小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼牦牛生產(chǎn)性能、養(yǎng)分表觀消化率和血清生化指標(biāo)的影響

司燕玲，彭忠利，高彥華，柏 雪，苗建軍，陳智華，陳仕勇

（西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都 610041）

小肽是介于蛋白質(zhì)和氨基酸中間的一種營養(yǎng)素，可作為添加劑使用。小肽能夠被動(dòng)物體直接吸收，其在蛋白質(zhì)的消化吸收中起著至關(guān)重要的作用，不僅在血液循環(huán)中能直接參與組織中蛋白質(zhì)的合成，在腎臟、肝臟等其他組織中也能被完全的吸收利用 （張瑞仙，2012）。小肽可調(diào)節(jié)動(dòng)物的生理，其可以通過誘導(dǎo)小腸中一些酶活性的提高，使小腸消化功能發(fā)育提前，促進(jìn)健康和營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收進(jìn)而提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。近幾年，酵母菌作為一種添加劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動(dòng)物中，國內(nèi)外對其應(yīng)用機(jī)理做了很多研究，無論是在動(dòng)物實(shí)體試驗(yàn)，還是在模擬動(dòng)物瘤胃的體外發(fā)酵試驗(yàn)均證明，添加活性酵母對反芻動(dòng)物的發(fā)酵參數(shù)、生產(chǎn)性能都有促進(jìn)作用，產(chǎn)品質(zhì)量及肉品質(zhì)等安全性的方面問題也有保障 （Galvao等，2005；王麗娟等，2000），但這與菌種的種類及結(jié)構(gòu)和活性等都有聯(lián)系（Ding等，2014）。酵母培養(yǎng)物作為一種添加劑，主要功效是使飼料的營養(yǎng)價(jià)值得到優(yōu)化。本試驗(yàn)旨在研究添加小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛生產(chǎn)性能、養(yǎng)分表觀消化率和血液生化指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn) 試驗(yàn)于2017年11月至2018年4月在四川省阿壩藏族羌族自治州茂縣茂欣農(nóng)牧業(yè)發(fā)展有限責(zé)任公司進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)選取36頭年齡為4周歲左右、體重水平相當(dāng)、健康狀況良好的麥洼牦牛，隨機(jī)進(jìn)行分組。試驗(yàn)場海拔1450 m，整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)圈舍最高溫25℃，最低溫5℃。試驗(yàn)開始前對圈舍清理消毒，牦牛進(jìn)圈后用伊維菌素注射液肌肉注射驅(qū)蟲，稱重分組后按組栓系飼養(yǎng)。預(yù)飼期 30 d，試驗(yàn)期 80 d，每日 8:00和 16:00各飼喂一次，自由采食和飲水。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)分為4個(gè)處理組，每個(gè)處理組9個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭牛，并用精粗比為5:5的日糧開展動(dòng)物試驗(yàn)。對照組采用基礎(chǔ)的全混合日糧，試驗(yàn)Ⅰ組為添加1%酵母培養(yǎng)物的全混合日糧，試驗(yàn)Ⅱ組為添加0.75%小肽的全混合日糧，試驗(yàn)Ⅲ組為添加1%酵母培養(yǎng)物+0.75%小肽的全混合日糧（表1）。

表1 日糧組成及營養(yǎng)成分（DM基礎(chǔ)）

1.4 試驗(yàn)材料 酵母培養(yǎng)物，購于美國國際生物營養(yǎng)科技有限公司；小肽，購于成都美溢德生物技術(shù)有限公司。

1.5 樣品采集及指標(biāo)檢測

1.5.1 養(yǎng)分表觀消化率 樣品采集的時(shí)間為試驗(yàn)結(jié)束的前三天，每天每頭牦牛采集新鮮糞樣，每100 g糞加20 mL 10%硫酸定氮，將三天的樣品等量混勻，并置于-20℃凍存，除收集糞樣之外，每天每個(gè)處理組采集飼糧1 kg，然后將三天所收集的樣品混勻并低溫保存。65℃測定初水分，粉碎過40目篩，4℃保存， 測定CP、OM、NDF、ADF常規(guī)成分。采用酸不溶灰分作為指示劑，計(jì)算各養(yǎng)分的表觀消化率。

