中草藥添加劑對(duì)魯氏耶爾森菌感染虹鱒血液生化指標(biāo)的影響

馮淇元，陸紹霞，徐 喆,4，王亞玲1,，李芳源,4，劉紅柏

(1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)科學(xué)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，上海 201306；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，哈爾濱 150070；3.上海海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部魚(yú)類(lèi)營(yíng)養(yǎng)與環(huán)境生態(tài)研究中心，上海 201306；4.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)無(wú)錫漁業(yè)學(xué)院，江蘇無(wú)錫 214081)

虹鱒(Oncorhynchusmykiss)為世界性主養(yǎng)冷水魚(yú)類(lèi)，富含不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)及微量元素等，已成為人類(lèi)獲得重要營(yíng)養(yǎng)的膳食之一[1]。虹鱒在養(yǎng)殖過(guò)程中面臨病原菌入侵[2]、密度過(guò)高[3]、溫度異常[4]、濫用藥物[5]的危害，這對(duì)其攝食、代謝、繁殖等有很大影響，甚至引起大規(guī)模的死亡。魯氏耶爾森菌(Yersiniaruckeri)是導(dǎo)致虹鱒患腸炎紅嘴病(enteric redmouth diseases,ERM)的主要致病菌，患病魚(yú)具體表現(xiàn)為體表變黑、眼球突出、下頜部點(diǎn)狀出血。該菌對(duì)各生長(zhǎng)階段的虹鱒魚(yú)均可造成影響，尤其在虹鱒苗種階段由于其抵抗力差，造成的細(xì)菌性應(yīng)激損傷更為嚴(yán)重[6]。

長(zhǎng)期使用抗生素防治魚(yú)病會(huì)促使藥物殘留于水體[7]，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)，嚴(yán)重影響水產(chǎn)養(yǎng)殖健康發(fā)展[8,9]。中草藥作為水產(chǎn)動(dòng)物抗應(yīng)激添加劑的重要來(lái)源，具有抗菌、抗應(yīng)激和提高機(jī)體免疫力等作用，楊移斌等[10]研究烏梅、地榆和杞子提取液對(duì)魯氏耶爾森菌的最小抑菌濃度，發(fā)現(xiàn)烏梅對(duì)魯氏耶爾森菌有良好抑菌效果。Baba等[11]用添加橄欖葉(OleaeuropeaL.)提取物的飼料投喂虹鱒，發(fā)現(xiàn)橄欖葉提取物可有效降低感染魯氏耶爾森菌虹鱒的死亡率，且與對(duì)照組相比，在感染魯氏耶爾森菌后脾臟中免疫基因的表達(dá)顯著上調(diào)。

中草藥的種類(lèi)繁多，但存在單方使用量大和成本高的局限[12]，復(fù)方可根據(jù)機(jī)體和作用目的不同進(jìn)行配伍，利用其相互間的協(xié)同或拮抗作用，提高藥物療效或減少不良反應(yīng)[13,14]。目前，已有中草藥對(duì)虹鱒免疫、熱應(yīng)激方面的研究[15,16]，而復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒抗細(xì)菌性應(yīng)激方面的研究卻未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)兩種復(fù)方中草藥對(duì)魯氏耶爾森菌感染后虹鱒血液生化指標(biāo)等變化，為進(jìn)一步研究抗細(xì)菌性應(yīng)激中草藥添加劑提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

健康、非免疫虹鱒(15±1)g購(gòu)自遼寧省本溪市艾格莫林虹鱒養(yǎng)殖場(chǎng)；實(shí)驗(yàn)用中草藥購(gòu)自哈爾濱寶豐藥店，研磨粉碎后待用。

1.2 方法

1.2.1 中草藥方劑及藥料的制備

實(shí)驗(yàn)所用復(fù)方1和復(fù)方2的質(zhì)量各按照表1進(jìn)行稱(chēng)取，將配伍好的中草藥在砂鍋中浸泡30 min，加熱熬煮45 min后過(guò)濾倒出，再加清水熬煮30 min，合并兩次藥汁用電爐加熱濃縮藥物至1 g/mL，存放于4 ℃冰箱，根據(jù)藥物在飼料中添加量拌入全價(jià)基礎(chǔ)飼料。添加劑量的確定是根據(jù)各藥常用劑量及配比后的協(xié)同作用加減而來(lái)。

表1 實(shí)驗(yàn)用復(fù)方配方和飼料中的藥物添加量Tab.1 Chinese herbs compounds of formulation and compounds content in fodder

