次,連續(xù)給藥5周。最后一次給藥結(jié)束3h后腹腔注射10%水合氯醛(0.03mL·kg-1)麻醉大鼠,摘除腎臟,仔細(xì)剔除無(wú)關(guān)組織,質(zhì)量稱重,計(jì)算腎臟指數(shù),統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。臟器指數(shù)=臟器(g)/體重(g)·100%。

    1.2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    使用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,數(shù)據(jù)結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,多組數(shù)間比較采用方差分析,兩組數(shù)間采用F檢驗(yàn),以P<0.05說(shuō)明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P<0.01說(shuō)明差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.1唐古特大黃不同提取物對(duì)大鼠尿酸值的影響

    通過(guò)對(duì)尿酸值的分析,唐古特大黃的不同提取物均可明顯降低尿酸值,與陰性對(duì)照組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01)。其中酸水解提取物組降低尿酸值最明顯,其次為甲醇提取組和水提取組,且各組之間有差異(P<0.05)。高、低劑量之間只有甲醇提取組有差異(P<0.05)。結(jié)果見(jiàn)表1所列。

    2.2唐古特大黃不同提取物對(duì)大鼠腎臟指數(shù)的影響

    通過(guò)SPSS分析,唐古特大黃的不同提取物對(duì)尿酸型腎病大鼠均有影響,其結(jié)果與陰性對(duì)照組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01)。其中酸水解提取物組對(duì)腎臟的保護(hù)作用最明顯,其次為甲醇提取組和水提取組(除甲醇提取物低劑量組),且各組之間有差異(P<0.05)。這與唐古特大黃對(duì)不同提取物對(duì)大鼠尿酸值影響的結(jié)果相符。但各高、低劑量之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異(P<0.05)。結(jié)果見(jiàn)表2所列。

    3討論

    綜合以上分析結(jié)果,唐古特大黃不僅具有降低大鼠血尿酸,同時(shí)還能保護(hù)大鼠腎臟的作用,這與文獻(xiàn)報(bào)道相符。對(duì)不同提取物治療效果比較研究發(fā)現(xiàn),其中酸水解提取物治療效果最好。唐古特大黃的化學(xué)成分的分析中,水提取物中主要是水溶性成分,如糖類等;甲醇提取物,主要含有結(jié)合型蒽醌,如蒽醌苷類;酸水解提取物主要含有游離型蒽醌類,如唐古特大黃素、唐古特大黃酸、唐古特大黃酚、唐古特大黃素甲醚、蘆薈唐古特大黃素等。王雪等研究發(fā)現(xiàn)唐古特大黃酸對(duì)馬兜鈴酸A引起的斑馬魚(yú)幼魚(yú)腎損傷有一定的保護(hù)作用。還有研究表明,唐古特大黃總蒽醌對(duì)結(jié)腸和腎臟水通道蛋白表達(dá)具有重要影響,可用于治療消化和泌尿系統(tǒng)相關(guān)疾病。本研究發(fā)現(xiàn)唐古特大黃中游離蒽醌類成分治療痛風(fēng)作用顯著,其作用機(jī)理還需進(jìn)一步研究。

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