γ-干擾素釋放試驗在結(jié)核病診斷中的臨床應(yīng)用研究

王微微

【摘 要】??目的： 本研究旨在評估γ-干擾素釋放試驗（IGRA）在臨床隨機(jī)樣本中診斷結(jié)核病的效果。 方法： 2019年2月至2019年6月期間住我市胸科醫(yī)院的1080例結(jié)核病疑似病例均接受外周血結(jié)核分歧桿菌特異性抗原刺激，測定相對γ-干擾素釋放水平，診斷結(jié)果與細(xì)菌學(xué)和臨床診斷結(jié)果作比較。 結(jié)果： 1080例結(jié)核病疑似病例中，848例經(jīng)臨床確診為結(jié)核病。在確診結(jié)核病例中，細(xì)菌學(xué)檢查敏感性為32.68%，A.TB檢測敏感性為92.04%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.001）。在菌陽和菌陰結(jié)核病例中，A.TB檢測陽性率為92.06%和90.04%，差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（p=0.079）。 結(jié)論： γ-干擾素釋放試驗對于菌陰結(jié)核病的診斷有幫助，可以用于臨床結(jié)核病輔助診斷。

【關(guān)鍵詞】? 結(jié)核;γ-干擾素釋放試驗;結(jié)核病診斷;菌陰結(jié)核病

【中圖分類號】R969.4????? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】B?? 【文章編號】1005-0019（2020）05-077-01

結(jié)核病是困擾人類幾千年的惡性傳染病。TB由結(jié)核分支桿菌引起，通常由空氣傳播，肺結(jié)核患者是主要的傳染源。WHO報導(dǎo)，每年有約9百萬新發(fā)的結(jié)核病例，有約兩百萬與結(jié)核病有關(guān)的死亡。2017年全球估計有1000萬人感染結(jié)核病，其中有160萬人死于結(jié)核病 [1] 。中國估計有88.9萬人新感染結(jié)核 [1] ?？刂平Y(jié)核病的流行需要有效的疫苗，新的更有效的治療方法和更好的診斷方法 [2] 。

中國是結(jié)核病的高發(fā)國家之一。近年來，隨著耐藥性結(jié)核病、艾滋病和結(jié)核雙重感染的病例增多，結(jié)核病再次成為嚴(yán)重威脅人類的公共健康問題。結(jié)核是HIV陽性人群中最常見的疾病，在全球范圍內(nèi)的聯(lián)合感染者達(dá)到一千三百萬。

近年來日趨成熟的干擾素釋放分析技術(shù)（IGRA），是一種新的用于結(jié)核桿菌感染的體外免疫診斷方法，具有良好的敏感度和特異性。大量實驗數(shù)據(jù)都顯示，IGRA在潛伏性結(jié)核感染的診斷上顯示出高于結(jié)核菌素皮膚試驗（TST），但是，IGRA在結(jié)核病診斷方面的準(zhǔn)確性仍需要更多的評估 [3] 。

1 對象與方法

1.1 對象 2019年2月1日至2019年6月31日，到哈哈爾濱市胸科醫(yī)院就診住院的結(jié)核病疑似病例，納入標(biāo)準(zhǔn)為有疑似結(jié)核病患者癥狀、體征或影像學(xué)依據(jù)的初診患者共計1080例。其中男性625例，女性455例，平均年齡（55±19）歲。所有病例在接受A.TB檢測時，接受結(jié)核病藥物治療不超過20天。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 每例患者均使用肝素鈉抗凝采血管采集外周血5ml，如患者需進(jìn)行TST，應(yīng)在采血后再注射。采集的外周血應(yīng)在16h內(nèi)進(jìn)行抗原刺激。

