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    飼料中添加不同油脂對(duì)草魚生長(zhǎng)、肌肉品質(zhì)的影響

    2020-03-25 03:10:06張正洲王自蕊姜文灝胡重華張文平周秋白
    關(guān)鍵詞:豆油魚油草魚

    楊 鑫,張正洲,劉 瑜,王自蕊,姜文灝,高 淼,王 穎,胡重華,張文平,周秋白,宋 明

    (江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,江西 南昌 330045)

    【研究意義】脂肪作為魚類重要能量的來(lái)源,不僅能增加飼料的適口性,促進(jìn)脂溶性維生素的消化吸收,起到節(jié)約蛋白質(zhì)的作用,同時(shí)也是生物體內(nèi)膜脂及機(jī)體合成多不飽和脂肪酸(PUFA)的主要來(lái)源[1-3]。此外,脂肪有一個(gè)其它物質(zhì)無(wú)法取代的作用,即供給魚體所需要的必需脂肪酸?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】實(shí)驗(yàn)己經(jīng)證明,食物脂肪所提供的必需脂肪酸特別是n-3系列高度不飽和脂肪酸(HUFA)能提高水產(chǎn)動(dòng)物親體的繁殖力[4-5]以及提高水產(chǎn)動(dòng)物幼體的生長(zhǎng)率、存活率[6-7]。對(duì)淡水魚而言,脂肪的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值多取決于其不飽和脂肪酸的種類及含量,飼料中添加很少的該類脂肪酸,尤其是n-3系列與n-6系列的合理搭配,可以明顯提高魚類的生長(zhǎng)速度[3,8]。【本研究切入點(diǎn)】魚油中含有大量的不飽和脂肪酸,是魚類配合飼料的理想脂肪源[9],具有多種優(yōu)勢(shì)[10]。但近年來(lái),隨著海洋資源的逐年減少,魚油的產(chǎn)量不斷降低[11],而價(jià)格則不斷上升,因此在飼料中降低魚油的用量來(lái)降低飼料的成本是一種趨勢(shì)?!緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】草魚(Ctenopharyngodon idellus)作為四大家魚之一,其養(yǎng)殖規(guī)模極大,據(jù)《中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒2018》[12]統(tǒng)計(jì),2017年草魚產(chǎn)量達(dá)535萬(wàn)t。因此,在草魚飼料中添加恰當(dāng)?shù)闹驹捶浅V匾?。本試?yàn)以豆油、魚油及二者均勻混合的油脂作為飼料中的脂肪源,以草魚為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,探究飼料中添加不同脂肪源對(duì)草魚生長(zhǎng)、肌肉營(yíng)養(yǎng)成分及脂肪酸組成的影響。

    1 材料方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

    試驗(yàn)用草魚及基礎(chǔ)樣草魚來(lái)源于江西省南昌市東西湖區(qū)揚(yáng)子洲農(nóng)場(chǎng),初期采用常規(guī)飼料(無(wú)外加脂肪)馴食,試驗(yàn)分組時(shí),平均體質(zhì)量為(1 318.88±2.47)g/尾,每組設(shè)3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10尾。

    1.2 試驗(yàn)飼料

    試驗(yàn)日糧分為3組,以粉碎后過(guò)60目的魚粉、豆粕、菜粕、玉米等作原料,配制為3種等能等氮飼料。第1組為豆油組,以4%豆油作為脂肪源,第2組為混油組,以2%豆油+2%魚油作為脂肪源,第3組為魚油組,以4%魚油作為脂肪源。飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。飼料配置完成后經(jīng)制粒機(jī)調(diào)質(zhì)制粒,后風(fēng)干并保存于-20℃冰箱備用。其中,豆油為一級(jí)大豆油,魚油為深海魚油,購(gòu)買自浙江聯(lián)興飼料科技有限公司。

    表1 飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab.1 Composition and nutrient levels of experimental diets(DM basis) %

    1.3 飼養(yǎng)管理

    養(yǎng)殖試驗(yàn)在江西農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)基地進(jìn)行。在面積為200 m2(平均水深1.5 m)的池塘中設(shè)置網(wǎng)箱,網(wǎng)箱規(guī)格為2 m×3 m×1.2 m,將各組試驗(yàn)草魚隨機(jī)分到9個(gè)網(wǎng)箱中。正式試驗(yàn)開始前先用試驗(yàn)料馴化1周,然后開始正式投喂,于每天08:00,晚18:00投喂,以飽食為準(zhǔn),試驗(yàn)期為60 d,試驗(yàn)期間水溫25~32℃,溶解氧濃度>8.0 mg/L,pH 7.8~8.4,氨氮濃度<0.2 mg/L,亞硝酸鹽濃度<0.01 mg/L。

