探討快速檢測方法在食品微生物檢測中的應(yīng)用

侯樂啟

傳統(tǒng)的人力食品安全檢測已經(jīng)被更科學(xué)的檢測方法和精密的檢測儀器所取代，為了避免因?yàn)闄z測漏洞導(dǎo)致食用者食用后出現(xiàn)中毒或者身體不適，食品微生物檢測技術(shù)隨著科技的發(fā)展不斷優(yōu)化?？焖贆z測方法作為食品微生物檢測中的一種新型檢測方法，其對于食品微生物檢測的作用還在探索過程中。本文以現(xiàn)階段常用的檢測技術(shù)為依據(jù)，分析快速檢測方法在食品微生物檢測中的應(yīng)用和其優(yōu)點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：快速檢測方法；食品微生物檢測；應(yīng)用

中圖分類號(hào)：TS207.4

相較于傳統(tǒng)自給自足的小農(nóng)經(jīng)濟(jì)模式下的食品加工，現(xiàn)階段食品在采購前都會(huì)經(jīng)歷生產(chǎn)、加工、運(yùn)輸這3個(gè)環(huán)節(jié)，被微生物污染的可能性大大增加。被微生物污染的食品會(huì)因?yàn)槲⑸锏姆敝掣瘮?，如果人們食用被微生物污染的食品，不僅因?yàn)槭澄镏卸径a(chǎn)生嘔吐、腹瀉等癥狀，微生物污染程度嚴(yán)重還會(huì)危及人們的生命安全?，F(xiàn)階段環(huán)境污染對食品污染的影響加劇了人們對污染食品的恐懼，因此選取科學(xué)合理的食品安全檢測方式是食品安全的基礎(chǔ)保障。

快速檢測方法應(yīng)用于食品微生物檢測的意義

經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶動(dòng)了我國的食品需求，這種需求促進(jìn)了我國食品行業(yè)的發(fā)展速度，繁多的食品加工種類加大了食品檢測的難度。因?yàn)榻?jīng)濟(jì)發(fā)展速度快使得我國現(xiàn)階段的食品檢測標(biāo)準(zhǔn)還有許多漏洞，美食多樣化的發(fā)展和全球化的擴(kuò)展速度加大了食品安全檢測的壓力，在食品的生產(chǎn)過程中和加工過程中，食品加工企業(yè)為了延長食品的保質(zhì)期會(huì)加大化學(xué)添加劑的使用劑量，含有過多添加劑的食品被人們食用后有諸多危害，輕則引發(fā)食物中毒或者各種疾病，重則危及人們生命[1]。傳統(tǒng)的顯微鏡檢測不僅會(huì)產(chǎn)生檢測漏洞使得被微生物污染的食物流向市場危害人們身體，而且顯微鏡檢測的效率較慢，不僅檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度低，而且檢測人員的工作量較大。正是因?yàn)閭鹘y(tǒng)的顯微鏡檢測技術(shù)的弊端太過明顯，所以促進(jìn)了快速檢測技術(shù)在食品微生物檢測中的應(yīng)用。使用快速監(jiān)測技術(shù)在提高被檢測食品的安全性的前提下，減少了檢測人員的工作量。

在食品微生物檢測中常用的快速檢測技術(shù)

免疫學(xué)技術(shù)

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)

將已知抗原或抗體吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板或其他固相載體的表面，使酶標(biāo)記過的抗原抗體在聚苯乙烯微量反應(yīng)板或其他固相載體的表面進(jìn)行充分反應(yīng)，之后將液體中的游離成分進(jìn)行洗滌清除，這就是快速檢驗(yàn)法中常用的ELISA（酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)）技術(shù)的基本實(shí)驗(yàn)方法。在此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中常用的試驗(yàn)方法有雙抗體夾心法和間接法，雙抗體夾心法常用于檢測大分子抗原，間接法闖勇于檢測特異抗體。因?yàn)镋LISA技術(shù)在現(xiàn)代微生物檢測中的廣泛應(yīng)用，其靈敏性強(qiáng)、檢測速度快的優(yōu)點(diǎn)在應(yīng)用中得以充分發(fā)揮[1]。

免疫層析技術(shù)

