泰安地區(qū)16648例妊娠婦女不規(guī)則抗體篩查分析*

張 群 孫倩倩 江新泉

1.公共衛(wèi)生學(xué)院，山東第一醫(yī)科大學(xué)(山東省醫(yī)科院)，山東 泰安 271016；2.泰安市中心醫(yī)院輸血科，山東 泰安 271000；3.山東省泰山療養(yǎng)院檢驗(yàn)科，山東 泰安 271000

隨著近年來(lái)輸血醫(yī)學(xué)的發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識(shí)到不規(guī)則抗體的重要性。伴隨著輸血技術(shù)的提高，由ABO、RhD血型系統(tǒng)引起的溶血反應(yīng)越來(lái)越少，而因不規(guī)則抗體所致的血型鑒定困難、疑難配血、新生兒溶血病、溶血反應(yīng)等情況的發(fā)生卻逐年升高[1]。近年來(lái)的研究表明，紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體主要是通過(guò)妊娠、輸血、移植、注射免疫物質(zhì)等誘導(dǎo)而產(chǎn)生的[2]。2015年，十八屆五中全會(huì)決定，全面放開(kāi)二孩政策。二孩政策開(kāi)放后，多次妊娠的婦女隨之增加，不規(guī)則抗體陽(yáng)性率也隨之增高。本研究旨在分析二孩政策開(kāi)放后，多次妊娠婦女不規(guī)則抗體分布情況，以改進(jìn)輸血策略，提高臨床輸血安全。

1 材料與方法

1.1一般資料

選取2015年01月—2018年12月，在泰安市中心醫(yī)院擬行剖宮產(chǎn)的妊娠婦女16648例為研究對(duì)象，年齡為17～53歲，孕周為12～40周，妊娠次數(shù)1～9次。應(yīng)用EDTA抗凝管，采集患者靜脈全血2～3 ml。

1.2儀器與試劑

強(qiáng)生AUTOVUE Innova全自動(dòng)血型及配血分析儀、BioVue 孵育器、 BioVue 離心機(jī)、臺(tái)式低速離心機(jī)、血清學(xué)專用離心機(jī)。強(qiáng)生抗人球蛋白(IgG，C3b/C3d)檢測(cè)卡、不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞、抗體鑒定譜細(xì)胞，細(xì)胞生產(chǎn)廠家為上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。試劑均批檢合格并在有效期內(nèi)使用。

1.3方法

1.3.1不規(guī)則抗體篩查采用全自動(dòng)檢測(cè)方法 將患者血液樣本離心分離后，應(yīng)用強(qiáng)生Autovue Innova全自動(dòng)血型及配血分析儀對(duì)患者血液樣本進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查并對(duì)結(jié)果進(jìn)行判讀。

1.3.2不規(guī)則抗體的特異性鑒定 分別取不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者的血清40μl加入抗人球蛋白檢測(cè)卡1～11號(hào)孔，在抗人球蛋白檢測(cè)卡中分別加入3%的1～10號(hào)譜細(xì)胞各10μl和3%的自身細(xì)胞10μl。置于37 ℃孵育器內(nèi)孵育15 min，然后使用專用離心機(jī)離心5 min，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。紅細(xì)胞沉積于孔底者為陰性，紅細(xì)胞凝集于微柱表面或者微柱中間者為陽(yáng)性結(jié)果。對(duì)比患者血清與1～10號(hào)譜細(xì)胞產(chǎn)生的凝集程度，與自身紅細(xì)胞不凝集者為特異性抗體，并根據(jù)患者血清與譜細(xì)胞的反應(yīng)格局判定抗體的特異性，結(jié)合患者抗原表型確定不規(guī)則抗體特異性?；颊哐迮c所有譜細(xì)胞及自身紅細(xì)胞均凝集者為非特異性抗體。所有操作嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程及儀器和試劑使用說(shuō)明書的要求進(jìn)行操作。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS23.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1不規(guī)則抗體檢出情況

在16648例妊娠婦女中，共計(jì)檢出不規(guī)則抗體陽(yáng)性結(jié)果174例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率為1.05%(174/16648)。同種特異性抗體149例，主要為Rh血型系統(tǒng)106例(60.92%)，MNS血型系統(tǒng)34例(19.54%)，Lewis 血型系統(tǒng)17例(9.77%)，P血型系統(tǒng)2例(1.15%)。非特異性抗體主要為自身抗體4例，(2.29%)和其他未鑒定出的抗體11例(6.32%)。其中檢出的主要抗體為抗-E占39.66%、抗-M占19.54%。見(jiàn)表1。

2.2不同妊娠次數(shù)不規(guī)則抗體比較

在16648例妊娠婦女中，無(wú)妊娠史婦女4400例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性0.61%(27/4400)；有一次妊娠史婦女1822例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性率0.77%(14/1822)；有兩次妊娠史婦女5644例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性率1.20%(68/5644)；有三次及以上妊娠史婦女4782例，不規(guī)則抗體陽(yáng)性率1.36%(65/4782)。妊娠次數(shù)與不規(guī)則抗體成正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.224，P=0.002)。見(jiàn)表2。

