血清補(bǔ)體C3、C4及甲胎蛋白聯(lián)合檢測(cè)在肝病患者中的表達(dá)水平及意義

何慶祥，黎厚飄，何育琴

廣東省清遠(yuǎn)市陽(yáng)山縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東清遠(yuǎn) 513100

在我國(guó)，肝炎的發(fā)病率較高，其中乙型肝炎已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅人們健康的疾病。乙型肝炎患者如若控制不佳，部分患者可發(fā)展為肝硬化，并出現(xiàn)不同程度的腎功能損傷，最終導(dǎo)致嚴(yán)重的肝腎綜合征或肝癌[1]。因此，如何早期發(fā)現(xiàn)肝病并及時(shí)予以相應(yīng)治療對(duì)患者預(yù)后十分重要。甲胎蛋白(AFP)是目前早期診斷和治療肝癌的腫瘤標(biāo)志物，具有較高特異度，但靈敏度較低，在肝病的鑒別診斷中價(jià)值較小。血清補(bǔ)體C3、C4是與免疫有關(guān)并具有酶活性的球蛋白，在肝病早期水平升高，急性期或肝癌患者因肝細(xì)胞受損情況不同表現(xiàn)出不同的水平，具有一定的特異度[2-3]。故筆者將血清補(bǔ)體C3、C4聯(lián)合AFP對(duì)乙型肝炎、肝硬化、肝癌進(jìn)行診斷，探討聯(lián)合診斷效能，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年3月至2019年3月本院收治的乙型肝炎患者25例為肝炎組，肝硬化患者25例為肝硬化組，肝癌患者25例為肝癌組，同時(shí)選取住院部或門(mén)診的健康體檢者25例為對(duì)照組。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：所有研究對(duì)象無(wú)心、腦、胃腸道、內(nèi)分泌系統(tǒng)等疾病，且乙型肝炎表面抗原(HBsAg)及丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV)檢查均為陰性。肝炎組患者診斷標(biāo)準(zhǔn)符合《慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)(2015年版)》[4]，排除合并其他臟器損傷或癌癥患者。肝硬化組患者納入標(biāo)準(zhǔn)：患者臨床表現(xiàn)、血清標(biāo)志物檢測(cè)及經(jīng)皮肝穿刺活檢等明確診斷。肝癌組所有研究對(duì)象經(jīng)血清AFP、病毒標(biāo)志物檢測(cè)及組織學(xué)檢查，均首次診斷為肝癌。對(duì)照組中男19例，女6例；年齡32～65歲，平均(53.4±10.7)歲；肝炎組男20例，女5例；年齡25～68歲，平均(51.5±10.3)歲；肝硬化組男16例，女9例；年齡30～63歲，平均(52.7±10.2)歲。3組年齡、性別構(gòu)成等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 采集受檢者的晨起空腹外周靜脈血5 mL，經(jīng)3 000 r/min離心10 min后分離血清，低溫保存待檢。采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清AFP，試劑盒為美國(guó)雅培公司生產(chǎn)的AFP化學(xué)發(fā)光試劑盒；采用免疫散色比濁法檢測(cè)血清補(bǔ)體C3、C4，儀器為迪瑞公司生產(chǎn)的CS-400B型全自動(dòng)生化分析儀，先采用定標(biāo)液進(jìn)行定標(biāo)后每天檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控，在允許范圍內(nèi)進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)。

2 結(jié) 果

2.14組研究對(duì)象血清補(bǔ)體C3、C4、AFP水平比較 對(duì)照組補(bǔ)體C3、C4、AFP水平分別為(1.03±0.21)g/L、(0.21±0.04)g/L、(2.05±0.41)ng/mL；肝炎組3種指標(biāo)的水平分別為(1.24±0.25)g/L、(0.20±0.05)g/L、(2.78±0.56)ng/mL；肝硬化組3種指標(biāo)的水平分別為(0.52±0.11)g/L、(0.12±0.07)g/L、(36.53±6.36)ng/mL；肝癌組3種指標(biāo)的水平分別為(1.17±0.23)g/L、(0.25±0.04)g/L、487.74(39.53，2 843.23)ng/mL。對(duì)照組血清補(bǔ)體C3水平顯著低于肝炎組、肝癌組，但高于肝硬化組(P<0.05)；對(duì)照組補(bǔ)體C4水平與肝炎組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但高于肝硬化組，低于肝癌組(P<0.05)；對(duì)照組的AFP則顯著低于其他3組(P<0.05)。