    1.4 樣品采集

    開始養(yǎng)殖試驗(yàn)前,隨機(jī)取2尾草魚,取其背部肌肉、腹部肌肉保存,用于分析未投喂試驗(yàn)料之前其脂肪酸含量,記為基礎(chǔ)樣(Basis)。養(yǎng)殖60 d后,禁食2 d,分別撈取各網(wǎng)箱草魚,將水濾干后稱量并記錄尾數(shù),用于計(jì)算生長(zhǎng)速度。試驗(yàn)期間統(tǒng)計(jì)各組草魚飼料投喂量,用于計(jì)算餌料系數(shù);每組隨機(jī)取兩條魚解剖并測(cè)量形體參數(shù),用于計(jì)算生長(zhǎng)指標(biāo);將所解剖魚腹腔內(nèi)脂肪剝離干凈后稱量,用于計(jì)算腹脂率;最后取草魚背部肌肉、腹部肌肉保存,用于分析脂肪酸含量及常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分。相關(guān)計(jì)算公式如下:

    1.5 分析方法

    飼料和肌肉的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分含量分別采用105℃烘干法(GB/T 6435—2014)、凱氏定氮法(GB/T 6432—2018)、索氏抽提法(GB/T 6433—2006)和灼燒稱重法(GB/T 6438—2007)測(cè)定。

    脂肪酸含量采用氣相色譜儀測(cè)定:儀器型號(hào)為Agilent-6890型氣相色譜儀。將樣品置于冷凍干燥機(jī)(寧波新芝生物科技股份有限公司,SCIENTZ-10N型)中干燥至恒質(zhì)量,然后用研缽磨碎并混勻,再取一定量的樣品置于水解管中,并加入4 mL氯乙酰甲醇溶液(氯乙酰甲醇=1+10),及1 mL C11:0(1.0 mg/mL)內(nèi)標(biāo)溶液,另補(bǔ)加1 mL正己烷。密封置于80℃水浴反應(yīng)2 h,取出冷卻后加7%碳酸鉀5 mL,振搖均勻,以1 000 r/min的速度離心5 min后過(guò)0.2 μm濾膜裝入進(jìn)樣小瓶,上機(jī)檢測(cè)。氣相色譜條件:色譜柱為DB-23(60.0 m×250 μm×0.25 μm),柱溫采用程序升溫(260 ℃max);氫火焰離子檢測(cè)器(FID),F(xiàn)ID 270℃;載氣為高純氦氣,流速為2.0 mL/min;分流比為30∶1,進(jìn)樣量為1 μL。

    1.6 數(shù)據(jù)處理

    試驗(yàn)結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SE)表示,用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。先對(duì)數(shù)據(jù)作單因素方差分析(one-way ANOVA),若試驗(yàn)組間差異顯著,再用Duncan’s進(jìn)行多重比較,顯著水平為P<0.05。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同脂肪源對(duì)草魚生長(zhǎng)性能及飼料利用效果的影響

    由表2可知,在試驗(yàn)開始時(shí),3組魚的體質(zhì)量無(wú)顯著性差異(P>0.05),經(jīng)60 d的飼養(yǎng)期后發(fā)現(xiàn),綜合比較而言,3組試驗(yàn)魚的生長(zhǎng)效果以第2組最好,其增重率(WGR)為(37.09±1.74)%,顯著高于第3組(P<0.05),第1組次之,其增重率(WGR)為(32.27±0.73)%,但與第2組及第三組均無(wú)顯著性差異(P>0.05);特定生長(zhǎng)率(SGR)的結(jié)果與增重率(WGR)相同;肝體指數(shù)(HSI)以第3組魚油組最低,顯著低于第1組(P<0.05),而與第2組混油組無(wú)顯著差異,混油組的肝體指數(shù)(HSI)為(2.70±0.10)%,與其他二組均不顯著(P>0.05);3組試驗(yàn)魚的腹脂率(IPFratio)、肥滿度(CF)、飼料系數(shù)(FCR)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

    表2 不同脂肪源對(duì)草魚生長(zhǎng)性能及飼料利用效果的影響Tab.2 Effects of different lipid diets on the growth performance and feed utilization of Ctenopharyngodon idellus

