抗核抗體與體外受精-胚胎移植的結(jié)局分析

陸碧玉 黃誠 李忻琳 唐妮 嚴(yán)提珍( 通訊作者)

（廣西柳州市婦幼保健院<柳州市生殖與遺傳研究所；廣西科技大學(xué)附屬婦產(chǎn)醫(yī)院、兒童醫(yī)院> 廣西 柳州 545001）

隨著不孕不育夫婦的日益增多，輔助生殖技術(shù)的應(yīng)用越來越廣泛。體外受精—胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）廣泛應(yīng)用于輔助生殖技術(shù)中，盡管促排卵方案和胚胎培育技術(shù)有了很大改善，但臨床妊娠率卻始終徘徊在30%～40%。目前對于抗核抗體與胚胎種植結(jié)局的相關(guān)性仍不明確，而其對于卵子發(fā)育和胚胎發(fā)育的影響存在爭議。本文主要采用多重微球流式免疫熒光法對反復(fù)種植失敗的患者進(jìn)行抗核抗體的檢測，同時(shí)觀察ANA 陽性組和ANA 陰性組的IVF/ISCI 患者的一般情況、促排卵情況及胚胎發(fā)育及妊娠結(jié)局，探討ANA 對反復(fù)種植失敗患者IVF/ISCI 胚胎移植結(jié)局的影響。

1.資料與方法

1.1 對象

選取2017 年5 月—2019 年12 月來我院生殖助孕中心進(jìn)行IVF 和/或ICSI 移植的患者200 例，本方案經(jīng)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)，對象已經(jīng)知情同意并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合IVF-ET適應(yīng)癥，兩次或更多次胚胎種植失敗的患者，無卵巢手術(shù)史及放化療史；排除標(biāo)準(zhǔn)：雙方染色體異常，女方子宮形態(tài)異常、自身免疫性疾病。

1.2 ANA 檢測方法

使用AtheNA Muti-Lyte ANA 測試系統(tǒng)（Zues Scientific）同時(shí)測定ANA 和9 種不同的抗核抗體譜（SSA，SSB，Sm，RNP，Scl-70，Jo1，dsDNA，Centrometric B 和組蛋白）。

1.3 IVF-ET 和黃體支持

在陰道B 超引導(dǎo)下，采用單腔取卵針取卵，行IVF 或ICSI授精。

1.4 觀察指標(biāo)

收集患者的受精數(shù)、受精率、正常受精數(shù)、正常受精率、優(yōu)胚數(shù)和優(yōu)胚率等情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，行t 檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 ANA 陽性組和陰性組的胚胎發(fā)育情況比較

受精數(shù)、受精率、正常受精數(shù)、正常受精率兩組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P ＞0.05）；優(yōu)胚數(shù)、優(yōu)胚率陽性組低于陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P ＜0.05）。見表1。

表1 ANA 陽性組和陰性組的胚胎發(fā)育情況（±s）

表1 ANA 陽性組和陰性組的胚胎發(fā)育情況（±s）

項(xiàng)目 陽性組（n=41） 陰性組（n=159） P受精數(shù) 7.51±4.55 7.64±4.25 0.444受精率 72.81(308/423) 72.84(1215/1668) 0.444正常受精數(shù) 6.49±3.82 6.50±3.67 ＞0.05正常受精率 62.88(266/423) 61.99(1023/1668) ＞0.05優(yōu)胚數(shù) 2.56±1.97 3.50±2.29 ＜0.05優(yōu)胚率 40.23(105/261) 54.45(557/1023) ＜0.05

3.討論

ANA 是一組針對細(xì)胞核成分的自身抗體。ANA 主要攻擊的是與細(xì)胞核內(nèi)某些結(jié)構(gòu)結(jié)合的分子如DNA、RNA、蛋白質(zhì)和/或其復(fù)合物等[1-3]。它們通常存在于自身免疫性疾病和風(fēng)濕病患者的血清中，并與蛋白質(zhì)、核酸和蛋白-核酸復(fù)合物結(jié)合。作為血清學(xué)標(biāo)志物，這些抗體具有診斷和預(yù)后意義，并與風(fēng)濕病的各種表現(xiàn)直接相關(guān)。ANA在正常人中的臨床意義尚不清楚(患病率為3.8%～12.8%）。雖然許多血清學(xué)陽性個(gè)體不會發(fā)展成自身免疫性疾病，但其他個(gè)體可能處于前自身免疫性狀態(tài)，因?yàn)锳NA 陽性可能比明顯的疾病發(fā)生早許多年[4-5]。

近年來的研究顯示，自身抗體除與自身免疫性疾病有關(guān)外，自身免疫因子還可能在不孕癥的發(fā)病機(jī)理中起重要作用[6]。自身抗體中的ANA 與包括反復(fù)自然流產(chǎn)、不孕及IVF-ET 術(shù)后的植入失敗在內(nèi)的多種不良事件關(guān)系密切[7],為了研究生殖免疫，Zhong 等[8]集中研究了自身免疫因子和體外受精（IVF）/胞漿內(nèi)精子注射（ICSI）結(jié)果，其中重點(diǎn)是針對自身抗體。通過檢查特定自身抗體與IVF/ICSI 結(jié)果之間的關(guān)聯(lián)，可以揭示潛在的導(dǎo)致IVF/ICSI 失敗的致病性自身抗體[9]。ANA 可穿透細(xì)胞膜產(chǎn)生細(xì)胞毒作用(ADCC)，使細(xì)胞有絲分裂進(jìn)程中斷，DNA 合成受阻，導(dǎo)致移植失敗?？筪sDNA 抗體具有細(xì)胞毒性,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[10]。而自身抗體中的ANA 與不孕不育及種植失敗的研究越來越受到重視，其可能導(dǎo)致的妊娠結(jié)局也是近年來研究的熱點(diǎn)。

本結(jié)果顯示ANA 陽性組與ANA 陰性組比較，優(yōu)胚數(shù)和優(yōu)胚率下降.與大部分研究結(jié)果類似，ANA 會影響IVF/ICSI 的妊娠結(jié)局。本文主要針對兩次及兩次以上的種植失敗的患者，而以往的研究主要針對首次接受IVF/ICSI 的患者，故雖都表明會影響妊娠結(jié)局，但是影響的指標(biāo)不同。ANA 對于不同種植次數(shù)，不同分組的IVF/ICSI 患者妊娠結(jié)局的影響的指標(biāo)不同，但提示都具有一定影響。

但是，確切的致病機(jī)制尚不清楚，仍需要更多的研究來解釋ANA 影響妊娠的具體免疫機(jī)制。自身免疫抗體陽性的不育婦女的治療方法包括阿司匹林，阿司匹林加肝素，腎上腺皮質(zhì)激素，腎上腺皮質(zhì)激素加阿司匹林和免疫球蛋白等。Jiao 等[11]的研究顯示在誘導(dǎo)排卵前開始聯(lián)合使用潑尼松和阿司匹林可以提高ANA陽性患者的受精率、妊娠率和著床率，降低流產(chǎn)率。