1.2.2 養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組，復(fù)方1組和復(fù)方2組，養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)期間均未攻毒，每組三個(gè)平行，每個(gè)平行40尾魚(yú)，水溫(15±1)℃，溶氧10 mg/L以上，虹鱒全價(jià)基礎(chǔ)飼料預(yù)飼2周。正式實(shí)驗(yàn)期間，每天按魚(yú)體質(zhì)量的3%投喂，對(duì)照組投喂不含中草藥的基礎(chǔ)飼料，日投喂3次，連續(xù)投喂28 d。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前和結(jié)束后，對(duì)各組魚(yú)稱(chēng)重，用于計(jì)算增重率。

W=100%×(Wt-W0)/W0

式中，W為增重率(%)，Wt為終末體質(zhì)量(g)，W0為初始體質(zhì)量(g)。

1.2.3 攻毒實(shí)驗(yàn)及存活率統(tǒng)計(jì)

參考連浩淼等[17]用改良寇氏法計(jì)算72 h內(nèi)虹鱒半致死菌液濃度為1.9×107CFU/mL。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將對(duì)照組、復(fù)方1組和復(fù)方2組分為不攻毒組和攻毒組。對(duì)攻毒組魚(yú)用間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽(MS-222)快速麻醉后腹腔注射0.1 mL濃度為1.9×107CFU/mL魯氏耶爾森菌，對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)移至毒理實(shí)驗(yàn)專(zhuān)用玻璃缸內(nèi)(0.90 m×0.50 m×0.45 m)。此外，對(duì)不攻毒組魚(yú)腹腔注射0.1 mL無(wú)菌蒸餾水。根據(jù)張梟等[18]構(gòu)建的虹鱒病理模型，統(tǒng)計(jì)感染后72 h各組的存活率作為虹鱒抗魯氏耶爾森菌感染的指標(biāo)。

SR=100%×Nf/Ni

式中，SR為存活率(%)，Nf為終末魚(yú)尾數(shù)，Ni為初始魚(yú)尾數(shù)。

1.2.4 樣品采集

撈取各組感染前和感染后活魚(yú)9尾，于間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽(MS-222)溶液中快速麻醉，用2 mL注射器采集尾部靜脈血液至1.5 mL離心管中，4 ℃靜置過(guò)夜后，4 ℃、4 000 r/min離心15 min，吸取上清液即為血清。血清保存于-20 ℃冰箱中待用。

1.2.5 血清生化指標(biāo)分析

采用Beckman公司生產(chǎn)的CYNCHRON CH4 PRO全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行血清的檢測(cè)。檢測(cè)指標(biāo)包括總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、白蛋白與球蛋白比(ALB/GLO)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷草轉(zhuǎn)氨酶與谷丙轉(zhuǎn)氨酶比(AST/ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)、總膽紅素(TBIL)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TCH)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、尿酸(UA)、血糖(GLU)。

1.2.6 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析(One-way analysis of variance,ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用鄧肯氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為顯著性判別標(biāo)準(zhǔn)。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼喂不同復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒增重率的變化

由表2可知，投喂28 d后，復(fù)方1和復(fù)方2組虹鱒的平均終末體質(zhì)量與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異，復(fù)方1組和復(fù)方2組虹鱒增重率與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異，但復(fù)方中草藥組增重率高于對(duì)照組，說(shuō)明兩種復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒增重?zé)o不良影響。

表2 飼喂不同復(fù)方中草藥后對(duì)虹鱒體重的影響Tab.2 The effects of different Chinese herbs compounds on the weight of O.mykiss

注：同一列標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示差異顯著(P<0.05)；標(biāo)相同字母的數(shù)值表示差異不顯著(P>0.05)。下同。

2.2 人工感染虹鱒存活率的變化

對(duì)各組魚(yú)腹腔注射0.1 mL 1.9×107CFU/mL的魯氏耶爾森菌，觀(guān)察各組虹鱒72 h內(nèi)存活情況。由圖1可知，復(fù)方中草藥在投喂28 d后，能明顯提高虹鱒對(duì)魯氏耶爾森菌的抵抗力。對(duì)照組攻毒后，存活率為47.5%，復(fù)方1攻毒組與攻毒對(duì)照組和復(fù)方2組相比，存活率無(wú)顯著性差異。其中，復(fù)方2攻毒組存活率為57.5%，顯著高于攻毒對(duì)照組。

圖1 不同中草藥對(duì)感染魯氏耶爾森菌后的虹鱒存活率的影響Fig.1 Effects of different Chinese herbs compounds on the survival rate of O.mykiss infected with Y.ruckeri