樣品中干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗灰分（Ash）、鈣（Ca）、磷（P）的測定參照張麗英（2003）的方法，中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）的測定參照Van Soest等（1991）的方法，OM可計(jì)算得。各養(yǎng)分的表觀消化率計(jì)算公式如下：

某養(yǎng)分表觀消化率/%=[100-（飼料中AIA含量/糞中AIA含量）×（糞中某養(yǎng)分含量/飼料中某養(yǎng)分含量）]×100。

1.5.2 生長性能 在正式飼養(yǎng)的第一天，每頭牦牛稱重，分組，并記錄其初重；試驗(yàn)結(jié)束的第二天，在晨飼前稱重，記錄其末重，由此計(jì)算ADG。試驗(yàn)期內(nèi)每 7 d的最后 2 d連續(xù)稱量每頭牛的給料量和剩料量，并采集飼料樣本測定干物質(zhì)含量，計(jì)算 DMI，利用 ADG和DMI計(jì)算每頭牛的料重比（F/G）。

ADG/（g/d）=（末重-初重）/試驗(yàn)天數(shù)；

DMI/kg=總干物質(zhì)采食量/試驗(yàn)天數(shù)；

F/G=DMI/ADG。

1.5.3 血液生化指標(biāo) 在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前一周左右采集頸靜脈血，在清晨飼喂前每頭牛采集兩份血樣，采集后立即進(jìn)行離心分析出血清，測定血清生化指標(biāo)，另一份則存于-80℃?zhèn)溆谩?/p>

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel進(jìn)行初步處理，然后用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析，用鄧肯氏法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＞0.05表示差異不顯著，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛生長性能的影響 由表2可以看出，各處理組的初重和末重差異不顯著（P＞0.05）；與對照組相比，試驗(yàn)組的DMI、F/G和ADG表現(xiàn)出極顯著的差異（P＜0.01），其中試驗(yàn)Ⅱ組的DMI和ADG極顯著低于試驗(yàn)Ⅰ和Ⅲ組，F(xiàn)/G極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ和Ⅲ組（P＜0.01），試驗(yàn)Ⅰ和Ⅲ組之間差異不顯著。ADG隨著DMI的增加而增加，呈現(xiàn)正態(tài)分布，DMI較對照組分別提高了12.20%、6.51%、12.20%，ADG分別提高了25.01%、10.77%、28.13%；而F/G則隨著DMI的增加而下降，試驗(yàn)組較對照組分別降低了11.74%、5.39%、13.26%。

表2 添加小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛生長性能的影響

2.2 小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表3可知，與對照組相比，試驗(yàn)組OM、ADF表觀消化率均顯著提高，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組OM較對照組分別提高了10.28%、8.57%、10.87%，ADF分別提高了 9.52%、7.12%、11.19%；對照組CP和NDF的消化率極顯著低于試驗(yàn)組（P＜0.01），其中試驗(yàn)Ⅲ組CP與NDF的消化率極顯著的高于其他組，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組之間無顯著差異（P＞0.05）；與對照組相比，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的CP的表觀消化率分別提高了10.52%、7.89%、13.79%；NDF的消化率則分別提高了13.88%、10.09%、17.52%（P ＜ 0.01）。

2.3 小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛血液生化指標(biāo)的影響 從表4可知，各組的TG、UN、Glu、GLB 差異不顯著（P ＞ 0.05），從數(shù)值看，各試驗(yàn)組的指標(biāo)均高于對照組。與對照組相比，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的TP分別顯著提高了 13.02%、7.55%、18.48%；ALB分別提高了 12.04%、5.41%、12.23%（P ＜ 0.05）。