    2.2 不同脂肪源對(duì)草魚肌肉常規(guī)組成的影響

    表3為試驗(yàn)結(jié)束后,草魚肌肉常規(guī)組成的含量。由表3可知,3組試驗(yàn)魚的背肌及腹肌水分含量無(wú)顯著性差異(P>0.05);背肌及腹肌中粗蛋白含量均為混油組最高,顯著高于其他兩組(P<0.05),魚油組次之,豆油組最低,且豆油組與魚油組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);背肌中粗脂肪含量為混油組最高,其值為(3.00±0.08)%,顯著高于其他二組(P<0.05),豆油組與魚油組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);而腹肌中粗脂肪含量則以豆油組最高,顯著高于混油組及魚油組(P<0.05),混油組與魚油組腹肌中粗脂肪含量則無(wú)顯著性差異(P>0.05);背肌及腹肌中粗灰分含量均以混油組最高,豆油組次之,魚油組最低,但3者之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

    表3 不同脂肪源對(duì)草魚肌肉常規(guī)組成的影響Tab.3 Effects of different lipid diets on the muscle composition of Ctenopharyngodon idellus

    2.3 不同脂肪源對(duì)草魚肌肉脂肪酸組成的影響

    由表4可知,各組草魚肌肉中都含有大量的C16:0、C18:1n9和C18:2n6,其次為C20:4n6及C22:6n3;比較基礎(chǔ)樣與各組試驗(yàn)魚肌肉所含脂肪酸可知,試驗(yàn)魚經(jīng)60 d投喂后,其肌肉所含脂肪酸種類由22種提高到26種,且飽和脂肪酸所占比例明顯降低,但3組試驗(yàn)魚之間差異不顯著(P>0.05),不飽和脂肪酸所占比例明顯升高,但3組試驗(yàn)魚之間差異不顯著(P>0.05)。隨著飼料脂肪中魚油比例的升高,背肌、腹肌中EPA及DHA的含量也呈上升趨勢(shì),它們?cè)隰~油組中的含量最高,混油組次之,均顯著高于豆油組(P<0.05),但魚油組與混油組相比較差異不顯著(P>0.05),n-3系列的不飽和脂肪酸趨勢(shì)與之相同。

    3 討 論

    3.1 不同脂肪源對(duì)草魚生長(zhǎng)性能及飼料利用效果的影響

    脂肪源之間的差別,實(shí)質(zhì)上是不同脂肪源的脂肪酸組成不同,而不同的魚類對(duì)脂肪酸的需求也不同[13-16]。Washington[17]和Tocher等[18]報(bào)道了常見(jiàn)淡水養(yǎng)殖魚類對(duì)必需脂肪酸的需求量。據(jù)其報(bào)道可知,草魚需從飼糧中獲得的脂肪酸為n-3系列的亞麻酸(LNA,C18:3n3)及n-6系列的亞油酸(LA,C18:2n6)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在飼料中添加混合油脂(2%豆油+2%魚油)可使草魚的生長(zhǎng)效果優(yōu)于單獨(dú)添加4%的豆油及單獨(dú)添加4%魚油。豆油中富含C18:2n6和C18:3n3,魚油中富含EPA(C20:5n3)、DHA(C22:6n3)和ARA(C20:4n6)[19],這可能是本試驗(yàn)中魚油組的增重率最低,而混油組的生長(zhǎng)效果最好的原因,因?yàn)槎褂团c魚油的搭配使飼糧中的各種脂肪酸比例相對(duì)均衡,滿足草魚的必需脂肪酸需求,更有利于草魚的生長(zhǎng),同時(shí)也使該組的餌料系數(shù)最低,這一結(jié)果與李思萌等[20]在大菱鲆幼魚上的研究結(jié)果相一致;腹脂率(IPF ratio)的高低,意味著腹腔內(nèi)臟團(tuán)脂肪沉積的多少,本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),混合油脂組的腹脂率最低,這可能說(shuō)明,魚體利用飼料中混合油脂的效果比單一添加油脂效果好。馬晶晶[6]在黑鯛魚飼料中添加不同含量的n-3PUFA,結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著n-3PUFA含量的不斷升高,魚體的腹脂率不斷降低,這與本試驗(yàn)的結(jié)果并不相同,可能與魚品種不同有關(guān);肝體指數(shù)(HSI)通常是衡量魚體健康狀態(tài)的指標(biāo),本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),豆油組肝體比最高,顯著高于魚油組肝體比,而混油組則與二者均無(wú)顯著性差異,這可能說(shuō)明單一添加大豆油會(huì)明顯增加肝臟的負(fù)擔(dān)。有報(bào)道指出,淡水魚有將C18:3n3轉(zhuǎn)化為DHA和EPA的能力[21],這或許說(shuō)明,單一添加豆油會(huì)增加肝臟的負(fù)擔(dān)來(lái)完成這部分工作,而相應(yīng)地添加部分魚油會(huì)減輕肝臟的負(fù)擔(dān);本試驗(yàn)3組試驗(yàn)魚的腹脂率及肥滿度未發(fā)現(xiàn)顯著性差異(P<0.05),這可能說(shuō)明不同脂肪源對(duì)魚體脂肪沉積位置及體型改變未有顯著影響。陳濤等[14]在飼料中添加4%的不同脂肪源探究對(duì)紅羅非魚稚魚生長(zhǎng)及肌肉脂肪酸組成的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)4種脂肪源對(duì)魚體肥滿度結(jié)果與本試驗(yàn)相似。