2.3 飼喂不同復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒血清生化指標(biāo)的變化

2.3.1 虹鱒血清中蛋白含量的變化

由表3可知，攻毒后，各組TP、ALB和GLO含量相比攻毒前均有所降低，但復(fù)方2組TP、ALB和GLO含量明顯高于攻毒對(duì)照組。各組攻毒后白球比例無(wú)顯著性差異，但復(fù)方2組比值略高于對(duì)照組。

2.3.2 虹鱒血清中部分酶活性的變化

由表4可知，復(fù)方2組緩解魯氏耶爾森菌引起的應(yīng)激效果較好。攻毒后，復(fù)方2組ALT活性低于對(duì)照組，兩組復(fù)方AST活性均低于對(duì)照組，對(duì)照組ALP活性降低了77.11%，復(fù)方1組降低了85.93%，復(fù)方2組降低了57.09%，復(fù)方2組的下降幅度小于對(duì)照組，且復(fù)方2組ALP活性明顯高于攻毒對(duì)照組。攻毒對(duì)照組LDH活性升高為原來(lái)的1.31倍，復(fù)方1組LDH活性雖有所升高，但低于攻毒對(duì)照組。復(fù)方2組LDH活性相比攻毒前降低了39.77%。

表3 飼喂不同復(fù)方后虹鱒血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白及白/球蛋白比例的變化Tab.3 The contents of total protein,albumin,and globulin,and the ratio of albumin content to globulin content in the serum of O.mykiss by different Chinese herbs compounds

表4 飼喂不同復(fù)方后虹鱒血清中部分酶活性的變化Tab.4 The changes of enzyme activity in serum of O.mykiss fed with different Chinese herbs compounds U/L

2.3.3 虹鱒血清中總膽紅素、尿素氮、肌酐和尿酸含量的變化

由表5可知，復(fù)方中草藥組對(duì)腎臟具有一定保護(hù)效果。攻毒后，兩個(gè)復(fù)方組TBIL、BUN和CREA含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，UA含量均顯著低于攻毒對(duì)照組。

2.3.4 虹鱒血清中甘油三酯、總膽固醇和血糖含量的變化

由表6可知，攻毒后，兩個(gè)復(fù)方組TG和TCH含量與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異。但復(fù)方1組TG含量低于對(duì)照組，復(fù)方2組TG含量高于對(duì)照組，復(fù)方1組TCH含量低于對(duì)照組，復(fù)方2組TCH含量高于對(duì)照組。各組攻毒后血清葡萄糖含量無(wú)顯著性差異。

表5 飼喂不同復(fù)方后虹鱒血清中總膽紅素、尿素氮、肌酐和尿酸含量的變化Tab.5 The contents of total bilirubin,urea nitrogen,creatinine and uric acid in the serum of O.mykiss by different Chinese herbs compounds

表6 飼喂不同復(fù)方后虹鱒血清中甘油三酯、總膽固醇和血糖含量的變化Tab.6 The contents of triglycerides,total cholesterol and blood glucose the serum of O.mykiss by different Chinese herbs compounds mmol/L

3 討論

自然條件下魯氏耶爾森菌通過(guò)魚(yú)鰓和皮膚從血液擴(kuò)散到其他組織[19]，而腹腔注射是常用的血源性感染細(xì)菌的方式[20]，因此，本實(shí)驗(yàn)選取腹腔注射的方式來(lái)繞過(guò)體表防御機(jī)制。

黃芪能夠改善動(dòng)物由中毒引起的應(yīng)激，維持細(xì)胞膜及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性，由金銀花、半枝蓮和扁蓄等醇提而成的藥液可通過(guò)延長(zhǎng)細(xì)菌對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的方式抑制其生長(zhǎng)繁殖[21]。陶健等[22]采用二倍稀釋法研究了16種中藥單方及5種復(fù)方對(duì)魯氏耶爾森菌的最小抑菌濃度，發(fā)現(xiàn)黃芩抑菌效果最好，其MIC均為0.028 g/mL。而大黃、黃柏、黃芩復(fù)方按5∶3∶2的配比對(duì)魯氏耶爾森菌的抑菌效果最佳，其MIC為0.057 g/mL。因此，本實(shí)驗(yàn)選取黃芩、大黃、黃柏等中草藥作為預(yù)防細(xì)菌性應(yīng)激損傷的實(shí)驗(yàn)藥物，其抑菌作用機(jī)理主要體現(xiàn)在對(duì)免疫器官、細(xì)胞及體液免疫的調(diào)節(jié)和對(duì)細(xì)胞因子的影響上。其中起調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的成分主要有多糖、生物堿、蒽類(lèi)、揮發(fā)油、有機(jī)酸等，主要通過(guò)抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成、破壞細(xì)胞膜通透性、干擾蛋白質(zhì)和核酸合成等方式起到抑殺病菌的作用[23]。此外，中草藥有效成分也可激活網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞及補(bǔ)體，誘生多種細(xì)胞因子來(lái)調(diào)節(jié)魚(yú)體免疫力，進(jìn)而起到防控目的[24]。