把檢測樣品放置到條狀纖維膜上使其涌動(dòng)，通過層析和免疫反應(yīng)的雙重作用使得檢測樣品在含有配體的纖維膜上顯現(xiàn)，然后通過著色標(biāo)記其中蘊(yùn)含的微生物進(jìn)行分析，這就是Immuno chromatography（免疫層析技術(shù)）技術(shù)的監(jiān)測方式，作為免疫學(xué)技術(shù)的基礎(chǔ)技術(shù)，Immuno chromatography技術(shù)在食品微生物檢測過程中應(yīng)用廣泛[2]。檢測員通過免疫層析技術(shù)可以測定被檢測食物樣本中的Listeria monocytogenes（李斯特菌），方法是在檢測過程中使用掃描儀器對試紙條中的T線、C線等光密度值進(jìn)行掃描，10min就可完成測定工作，測定限為：0.35×106-0.35×109CFU/ml。免疫層析技術(shù)的檢驗(yàn)效率較高，所需時(shí)間少，在食品檢驗(yàn)工作中應(yīng)用較為廣泛[3]。

代謝學(xué)技術(shù)

通過進(jìn)行DNA的天然復(fù)制，進(jìn)行體外DNA分子擴(kuò)增的分子生物學(xué)技術(shù)稱為PCR（單鏈構(gòu)態(tài)多項(xiàng)性分析技術(shù)）技術(shù)，此項(xiàng)技術(shù)的主要作用是擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段。在待擴(kuò)增的DNA片段兩側(cè)和與其兩側(cè)互補(bǔ)的兩個(gè)寡核苷酸引物，經(jīng)變性、退火和延伸若干個(gè)循環(huán)后，DNA擴(kuò)增2倍。作為代謝學(xué)中的基礎(chǔ)技術(shù)之一，PCR技術(shù)是保證食品微生物檢測結(jié)果科學(xué)合理的重要技術(shù)，因此被廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代食品微生物檢測試驗(yàn)當(dāng)中[4]。作為一項(xiàng)在美國研發(fā)推廣的技術(shù)PCR技術(shù)在我國的應(yīng)用時(shí)間較晚，現(xiàn)在仍然處于優(yōu)化階段，其對食品中蘊(yùn)含的細(xì)菌檢測速度快、檢測結(jié)果準(zhǔn)確率高的特性加快了PCR技術(shù)應(yīng)用于食品微生物檢測的速度。

分子生物學(xué)技術(shù)

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，分子生物學(xué)技術(shù)也逐漸被應(yīng)用于食品微生物檢測中。分子生物學(xué)的基因芯片技術(shù)在食品微生物檢測過程中的應(yīng)用效果比較明顯，其主要對特異性微生物的檢測效果較好。在應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)檢測食品微生物之前，檢測人員首先要進(jìn)行芯片點(diǎn)樣中的寡核苷酸的提取，提取成功后進(jìn)行DNA的擴(kuò)列，其次對實(shí)際檢測中的微生物進(jìn)行熒光標(biāo)記，最后以試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)融合。做完準(zhǔn)備工作后在進(jìn)行檢測就會(huì)得出食品樣本中的微生物檢測結(jié)果，通過分析對比后就可知道食品合格與否，從根源上杜絕不合格食品流入市場威脅人們身體健康。

傳感器檢測法

基因傳感器

“將兩種DNA分子相互組合，形成一個(gè)全新的DNA分子鏈，通過DNA分子鏈進(jìn)行物理信號(hào)的傳遞與接收，然后通過換能器的形式展現(xiàn)”是基因傳感器的基本原理。使用基因傳感器進(jìn)行食品微生物的檢測不僅操作方法較為簡單，而且檢測時(shí)間也比傳統(tǒng)顯微鏡的檢驗(yàn)時(shí)間短，因此基因傳感器在實(shí)際食品微生物檢測過程中發(fā)揮了巨大的應(yīng)用價(jià)值[5]。

生物傳感器

“被測分子和敏感材料的特異性相結(jié)合，兩者結(jié)合后發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)導(dǎo)致離子強(qiáng)度、離子顏色、離子信號(hào)發(fā)生變化，從而將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)”是生物傳感器的基本原理。使用生物傳感器以間接的方式進(jìn)行檢測，利用生物傳感器的靈敏度和特異性提高了食品微生物檢測的準(zhǔn)確性。

