對單個嘧菌酯樣品分析方法改進(jìn)

鄭育新

(江西省化學(xué)工業(yè)研究所，江西 南昌 330029)

一、嘧菌酯基本情況

嘧菌酯中文別名：(E)-[2-[6-(2-氰基苯氧基)嘧啶-4-基氧]苯基]-3-甲氧基丙烯酸甲酯；阿米西達(dá)；(E)-2-{2-[6(2-氰基苯氧基)嘧啶-4-基氧]苯基}-3-甲氧基丙烯酸甲。

該產(chǎn)品是甲氧基丙烯酸酯(Strobilurin)類殺菌劑，高效、廣譜，對幾乎所有的真菌界病害如白粉病、銹病、穎枯病、網(wǎng)斑病、霜霉病、稻瘟病等均有良好的活性?？捎糜谇o葉噴霧、種子處理，也可進(jìn)行土壤處理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、馬鈴薯、果樹、蔬菜、咖啡、草坪等。嘧菌酯不能與殺蟲劑乳油，尤其是有機(jī)磷類乳油混用，也不能與有機(jī)硅類增效劑混用，會由于滲透性和展著性過強(qiáng)引起藥害。

在保護(hù)地番茄上，曾經(jīng)發(fā)現(xiàn)過嘧菌酯的藥害，番茄幼苗移栽2周內(nèi)須謹(jǐn)慎使用。研究發(fā)現(xiàn)，蔬菜白粉病已對嘧菌酯產(chǎn)生了抗性，連續(xù)施用2次以上，效果有明顯下降。嘧菌酯的原藥及復(fù)配均已過專利期，2013年3月開始，國內(nèi)有大量廠家進(jìn)行了單劑和復(fù)配產(chǎn)品的生產(chǎn)與推廣，對其它類別殺菌劑產(chǎn)生了較大的沖擊。

二、試驗(yàn)部分：

在相同的色譜條件下，試樣溶液中某一色譜峰的保留時間與標(biāo)樣溶液中嘧菌酯的色譜峰保留時間一致，其相對差值應(yīng)在1.5%以內(nèi)。

1.試驗(yàn)方法

1.1 國家標(biāo)準(zhǔn)：試樣用甲醇溶解，以乙腈和水(磷酸調(diào)節(jié)pH=2.5)為流動相，使用以Agilent Tc-C18(2)為填料的不銹鋼柱，對試樣中的嘧菌酯進(jìn)行高效液相色譜分離和測定。

1.2 修正方法：試樣用甲醇溶解，以甲醇、乙腈和水(磷酸調(diào)節(jié)pH=2.5)為流動相，使用以Agilent Tc-C18為填料的不銹鋼柱和DAD檢測器，對試樣中的嘧菌酯進(jìn)行高效液相色譜分離和測定。

2.試劑和溶液

2.1 甲醇：色譜純，使用前經(jīng)0.45μm濾膜過濾；

2.2 乙腈：色譜純，使用前經(jīng)0.45μm濾膜過濾；

2.3 水：二次蒸餾水

2.4 嘧菌酯標(biāo)樣，已知含量P=97.9%

2.5 未知含量可濕性粉劑(控制指標(biāo)，噻呋酰胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%30.0±1.0)

3.儀器

3.1 安捷倫1260 高效液相色譜儀 DAD檢測器 色譜柱：250X4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Agilent Tc-C18填充物，粒徑5μm；

3.2 超聲波清洗器

3.3 過濾器：濾膜孔徑約0.45μm

3.4 微量進(jìn)樣器：100μL。

4.色譜操作條件

4.1 國家標(biāo)準(zhǔn)操作條件：φ(乙腈：水)=45：55 流量：1.0mL 檢測波長：254nm進(jìn)樣量：20μL；

4.2 修正方法操作條件：φ甲醇：乙腈：水=25：25：50 流量：1.0mL檢測波長：254nm進(jìn)樣量：20μL；

5.測定步驟：

5.1 標(biāo)樣溶液的配置 稱取嘧菌酯標(biāo)樣m標(biāo)1=0.0424g置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。然后使用移液管分別轉(zhuǎn)移上述溶液5mL置于同一50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，制成混合標(biāo)樣備用。

5.2 樣品溶液的配置 稱取嘧菌酯可濕性粉劑試樣，標(biāo)記樣品A和B，mA=0.2260g，mB= 0.2202g mC=0.1976g分別置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，然后使用移液管分別轉(zhuǎn)移該溶液5mL至50mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻、待測。

待儀器基線穩(wěn)定后，分別用企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和修正方法兩種操作條件進(jìn)行檢測。待相鄰兩針標(biāo)樣峰面積相對變化小于1.5%時，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。

三、典型色譜圖測定結(jié)果分析

圖1-圖4為典型色譜圖。

圖1 國標(biāo)條件下嘧菌酯標(biāo)樣典型色譜圖

圖2 國標(biāo)條件下嘧菌酯樣品典型色譜圖

圖3 修正方法條件下嘧菌酯標(biāo)樣典型色譜圖

圖4 修正方法條件下嘧菌酯樣品典型色譜圖

根據(jù)三個樣品的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，我們發(fā)現(xiàn)國標(biāo)方法中樣品峰有拖尾情況，而拖尾原因有很多，第一步我們換用流動相稀釋樣品，發(fā)現(xiàn)沒有效果，第二步我們采用改變流動相方法才使得拖尾峰分離。最終我們用國標(biāo)方法得出嘧菌酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)為31.5%不合格，而用我們修正的方法得出的嘧菌酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)為31.0%合格，樣品中有個雜峰沒有完全分離，導(dǎo)致數(shù)據(jù)失真。最后我們用全波段掃描對圖譜目標(biāo)峰進(jìn)行分析，修正方法豐純度達(dá)到999.5，而國標(biāo)方法豐純度僅為975.5。進(jìn)一步驗(yàn)證了我們修正方法對該樣品分析的可靠性。