3.1 中草藥復(fù)方對(duì)虹鱒生長(zhǎng)和抗魯氏耶爾森菌感染的影響

中草藥添加劑不僅能提高水產(chǎn)動(dòng)物免疫力，還具有促生長(zhǎng)，提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的作用[25]。本實(shí)驗(yàn)中，投喂28 d中草藥復(fù)方后，復(fù)方組的增重率與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，說(shuō)明飼喂兩種復(fù)方添加劑對(duì)虹鱒機(jī)體增重方面無(wú)抑制作用。

復(fù)方1組和復(fù)方2組在感染魯氏耶爾森菌后存活率均高于攻毒對(duì)照組，且復(fù)方2組存活率顯著高于攻毒對(duì)照組，復(fù)方1組存活率次之，攻毒對(duì)照組最低。表明兩種復(fù)方中草藥飼料添加劑能夠增強(qiáng)魚(yú)體感染魯氏耶爾森菌的抗應(yīng)激能力，且復(fù)方2組效果較好。Adel等[26]在虹鱒飼料中補(bǔ)充刺蕁麻(Urticadioica)植物提取物，用魯氏耶爾森氏菌感染后觀(guān)察到飼喂不同水平的植物添加劑的實(shí)驗(yàn)組死亡率在20%～50%，且添加3%刺蕁麻的實(shí)驗(yàn)組死亡率最低，具有最高的抗性。Bulfon等[27]在虹鱒飼料中添加人參提取物進(jìn)行了為期10周的投喂，魯氏耶爾森氏菌侵染實(shí)驗(yàn)表明添加人參提取物的實(shí)驗(yàn)組死亡率更低。本實(shí)驗(yàn)中草藥提高實(shí)驗(yàn)組存活率的結(jié)果與這相似。

3.2 中藥復(fù)方對(duì)虹鱒血清生化指標(biāo)的影響

3.2.1 復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒血清蛋白含量的影響

血清生化指標(biāo)反映魚(yú)體的健康狀況，營(yíng)養(yǎng)水平和生理狀態(tài)，魚(yú)體在應(yīng)激環(huán)境中的變化必然會(huì)體現(xiàn)在血液中[28]。血液中總蛋白(TP)反映機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收、合成、分解等代謝狀況。血清白蛋白(ALB)可以結(jié)合和運(yùn)輸內(nèi)源性與外源性物質(zhì)，具有維持血液滲透壓，清除自由基，抗凝血等生理功能，而球蛋白(GLO)在一定程度上反映機(jī)體的免疫功能[29]。此外，肝臟是合成蛋白質(zhì)的重要器官，肝細(xì)胞受損尤其影響ALB含量的降低[30]。紀(jì)利芹等[31]用添加β-葡聚糖的飼料飼喂虹鱒后，進(jìn)行殺鮭氣單胞菌人工感染實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)各攻毒組較攻毒前TP含量顯著降低。徐曉津等[30]用哈維氏弧菌感染大黃魚(yú)，研究發(fā)現(xiàn)病魚(yú)組蛋白含量均極顯著低于對(duì)照組。這與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相一致，究其原因可能是被感染魚(yú)體自身消耗蛋白質(zhì)，并且伴隨肝臟受損而蛋白質(zhì)合成功能減退。本實(shí)驗(yàn)組復(fù)方2攻毒后蛋白含量降低幅度小，且ALB含量明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明復(fù)方2對(duì)由魯氏耶爾森菌感染引起的肝臟損傷具有一定的保護(hù)作用。這種作用可能是復(fù)方2中含有的多糖、有機(jī)酸等營(yíng)養(yǎng)活性物質(zhì)，促進(jìn)了細(xì)胞增殖和蛋白質(zhì)的合成，抑制細(xì)胞凋亡，從而提高機(jī)體免疫和抗應(yīng)激能力[32]。