2.23種指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值分析 3種指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)時(shí)，血清補(bǔ)體C3、C4、AFP的曲線下面積(AUC)分別為0.713、0.815、0.895；3種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)診斷肝癌時(shí)，其AUC為0.985，與單獨(dú)檢測(cè)時(shí)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討 論

AFP在胎兒肝臟中即可合成，并在周歲時(shí)接近成人水平，但水平一般較低(<30 μg/L)；在成人中，約80%的肝癌患者中AFP水平顯著升高，且隨著病情的惡化，在血清中的水平會(huì)急劇增加[5-6]，因此，臨床將其作為診斷原發(fā)性肝癌的一種特異性腫瘤標(biāo)志物。但近期有研究認(rèn)為，部分肝硬化患者也會(huì)出現(xiàn)高水平的AFP，少數(shù)肝癌患者的AFP反而較低[7]，研究AFP在不同肝病中的診斷效能仍是臨床研究的熱點(diǎn)。機(jī)體在受到肝炎病毒感染后會(huì)引起急、慢性肝炎，肝硬化，肝細(xì)胞癌等疾病，在整體疾病進(jìn)程中，細(xì)胞免疫、體液免疫均參與抗病毒、抗炎等過(guò)程，其中包括體液免疫中的免疫球蛋白、補(bǔ)體，在不同的階段其水平表達(dá)并不一致[8-9]。補(bǔ)體是一種具有酶活性的球蛋白，其水平在機(jī)體內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定，其中補(bǔ)體C3、C4是肝臟合成的一種β球蛋白，且補(bǔ)體C3在各種補(bǔ)體中水平最高，也是補(bǔ)體激活途徑中最重要的環(huán)節(jié)，可用于肝病的監(jiān)測(cè)[10]。因此，筆者將補(bǔ)體C3、C4納入本研究。因肝炎到肝硬化、肝癌發(fā)展進(jìn)程較為緩慢，故筆者收集處于不同肝病階段的患者作為研究對(duì)象，并以健康體檢者作為對(duì)照組進(jìn)行橫斷面研究，分析補(bǔ)體C3、C4及AFP的表達(dá)情況。結(jié)果顯示，對(duì)照組的血清補(bǔ)體C3、AFP水平均顯著低于肝炎、肝癌組(P<0.05)，但補(bǔ)體C4的水平與肝炎組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。筆者分析，患者發(fā)生乙型肝炎時(shí)肝細(xì)胞受損并不嚴(yán)重，可能是在早期感染時(shí)，產(chǎn)生抗體前首先激活補(bǔ)體旁路途徑，在眾多補(bǔ)體中，補(bǔ)體C3水平最高而C4水平較低，因此表現(xiàn)為補(bǔ)體C3水平增高而補(bǔ)體C4水平無(wú)較大的改變[9]。筆者還發(fā)現(xiàn)一個(gè)“反彈現(xiàn)象”，肝炎組及肝癌組患者的補(bǔ)體C3水平顯著高于對(duì)照組，但在肝硬化組中水平較低，肝癌血清補(bǔ)體C4水平高于對(duì)照組，同樣在肝硬化組水平較低，可能是由于肝炎患者肝細(xì)胞損害較輕，處于早期感染，其肝細(xì)胞還能代償性合成C3、C4，因此患者的補(bǔ)體C3升高；但肝硬化組肝細(xì)胞破壞程度較重，出現(xiàn)肝內(nèi)補(bǔ)體功能障礙，且補(bǔ)體被激活參與免疫復(fù)合物的形成，導(dǎo)致補(bǔ)體被消耗，因此C3、C4水平呈下降趨勢(shì)[11-12]。當(dāng)疾病發(fā)展為肝癌，由于腫瘤細(xì)胞增殖影響，其補(bǔ)體水平產(chǎn)生亢進(jìn)，故呈上升趨勢(shì)。

此外，AFP升高主要見(jiàn)于肝功能異常。本研究結(jié)果顯示，隨著肝病的進(jìn)展，其AFP水平迅速增加，尤其在肝癌患者中，發(fā)生急劇升高，而在肝硬化患者中AFP水平也會(huì)有異常增高現(xiàn)象，符合上述觀點(diǎn)，即僅利用AFP作為肝癌的診斷指標(biāo)特異度較低。ROC曲線分析結(jié)果顯示，AFP單獨(dú)檢測(cè)診斷肝癌的AUC為0.895，而3種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行分析，AUC達(dá)0.985，說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)能有效評(píng)估肝病患者疾病狀態(tài)。

綜上所述，不同肝病患者的血清補(bǔ)體C3、C4及AFP表達(dá)情況并不一致，臨床可采用補(bǔ)體C3、C4、AFP進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，具有較高的診斷效能。