全葡萄提取物（含白藜蘆醇）輔助降血脂功能動物實驗報告

胡家碩 上海楷達生物科技有限公司 上海市 200030

1 材料和方法

1.1 樣品

由上海崴環(huán)進出口有限公司提供。人體口服推薦量為每日3次，每次1 粒，成人體重按60kg計算，折合劑量為0.013g/kg●bw。

1.2 實驗動物及環(huán)境條件

SPF級雄性SD大鼠50只及飼料由長沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK(湘)2009-0012。實驗條件為屏障環(huán)境，實驗期間實驗環(huán)境溫度22°C～24°C,濕度50%～56%。實驗動物使用許可證號為SYXK(湘)2010-0011 o

1.3 主要儀器與試劑

Beckman-Coulter au680全自動生化分析儀；血清總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）試劑盒從上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)有限公司購買；HDL-C和LDL-C試劑盒從寧波美康生物技術(shù)有限公司購買。

1.4 模型飼料

在維持飼料中添加20.%蔗糖、15%豬油、1.2%膽固醇、0.2%膽酸 鈉，適量的酪蛋白等。

1.5 實驗方法

釆用混合型高脂血癥動物模型：

（1）劑量分組及受試樣品給予時間：設(shè)全葡萄提取物（含白藜蘆醇）三個劑量組分別為 0.065g/kg ●bw^ 0.130g/kg ●bw、0.390g/kg●bw (分 別 相 當(dāng)于人體推薦劑量的5倍、10倍、30倍)，同時設(shè)空白對照組和模型對照組。低、中、高劑量受試液配制時，分別取樣品1.30g、2.60g、7.80g加蒸餡水定容至200ml,空白對照、模型對照組給予等體積蒸餡水，分別給予受試動物灌胃，灌胃體積為1.0ml/100g.bw,每日一次，連續(xù)30 天；

（2）實驗步驟：于屏障系統(tǒng)下大鼠喂飼維持飼料觀察5至7天，適應(yīng)期結(jié)束時，體重 達180g～220g,按體重隨機分成2兩組，10只大鼠給予維持飼料作為空白對照組，40 只給予模型飼料作為模型組。每周稱體重一次。一周后,不禁食取尾血，用BECKMAN COULTER AU680全自動生化分析儀測定TC、TG、HDL-C、LDL-C。根據(jù)TC水平將模型組動物隨機分為四組即模型對照組和三個劑量組。分組后，空白對照組繼續(xù)給予維持飼料，模型對照組及三個劑量組繼續(xù)給予模型飼料，同時按1.5.1劑量設(shè)計給各組受試動物灌胃；

（3）指標(biāo)測定：每周稱體重一次，于實驗結(jié)束時不禁食釆血，測定血清TC、TG、 HDL-C＞LDL-C 水平。

1.6 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)由Excel和SPSS軟件提供分析了。首先，對數(shù)據(jù)進行方差齊性檢驗，如果方差是齊次的，則采用單變量方差分析進行總體比較。然后用Dunnett法計算多劑量組和模型對照組的平均值比較。如果方差不是齊次的，原始數(shù)據(jù)應(yīng)作相應(yīng)的變換。方差齊性檢驗后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計；如果變量轉(zhuǎn)換后的方差齊性目的沒有達到，則采用區(qū)間匯總檢驗的統(tǒng)計量，用T檢驗比較模型控制組和盲稅組。

1.7 結(jié)果判定

（1）輔助降血脂功能結(jié)果判定：①各劑量組與模型對照組比較，任一劑量組血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇降低，且任一劑量組血清甘油三酯降低，差異均有顯著性。②同時各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇不顯著低于模型對照組，可判定該受試樣品輔助降低血脂功能動物實驗結(jié)果陽性。

（2）輔助降低甘油三酯結(jié)果判定：①各劑量組與模型對照組比較，任一劑量組血清甘油三酯降低，差異均有顯著性，②同時各劑量組血清總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇不顯著高于模型對照組，血清高密度脂蛋白膽固醇不顯著低于模型對照組，可判定該受試樣品輔助降低甘油三酯功能動物實驗結(jié)果陽性。

（3）輔助降低血清總膽固醇結(jié)果判定：①各劑量組與模型對照組比較，任一劑量組血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇降低，差異均有顯著性，②同時各劑量組血清 甘油三酯不顯著高于模型對照組，各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇不顯著低于模 型對照組，可判定該受試樣品輔助降低膽固醇功能動物實驗結(jié)果陽性。

2 結(jié)果

2.1 樣品對大鼠體重的影響

見表1所列，實驗后模型對照組動物增重明顯高于空白對照組(P＜0.05),各劑量組動物初、中、末期體重及增重與模型對照組比較，差異無顯著性(P＞0.05)。

表1 樣品對大鼠體重的影響

表3 實驗前后各組大鼠血清TG水平

表4 實驗前后各組大鼠血膏HDL-C水平

表 5 實 驗 前 后各 組 大鼠 血 清 LDL-C水平

2.2 樣品對大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響

見表2～5所列，模型對照組和空白對照組比較，血清甘油三酯、血清總膽固醇及低 密度脂蛋白膽固醇明顯升高，差異均有顯著性(P＜0.05)，表明造模成功。實驗后， 高劑量組大鼠血清甘油三酯和總膽固醇水平顯著低于模型對照組（P＜0.05），各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平與模型對照組無顯著性差異（P＞0.05）。

3 結(jié)語

本 實 驗 室 條 件 下，以0.065g/kg●bw＞0.130g/kg●bw、0.390g/kg,bw劑量的全葡萄提取物（含白藜蘆醇）給飼模型飼料的SD大鼠灌胃30天，與模型對照組比較，0.390g/kg●b、w劑量組大鼠血清甘油三酯和總膽固醇水平顯著降低（P＜0.05），但對血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平無明顯影響（P＞0.05），提示全葡萄提取物（含白藜蘆醇）對動物具有輔助降血脂功能。