孫澤兵
河北省清河縣中心醫(yī)院藥劑科,河北 邢臺(tái) 054800
動(dòng)物骨中的蛋白主要為膠原蛋白,膠原蛋白經(jīng)酶解、分離純化等得到的膠原蛋白肽,具有保護(hù)骨健康、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)等生理活性,對(duì)于改善人體健康具有重要意義[1]。本文就骨膠原蛋白肽防治骨質(zhì)疏松的療效進(jìn)行研究,為后續(xù)開發(fā)提供參考。
1.1 樣品 骨膠原蛋白肽粉(牛骨來源,肽含量96%)、碳酸鈣(鈣含量40%)。
1.2 儀器 原子吸收分光光度計(jì),骨密度儀、電子天平。
1.3 方法及分組 60只雌性SD大鼠,按體重隨機(jī)分為假手術(shù)組,溶劑對(duì)照組、碳酸鈣組及高、中、低劑量組,每組10只。飼養(yǎng)一周后,所有大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉,劑量3 ml/kg,仰臥位固定,于臍與恥骨前緣中點(diǎn)沿腹底壁正中線向上側(cè)后方切開腹白線及腹膜,打開腹腔,找到子宮,沿子宮角向前導(dǎo)出卵巢,結(jié)扎卵巢系膜血管后摘除兩側(cè)卵巢。假手術(shù)組僅摘除少量筋膜,不摘除卵巢。將子宮還納后分別縫合皮膚,并用碘酒消毒。術(shù)后肌內(nèi)注射青霉素 45萬U/只,連續(xù)3d。碳酸鈣組灌胃給予碳酸鈣(100mg/kg);高、中、低劑量組灌胃給予骨膠原蛋白肽粉(250mg/kg、175mg/kg、100mg/kg)。溶劑對(duì)照組灌胃給予1%羧甲基纖維素鈉溶液。每日1次,連續(xù)90d。每周稱重,并調(diào)整灌胃量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死大鼠,取出大鼠兩側(cè)股骨,去除附著的結(jié)締組織與肌肉,左側(cè)股骨在烘箱中烘至恒重,稱量骨重,測(cè)定骨鈣含量。右側(cè)股骨測(cè)定股骨中點(diǎn)與遠(yuǎn)心端的骨密度[2]。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用 SPSS 17.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。所有數(shù)據(jù)以(Mean±SD)表示,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
表1 對(duì)大鼠骨重、骨鈣含量及骨密度的影響(Mean±SD)
2.1 對(duì)大鼠體重的影響 實(shí)驗(yàn)開始前,各組間大鼠體重?zé)o顯著差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,溶劑對(duì)照組與假手術(shù)組大鼠體重有顯著差異(P>0.05);碳酸鈣組、低、中、高三個(gè)劑量組與溶劑對(duì)照組相比,大鼠體重?zé)o明顯差異(P>0.05),說明造模成功,且受試樣品對(duì)大鼠體重?zé)o影響。
2.2 對(duì)大鼠骨重、骨鈣含量及骨密度的影響 與假手術(shù)組相比,溶劑對(duì)照組股骨的骨密度及骨重、骨鈣含量均顯著降低(P<0.05),提示造模成功。碳酸鈣組、高、中劑量組的骨密度、骨鈣含量均較溶劑對(duì)照組顯著提高(P<0.05)。碳酸鈣組、高劑量組的骨重均較溶劑對(duì)照組顯著提高(P<0.05),見表1。
雌性大鼠切除卵巢模型是最常用的骨質(zhì)疏松模型,它能正確的模擬絕經(jīng)期婦女由于激素缺乏引起的骨質(zhì)疏松特征。切除卵巢的大鼠,骨吸收增強(qiáng),骨基質(zhì)中的膠原分解加速,成骨細(xì)胞合成減少[3]。膠原蛋白肽夠調(diào)節(jié)骨代謝平衡,通過增強(qiáng)骨合成,降低骨吸收,使身體骨量增加[1]。本研究顯示,高、中劑量組的骨密度、骨鈣含量和高劑量組的骨重均較溶劑對(duì)照組顯著提高(P<0.05)。由此說明,骨膠原蛋白肽粉具有增加骨密度的功效。