    表4 各組草魚肌肉脂肪酸組成(干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab.4 Fatty acid composition in muscle of grass carp in different groups(DM basis) %

    也有報(bào)道指出,不同脂肪源對(duì)魚體的生長(zhǎng)不會(huì)造成顯著性差異,如陸游等[22]用4種分別添加有椰子油(CO)、蘇子油(PO)、葵花籽油(SO)、魚油與葵花籽油1∶1混合油(FO/SO)的飼料,投喂黃顙魚幼魚,結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)魚終末體質(zhì)量、增重率、特定生長(zhǎng)率方面均無(wú)顯著性差異。高堅(jiān)等[23]用5種含有魚油(FO)、大豆油(SO)、玉米油(CO)、花生油(Pe O)和棕櫚油(Pa O)的配合飼料投喂泥鰍稚魚,結(jié)果發(fā)現(xiàn),攝食不同脂肪源飼料的泥鰍稚魚在增重率等生長(zhǎng)性能指標(biāo)方面無(wú)顯著性差異,造成這種結(jié)果上的差異可能與所選試驗(yàn)魚及脂肪源不同有關(guān)。

    3.2 不同脂肪源對(duì)草魚肌肉常規(guī)組成的影響

    本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),無(wú)論是背肌還是腹肌其粗蛋白含量均為混油組最高,魚油組次之而豆油組最低,這一結(jié)果可能與魚油富含豐富的n-3系列高度不飽和脂肪酸有關(guān)[24],從而使攝食添加了魚油飼料的草魚魚體肌肉中的粗蛋白含量升高,而混油組最高可能與其脂肪酸含量更加平衡有關(guān);針對(duì)背肌而言,粗脂肪含量以混油組最高,顯著高于其他兩組,分析發(fā)現(xiàn),混油組的粗蛋白含量、粗脂肪含量均顯著高于其他二組,且粗灰分含量無(wú)顯著性差異,獨(dú)水分含量較其他兩組低,這可能說(shuō)明混油組的背肌更富有營(yíng)養(yǎng)[25-26];針對(duì)腹肌而言,粗脂肪含量以豆油組最高,混油組與魚油組較低,Ribeiro等[27]指出魚油富含n-3HUFA,會(huì)抑制脂肪合成,繼而降低脂肪沉積量,從而使含魚油的飼料組在腹肌中的粗脂肪含量較低。而背肌與腹肌脂肪沉積規(guī)律并不相同,這可能與魚體自身因飼料中脂肪酸含量的不同而調(diào)控了脂肪的沉積位置,具體機(jī)理需進(jìn)一步的探究,杜震宇等[28]發(fā)現(xiàn)了相似的現(xiàn)象,他們發(fā)現(xiàn)在滿足必需脂肪酸需要量的情況下,不同脂肪源對(duì)鱸生長(zhǎng)差異影響不大,但對(duì)體脂沉積有一定影響。

    本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),不同脂肪源對(duì)草魚背肌、腹肌營(yíng)養(yǎng)成分造成了顯著性差異。這與施則偉[29]試驗(yàn)結(jié)果相似,施則偉用3種分別添加同一水平豆油、魚油、豬油的飼料投喂泥鰍,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同脂肪源對(duì)肌肉的常規(guī)組成含量造成了顯著性差異;張媛媛等[30]以異育銀鯽為研究對(duì)象,用4種分別添加5.4%水平魚油、豆油、菜籽油、亞麻油的飼料投喂異育銀鯽,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同脂肪源對(duì)肌肉的常規(guī)組成含量沒(méi)有顯著性差異。這種研究結(jié)果的差異,可能與試驗(yàn)所用魚種、脂肪源及添加水平不同有關(guān)。