1.2.2 γ-干擾素釋放試驗檢測 采樣結(jié)核分支桿菌特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測試劑盒（商品名：A.TB試劑盒，生產(chǎn)商：海口維瑅璦生物研究院）具體步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.3 結(jié)果判斷 當(dāng) N<0.5時，若T-N/P-N ≥0.16為陽性，否則為陰性;當(dāng)0.5≦N <2.5時，若T-N≥1.5為陽性，否則為陰性;當(dāng)N≧2.5時，判為無法確定。

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS19.0 對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。使用χ 2檢驗或者Fisher精確檢驗（n<5時適用）比較各組樣本率。使用McNemar檢驗比較不同檢驗方法的診斷效果。當(dāng)p<0.05時認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 所有病例的臨床診斷結(jié)果 1080例結(jié)核病疑似病例中，根據(jù)結(jié)核病診斷標(biāo)準(zhǔn)臨床醫(yī)生診斷為結(jié)核病678例。其中，細(xì)菌學(xué)檢查陽性353例，影像學(xué)及分子生物等手段確診結(jié)核病482例。

2.2 A.TB試劑盒檢測結(jié)果 1080例結(jié)核病疑似病例都接受了A.TB試劑盒檢測，其中，A.TB檢測陽性994例（92.04%），檢測陰性86例（7.96%）。在經(jīng)臨床醫(yī)生確診的835例結(jié)核病患者中，A.TB檢測陽性753例（90.18%），檢測陰性82例（9.52%）。

2.3? A.TB試劑盒與細(xì)菌學(xué)檢查的診斷效率比較 在1080例結(jié)核病患者中，細(xì)菌學(xué)檢查的陽性率為32.68%（353/1080），與A.TB檢測陽性率92.04%比較，p<0.001，A.TB試劑盒與細(xì)菌性檢查存在顯著性差異。在菌陽和菌陰結(jié)核病例中，A.TB檢測陽性率為92.06%（325/353）和90.04%（434/482），p=0.079，無顯著性差異。

3 討論

快速診斷和治療對結(jié)核病患者是非常重要的預(yù)后因素。在本研究中，A.TB試劑盒在臨床隨機(jī)病例樣本診斷的陽性率為92.04%，明顯高于細(xì)菌學(xué)檢查的陽性率32.68%。另外，A.TB試劑盒在菌陽和菌陰結(jié)核病例診斷中，顯示出相似的陽性率。這兩個結(jié)果都說明A.TB試劑盒在結(jié)核病臨床輔助診斷的效果較好。

本研究中，A.TB試劑盒診斷結(jié)核病的敏感性92.04%，QuantiFERON-TB Gold In-Tube（QFT-GIT）診斷結(jié)核病的敏感性為80% 及T-SPOT.TB診斷結(jié)核病的敏感性為81%? [5] 基本一致。這種現(xiàn)象可能是由于實驗對象的選擇范圍不同，大多數(shù)研究選擇的結(jié)核病例和健康參比都與臨床實踐中遇到的不同，這是影響準(zhǔn)確性評估的因素 [6] 。

菌陰結(jié)核病的診斷一直是結(jié)核病診斷上的難題。已經(jīng)有研究評估了IGRA在菌陰結(jié)核病診斷上的使用效果，但是結(jié)論并不一致 [6，] 。本研究中，A.TB試劑盒在菌陽和菌陰結(jié)核病診斷中顯示了相似的敏感性。這一結(jié)果值得在未來研究中進(jìn)一步驗證。

參考文獻(xiàn)

[1]? WHO. Global tuberculosis control. World health organization report 2018.

[2] Abu-Raddad LJ， Sabatelli L， Achterberg JT， et al. Epidemiological benefits of more-effective tuberculosis vaccines， drugs， and diagnostics. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009; 106： 13980-13985.

[3] Lalvani A， Pareek M. Interferon gamma release assays： Principles and practice. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2010; 28： 245-252.

[4] Lijmer JG， Mol BW， Heisterkamp S， et al. Empirical evidence of design-related bias in studies of diagnostic tests. JAMA. 1999; 282： 1061-1066.