表3 添加小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛養(yǎng)分表觀消化率的影響%

表4 添加小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛生長性能的影響 影響牦牛生產(chǎn)性能的主要因素有日糧營養(yǎng)組成、動(dòng)物采食量、動(dòng)物個(gè)體差異、外界環(huán)境條件等，其中影響牦牛生長性能最大的因素為干物質(zhì)采食量（楊鳳，2010）。 Wagner等（2016）研究表明，添加酵母培養(yǎng)物能顯著提高肉牛的DMI和ADG，Dann等（2000）研究表明，在添加了酵母培養(yǎng)物之后，動(dòng)物的采食量并未因此受到顯著的影響，即使是添加同樣的酵母培養(yǎng)物，采食量仍然不一致，耿春銀（2015）的研究也表明，在98 d的正試期內(nèi)，飼糧中添加酵母培養(yǎng)物組肉牛的DMI和ADG與未添加組都沒有顯著差異，汪夢萍等（2000）在斷奶仔豬日糧中添加小肽制品，研究顯示小肽制品能顯著的促進(jìn)飼料的轉(zhuǎn)化與ADG的增加，姜寧等（2009）研究發(fā)現(xiàn)，谷胱甘肽能提高育肥羊的DMI，并降低F/G，可能是由于谷胱甘肽促進(jìn)了生長軸中GH與IGF-Ⅰ的分泌，宋增廷等（2008）結(jié)論也與此相同。本試驗(yàn)Ⅰ組的初重和末重與對照組的差異均不顯著（P＞0.05），但是卻極顯著提高了DMI和ADG，并降低了料重比 （P＜0.01），出現(xiàn)這種差異可能與酵母培養(yǎng)物的添加量、動(dòng)物品種、動(dòng)物自身的消化能力等有關(guān)；小肽能夠提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能，可能與肽鏈的結(jié)構(gòu)及氨基酸殘基序列有關(guān)（孫肖明，2011），本試驗(yàn)Ⅱ組的ADG和DMI也得到了增加，F(xiàn)/G比例低于對照組水平，與前人結(jié)論一致，可能與促進(jìn)生長軸因子分泌有關(guān)，說明小肽能提高日糧的適口性并促進(jìn)動(dòng)物的干物質(zhì)采食量，達(dá)到育肥效果；Ⅲ組小肽酵母組合組的DMI、ADG和F/G與對照組差異極顯著（P＜0.01），與酵母培養(yǎng)物中所選用的三大成分有關(guān)，其中營養(yǎng)物質(zhì)成分為動(dòng)物機(jī)體提供更多的維生素及礦物質(zhì)元素等，助消化成分促進(jìn)動(dòng)物對日糧中營養(yǎng)成分的消化吸收速率，有機(jī)酸促進(jìn)了日糧的適口性，酶類提高動(dòng)物機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化力，提高免疫成分則是為預(yù)防動(dòng)物疾病做前期準(zhǔn)備，以上所含成分與小肽相輔相成，雙重促進(jìn)動(dòng)物的生長育肥。

3.2 小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛養(yǎng)分表觀消化率的影響 舍飼育肥牦牛的表觀消化率是影響其生長性能的重要因素之一，在動(dòng)物試驗(yàn)中，消化率水平直接表示試驗(yàn)動(dòng)物對日糧的可消化性，也間接的反映了動(dòng)物自身的消化能力。Wiedmeier等（1987）在后備奶牛的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加酵母培養(yǎng)物能顯著提高CP、半纖維素和DM的消化率，張昌吉（2005）在綿羊的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在日糧中分別添加1.5%和3%的酵母培養(yǎng)物，對DM、OM、CP、粗纖維、NDF和ADF全消化道表觀消化率影響不顯著，宋增廷等（2008）在試驗(yàn)中得出，添加谷胱甘肽對動(dòng)物的表觀消化率效果不固定，NDF略低于對照組，而ADF則高于對照組，王文娟（2011）給安裝永久性瘺管的魯西黃牛每天灌注100、200、300 g大豆小肽，結(jié)果顯示小肽提高了機(jī)體對DM、OM、NDF、ADF和氮的表觀消化率。本試驗(yàn)Ⅰ組的OM表觀消化率略高于對照組（P ＜ 0.05），CP、NDF 和 ADF 的消化率極顯著的高于對照組，研究表明酵母菌制劑通過對瘤胃發(fā)酵環(huán)境的改善以及對瘤胃微生物生長與活性的影響，提高了飼料 NDF消化率（Angeles等，1998），酵母培養(yǎng)物改善了瘤胃NDF的消化（Malekkhahi，2015；Chauchey 等，2010），與益生菌酵母菌對纖維降解菌的生長及活性的刺激有關(guān)；本試驗(yàn)Ⅱ組得出結(jié)果與此基本一致，OM、CP、NDF和ADF消化率均高于對照組，分析原因是由于小肽可避免氨基酸之間的吸收競爭，從而促進(jìn)氨基酸的吸收，加速蛋白質(zhì)的合成（趙海云，2013），提高瘤胃中纖維分解菌的活力，促進(jìn)對纖維素和半纖維素的降解（李琍等，2000），小肽是瘤胃微生物達(dá)到最大生長效率的關(guān)鍵因子，主要是通過加快微生物的繁殖速度，縮短細(xì)胞分裂周期來促進(jìn)微生物的生長（徐基利，2011），從而提高動(dòng)物機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力，達(dá)到育肥的效果。試驗(yàn)Ⅲ組 NDF、ADF、CP、OM 的消化率均最高，OM 和ADF顯著高于對照組（P＜0.05），CP和NDF極顯著高于其他組，酵母培養(yǎng)物的作用是基于其提供重要的能刺激微生物活性的營養(yǎng)素或營養(yǎng)因子，由于酵母培養(yǎng)物含有氨基酸、免疫多糖、維生素和有機(jī)酸等營養(yǎng)成分，可刺激乳酸利用菌的生長與代謝，從而加大了瘤胃的發(fā)酵強(qiáng)度，酵母培養(yǎng)物中可能含有一種結(jié)構(gòu)類似于小肽的物質(zhì)對瘤胃內(nèi)的微生物具有很大的刺激作用，在此基礎(chǔ)上添加少量小肽更加促進(jìn)酵母菌對營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