    3.3 不同脂肪源對(duì)草魚肌肉脂肪酸組成的影響

    研究表明,魚類肌肉組織中脂肪酸組成基本反映了飼料中脂肪酸的組成[31-34]。經(jīng)60 d喂養(yǎng)后,不同脂肪源草魚肌肉中所含脂肪酸量明顯反映了這一點(diǎn),大豆油中含有豐富的C18:2n6及C18:3n3,魚油中則含有豐富的C20:5n3及C20:6n3[19],本試驗(yàn)結(jié)果也印證了這一點(diǎn)。如表4所示,豆油組肌肉含有較高的的C18:2n6及C18:3n3,魚油組肌肉則含有較高的C20:5n3及C20:6n3,混油組肌肉在這4種脂肪酸含量上則比較均衡。這可能意味著飼料中添加脂肪酸的比例相對(duì)平衡,則魚體肌肉中所含的脂肪酸比例也會(huì)更加平衡。

    本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與基礎(chǔ)草魚樣相比,試驗(yàn)魚經(jīng)60 d投喂后,其肌肉所含可檢出脂肪酸種類由22種提高到26種,這可能是因?yàn)榛A(chǔ)樣草魚未有脂肪來(lái)源導(dǎo)致魚體部分脂肪酸的合成缺乏原料而受阻,在經(jīng)外源脂肪補(bǔ)充后,該部分脂肪酸合成得以正常進(jìn)行從而SFA的比例較基礎(chǔ)樣降低而UFA的比例上升,同時(shí)說(shuō)明草魚有將短鏈脂肪酸延長(zhǎng)及將飽和脂肪酸去飽和的能力,類似現(xiàn)象出現(xiàn)在紅點(diǎn)鮭及吉富羅非魚上[35-36]。

    EPA、DHA對(duì)水生動(dòng)物而言具有多種非常重要的生理功能,如能量供應(yīng)、構(gòu)成細(xì)胞膜組分、保持一些酶的活性、影響一些基因的調(diào)控等[37]。B?hm等[38]研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)飼料中添加魚油,魚體極性磷脂優(yōu)先儲(chǔ)存n-3 HUFAs,投喂植物油飼料則不能提高鯉體內(nèi)的n-3 HUFAs含量,飼喂魚油則更容易沉積,特別是在腹部肌肉組織中。本試驗(yàn)結(jié)果與此類似,綜合比較3種脂肪源背腹肌所含脂肪酸量可以發(fā)現(xiàn),EPA、DHA含量皆為魚油組最高,豆油組最低,混油組介于二者之間,李思萌等[20]以7種不同脂肪源試驗(yàn)投喂大菱鲆幼魚,探討飼料脂肪源對(duì)其生長(zhǎng)性能和肌肉脂肪酸組成的影響,飼料研究結(jié)果表明,魚油組及豆油+魚油組在這兩種脂肪酸沉積上有相同的結(jié)果。而艾立川[39]的研究表明,提高飼料中n-3 HUFAs的水平,可顯著提高水生動(dòng)物體內(nèi)脂肪酸含量,其中主要是AA、DHA和EPA。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),添加了魚油的混合油脂組及純魚油組背肌、腹肌中EPA、DHA含量上有顯著變化,且背肌中AA的含量也隨魚油含量的升高而升高,但混油組與豆油組相比,AA的含量沒(méi)有顯著性的提升,腹肌中AA的含量則無(wú)此趨勢(shì)。這可能與所用魚油的質(zhì)量有關(guān),魚油保存時(shí)間越久,氧化酸敗的可能性越大,而氧化魚油對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生毒副作用,從而導(dǎo)致AA含量的變化呈不規(guī)律性,陳科全等[40]研究報(bào)道飼料中添加氧化魚油會(huì)使草魚肌肉中的PUFA含量降低。

    在本試驗(yàn)條件下,魚油和豆油按1:1混合添加能使草魚更好地生長(zhǎng),飼料中添加魚油可使肌肉中EPA、DHA的含量得到顯著提升,添加豆油可使生長(zhǎng)速度得到顯著提升,因此可知:飼料中豆油和魚油混合作為草魚脂肪源,不僅可促進(jìn)草魚生長(zhǎng),較單純使用豆油,還可顯著提高肌肉中EPA、DHA的含量,達(dá)到提質(zhì)增效的目的。

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