3.2.2 復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒血清部分酶活性的影響

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)是肝臟中重要的指示酶，正常情況下，血清中轉(zhuǎn)氨酶活性較低，當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激損傷或者肝臟等組織發(fā)生病變時(shí)，細(xì)胞通透性增大，細(xì)胞破裂導(dǎo)致胞內(nèi)酶進(jìn)入血液，使血清中酶活性升高[33]。夏斌鵬等[33]對(duì)虹鱒采取慢性熱應(yīng)激的研究，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組ALT和AST活性隨溫度的升高而升高，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。本實(shí)驗(yàn)復(fù)方2組感染后ALT活性低于對(duì)照組，這可能是由于復(fù)方2組抑制了細(xì)胞增殖活性的降低，調(diào)節(jié)多種細(xì)胞因子來(lái)保護(hù)肝細(xì)胞受損[13]。提示復(fù)方2組在病原菌入侵的情況下能夠改善轉(zhuǎn)氨酶活性異常上升，緩解肝臟受損的效果更好。堿性磷酸酶(ALP)可以加速物質(zhì)的攝取，直接參與機(jī)體代謝過(guò)程，調(diào)控鈣磷比、參與合成和分泌蛋白質(zhì)，為ADP磷酸化為ATP提供更多的無(wú)機(jī)磷酸[34]。另有文獻(xiàn)表明，ALP參與維護(hù)腸道微生物的動(dòng)態(tài)平衡，在被致病菌感染情況下可以清除腸道內(nèi)毒素，對(duì)腸道微生態(tài)環(huán)境具有一定調(diào)控作用[35]。本實(shí)驗(yàn)中，復(fù)方1組攻毒后ALP活性顯著降低，而復(fù)方2組則顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明復(fù)方2能夠有效促進(jìn)虹鱒在病原菌入侵情況下進(jìn)行機(jī)體代謝，對(duì)腸道健康具有一定保護(hù)作用。乳酸脫氫酶(LDH)作為一種參與糖酵解和糖異生的重要酶類(lèi)，大量存在于腎臟中。LDH釋放過(guò)多會(huì)轉(zhuǎn)化為乳酸，乳酸在組織內(nèi)大量堆積將造成機(jī)體pH值下降，對(duì)機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝造成影響。本實(shí)驗(yàn)中，復(fù)方2組LDH活性顯著低于對(duì)照和復(fù)方1組，說(shuō)明復(fù)方2對(duì)腎臟具有一定的保護(hù)作用。

3.2.3 復(fù)方中草藥對(duì)虹鱒血清中總膽紅素、尿素氮、肌酐和尿酸含量的影響

血清中膽紅素(TBIL)主要由衰老紅細(xì)胞破壞后的血紅蛋白衍化而來(lái)，可作為評(píng)價(jià)肝組織損傷的指標(biāo)之一[36]。血液中尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)和尿酸(UA)含量可作為判斷腎臟功能受損的指標(biāo)[37]。而甘油三酯(TG)和總膽固醇(TCH)作為生命代謝的必需物質(zhì)以不同的脂蛋白形式儲(chǔ)存于肝臟等細(xì)胞，能夠反映機(jī)體攝取和合成蛋白的能力[38]。當(dāng)魚(yú)體受到應(yīng)激因素影響時(shí)，其體內(nèi)脂肪作為能源物質(zhì)會(huì)被消耗。血糖(GLU)作為一種重要的能源物質(zhì)，在魚(yú)體中處于一種動(dòng)態(tài)平衡[38]，魚(yú)體健康狀況和外界應(yīng)激因素都會(huì)影響?hù)~(yú)體GLU的水平。紀(jì)利芹等[31]對(duì)飼喂β-葡聚糖的虹鱒進(jìn)行殺鮭氣單胞菌的感染，研究發(fā)現(xiàn)，感染殺鮭氣單胞菌第4 d后，所有感染組血清TG和TCH含量顯著低于初始水平，且各組TG和TCH含量高于對(duì)照組，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。本研究攻毒后，復(fù)方組除UA含量顯著低于對(duì)照組外，TBIL、BUN和CREA含量無(wú)顯著差異，復(fù)方2組TG和TCH含量感染前后變化幅度最小，說(shuō)明在細(xì)菌感染過(guò)程中，復(fù)方中草藥組對(duì)腎臟功能造成的負(fù)擔(dān)較小，對(duì)腎臟代謝功能的損傷小，且復(fù)方2組一定程度減弱機(jī)體應(yīng)激造成的肝臟損傷。之前的研究結(jié)果顯示，魚(yú)體處于應(yīng)激環(huán)境時(shí)，GLU含量會(huì)有所升高。本實(shí)驗(yàn)各組在感染魯氏耶爾森菌后GLU含量均有所降低，各組GLU含量無(wú)顯著性差異，這可能是由于機(jī)體為抵抗細(xì)菌應(yīng)激而將葡萄糖分解為ATP來(lái)提供能量，使得血糖水平降低[39]。