以濾紙為載體的測試技術(shù)

大腸菌群、大腸桿菌紙片熒光法是濾紙測試方法的技術(shù)重點(diǎn)，此項(xiàng)技術(shù)是由上海醫(yī)科大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)研究所研制的。大腸菌群檢驗(yàn)方法有很強(qiáng)的選擇性，不會(huì)出現(xiàn)假陽性的結(jié)果。紙片法的主要優(yōu)點(diǎn)是：檢出率高，體積較小，操作簡便，培養(yǎng)時(shí)間短，占用空間少，特別適用于實(shí)驗(yàn)空間小的實(shí)驗(yàn)室及野外操作[6]。以濾紙為載體的測試技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)如下：首先，進(jìn)行快速檢測中檢測食物微生物的檢測過程中，一般情況下檢測樣本較少，在檢測過程中避免了大量玻璃器皿的使用，小規(guī)模的檢驗(yàn)降低了檢測操作難度，少量的檢測樣本不僅便于運(yùn)輸、攜帶方便，而且減少了樣本采購的費(fèi)用，使得此項(xiàng)檢驗(yàn)的環(huán)境需求低，可在野外場地、生產(chǎn)現(xiàn)場直接進(jìn)行。其次，快速測試片可以在取樣時(shí)同時(shí)接種，結(jié)果更能反映當(dāng)時(shí)樣本中真實(shí)的細(xì)菌數(shù)，避免了因?yàn)榻臃N時(shí)間的不固定導(dǎo)致細(xì)菌繁殖的數(shù)量增多。最后，相較于對檢測時(shí)間和檢測場地有固定要求的床柜顯微鏡檢測方法，快速測試法可以在基層環(huán)境和生產(chǎn)車間直接檢驗(yàn)的模式降低了傳統(tǒng)模式下企業(yè)送檢的費(fèi)用。

快速檢測方法應(yīng)用于食品微生物檢測的優(yōu)點(diǎn)

檢測結(jié)果更科學(xué)

應(yīng)用快速檢測方法檢測食品微生物能夠同時(shí)進(jìn)行“接種”和“取樣”這兩項(xiàng)工作，這樣的檢測流程不僅避免了傳統(tǒng)檢測技術(shù)需要進(jìn)行較長時(shí)間的細(xì)菌繁殖工作，而且因?yàn)闄z測工作的迅速性和檢測工作的流暢性減少了傳統(tǒng)檢測方式因檢測過程的原因產(chǎn)生的數(shù)據(jù)誤差率，使得食品微生物檢測的具體結(jié)果更加科學(xué)?？茖W(xué)的檢測數(shù)據(jù)為食品安全提供了基礎(chǔ)的數(shù)據(jù)保證。

檢測速度更迅速

因?yàn)榭焖贆z測技術(shù)有先進(jìn)的技術(shù)支持和精密的儀器支持，所以使用快速檢測方法進(jìn)行食品微生物檢測的結(jié)果比傳統(tǒng)顯微鏡檢測的結(jié)果速度更快，在結(jié)束快速檢測方法檢測食品微生物后，檢測產(chǎn)生的廢渣和廢液比傳統(tǒng)檢測技術(shù)少，不僅能夠減輕大量的食品微生物監(jiān)測后的廢渣廢液帶來的環(huán)境污染[7]。而且較少的器皿清洗也減輕了食品微生物檢測工作人員的日常工作量，進(jìn)一步提高食品微生物的監(jiān)測工作效率。

結(jié)束語

綜上所述，現(xiàn)階段很多快速檢測方法都應(yīng)用于食品微生物檢測過程中，其中就有：代謝學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、傳感器檢測法等。這些檢測技術(shù)均可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成食品微生物檢測工作，而且準(zhǔn)確度較高。因此在進(jìn)行食品微生物檢測時(shí)，檢測人員要結(jié)合實(shí)際情況科學(xué)的選擇檢測方法，從而提高食品安全質(zhì)量，為人們身體健康提供基礎(chǔ)保障。