表1 妊娠婦女不規(guī)則抗體分布

表2 妊娠次數(shù)與不規(guī)則抗體產(chǎn)生的相關(guān)性分析

3 討 論

不規(guī)則抗體通常是由于曾經(jīng)輸血或者妊娠接觸到外來(lái)紅細(xì)胞抗原引起的同種免疫產(chǎn)生的抗體。據(jù)Tormey等[3]報(bào)道，紅細(xì)胞同種免疫中有21.7%產(chǎn)生多種同種抗體。有臨床意義的紅細(xì)胞同種抗體與溶血性輸血反應(yīng)有關(guān)，也是影響血型鑒定結(jié)果的重要因素之一。不規(guī)則抗體導(dǎo)致的溶血性輸血反應(yīng)會(huì)引起寒戰(zhàn)、發(fā)熱，影響治療效果，嚴(yán)重者甚至危及生命[4]。對(duì)孕婦而言，不規(guī)則抗體的產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致免疫溶血性反應(yīng)，母體的不規(guī)則抗體進(jìn)入胎兒血液循環(huán)中造成紅細(xì)胞破壞或使其壽命縮短，輕則導(dǎo)致胎兒黃疸、貧血、水腫及肝脾腫大，重則危及孕婦及胎兒或新生兒生命[5]。

在16648例妊娠婦女中，不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率為1.05%，這與國(guó)內(nèi)漢族人群不規(guī)則抗體的檢出率為0.38%～2.38%基本相符[6-7]。同種特異性抗體檢出149例，其主要分布Rh血型系統(tǒng)106例(60.92%)，MNS血型系統(tǒng)34例(19.54%)，Lewis血型系統(tǒng)17例(9.77%)，與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)報(bào)道Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體陽(yáng)性占46.7%～75.8%[8-9]結(jié)果相近。

本次研究中Rh血型系統(tǒng)主要抗體是抗-E，占39.66%，而位居第二的抗-D抗體占6.32%，這表明抗-E是目前最常見(jiàn)的抗體。我國(guó)人群中E抗原頻率為43%，臨床因RhE血型不合的比率是RhD血型的2.5倍[10]。目前，由于國(guó)內(nèi)輸血相關(guān)法律法規(guī)只要求ABO、RhD同型輸血，因而患者因輸血后產(chǎn)生抗-D概率較低。但對(duì)于Rh血型系統(tǒng)的其他重要抗原E、C、c、e尚未進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)，以至于Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體產(chǎn)生最多，尤其是抗-E。當(dāng)患者有過(guò)妊娠或者輸血后，使得體內(nèi)產(chǎn)生抗-E、抗-C、抗-c等抗體的概率增加[11-12]。故對(duì)育齡期女性，尤其有流產(chǎn)史、妊娠史及輸血史的孕婦加強(qiáng)Rh系統(tǒng)其他抗原檢測(cè)應(yīng)引起重視。本研究還發(fā)現(xiàn)其他血型系統(tǒng)相關(guān)的抗體，其中抗-M占有較高的比例，達(dá)19.54%，抗-M在MNS血型系統(tǒng)同種抗體中所占比例較高,常以IgM的形式存在，也有較多患者存在天然抗體，大多數(shù)抗-M只在低于37℃的溫度下發(fā)生反應(yīng)，最佳反應(yīng)溫度是4℃，所以這類抗體臨床意義不大[13]。Lewis血型系統(tǒng)檢出陽(yáng)性結(jié)果17例，由于Lewis血型系統(tǒng)的抗原在組織液中大量存在，可以中和部分抗體，因此, Lewis血型系統(tǒng)的常見(jiàn)抗體很少引起溶血性輸血反應(yīng)。

非特異性抗體主要為自身抗體4例，主要是患有自身免疫性疾病的孕婦。11例為無(wú)法鑒定出抗體的特異性，其可能存在以下幾方面原因：①存在多種特異性抗原，或同種抗體合并自身抗體，譜細(xì)胞無(wú)法鑒別其特異性。②稀有或特殊抗體特異性，不在譜細(xì)胞抗原譜的范圍之內(nèi)。③其他原因[14]。

不同妊娠次數(shù)孕婦的不規(guī)則抗體檢測(cè)結(jié)果存在顯著差異，有一次妊娠史婦女不規(guī)則抗體陽(yáng)性率為0.77%，有兩次妊娠史婦女不規(guī)則抗體陽(yáng)性率1.20%，有三次及以上妊娠史婦女不規(guī)則抗體陽(yáng)性率1.36%，既往妊娠≥2次組不規(guī)則抗體陽(yáng)性率顯著高于既往妊娠1次和無(wú)妊娠史組，多次妊娠婦女的不規(guī)則抗體陽(yáng)性率高于無(wú)妊娠史女性，可能與孕產(chǎn)婦受到多次妊娠免疫刺激有關(guān)[15]。

隨著二胎政策的開(kāi)放，多次妊娠現(xiàn)象越來(lái)越多，妊娠次數(shù)增加，不規(guī)則抗體產(chǎn)生的概率成比例上升，易導(dǎo)致用血時(shí)配血困難或者無(wú)血可輸及新生兒溶血病等。因此，建議孕產(chǎn)婦早期開(kāi)展妊娠婦女不規(guī)則抗體篩查，避免因不規(guī)則抗體導(dǎo)致的新生兒溶血性疾病等。同時(shí)，輸血前應(yīng)常規(guī)檢測(cè)Rh血型系統(tǒng)的五種抗原，同表型輸血，減少不規(guī)則抗體的產(chǎn)生，對(duì)保證臨床安全、有效輸血治療具有重要的臨床意義。