3.3 小肽與酵母培養(yǎng)物對舍飼育肥牦牛血液生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)是判斷機(jī)體生理功能的重要參數(shù)，可反映機(jī)體的代謝和健康狀態(tài)等。血清中Glu的含量反映了動(dòng)物機(jī)體對糖的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝的平衡狀態(tài)。Glu能夠反映機(jī)體對能量的調(diào)節(jié)是否恒定，有研究表明，動(dòng)物血清中Glu的含量不應(yīng)超過6.1 mmol/L （史曉雪等，2017），血清中TP、ALB和UN含量可反映機(jī)體對蛋白質(zhì)的吸收、合成以及分解狀況（楊璐玲等，2014）。肖曼（2013）研究結(jié)果表明，在肉仔雞飼糧中添加酵母培養(yǎng)物，可以顯著提高肉仔雞血清中TP含量，與王玲等（2015）結(jié)果不太相符，即各試驗(yàn)組奶牛血清Glu、TP、ALB、UN含量無顯著差異，姜寧等（2005）研究了日糧中添加小肽發(fā)現(xiàn)，牛血清UN、TP和ALB含量均無顯著的變化。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加酵母培養(yǎng)物組血清中Glu和UN含量均無顯著性差異，TP、ALB有顯著升高的現(xiàn)象，但均在正常范圍內(nèi)，說明酵母培養(yǎng)物對機(jī)體內(nèi)能量代謝以及蛋白質(zhì)的合成分解未產(chǎn)生負(fù)面影響；試驗(yàn)Ⅱ組與前人結(jié)論相悖，TP和ALB的含量顯著增加，可能是由于試驗(yàn)動(dòng)物選擇差異、動(dòng)物本身的消化吸收情況以及小肽添加量的不同所致。試驗(yàn)Ⅲ組酵母與小肽相組合，提高了血清生化的各項(xiàng)指標(biāo)，均較各試驗(yàn)組的指標(biāo)高，尤其以TP和ALB水平顯著高于其他組（P＜0.05），究其原因可能是由于血清TP能反映機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)，疾病的診斷及鑒別診斷，正常為60～85 g/L，ALB是TP的一種，主要調(diào)節(jié)組織與血管之間水分的動(dòng)態(tài)平衡并維持恒定的血漿容量，酵母培養(yǎng)物中所含的提高免疫力營養(yǎng)因子為動(dòng)物機(jī)體提供了良好的預(yù)防疾病環(huán)境，與小肽共同作用于試驗(yàn)動(dòng)物，為動(dòng)物育肥作理論基礎(chǔ)。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，牦牛DMI、ADG顯著提高，F(xiàn)/G降低，牦牛對OM、CP、ADF和NDF消化利用效率顯著提高，舍飼牦牛血清生化指標(biāo)也有不同程度提高，并且均以小肽與酵母培養(yǎng)物組合組的水平較高。