廖建良,曾凱清
(惠州學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院, 廣東 惠州 516007)
五指毛桃植物為桑科粗葉榕(Ficus hirta Vahl),又名土北芪、五爪龍、五指牛奶等[1],主要分布于我國(guó)東南部至西南部[2].廣東惠州分布廣,大多數(shù)為灌木,少數(shù)為小喬木,嫩枝中空,全株密被粗毛[3].其味辛、甘、性平,以根入藥,用藥范圍較廣,主治貧血、哮喘、盜汗、脾虛浮腫、肺癆等癥[4].五指毛桃水提物具有消化系統(tǒng)保護(hù)功能、平滑肌調(diào)節(jié)功能、抗氧化作用以及殺菌消炎作用,還能提高人體的免疫功能,作為藥食兩用植物資源,五指毛桃具有極高的藥用價(jià)值和實(shí)用價(jià)值[5].由于五指毛桃的根大量用于煲湯、藥用,廣東現(xiàn)存野生五指毛桃存量已經(jīng)變得稀缺.如何擴(kuò)大種植五指毛桃,振興鄉(xiāng)村,落實(shí)粵港澳大灣區(qū)發(fā)展規(guī)劃綱要,迫切需要解決五指毛桃種苗的供應(yīng).由于大部分植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑能有效打破種子的休眠、促進(jìn)生根,被廣泛應(yīng)用于促進(jìn)扦插、種子萌發(fā)及幼苗生長(zhǎng)[6-12].但,有關(guān)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)五指毛桃的種子萌發(fā)研究鮮見報(bào)道,探討植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)五指毛桃的種子萌發(fā)影響,篩選出適合植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類、濃度和浸種時(shí)間,獲得優(yōu)質(zhì)的健壯種苗,為五指毛桃的生產(chǎn)應(yīng)用具有實(shí)際意義.
五指毛桃種子采自惠州市博羅羅浮山基地,將五指毛桃上的榕果采下后去除果實(shí)肉質(zhì)外果皮,剝?nèi)》N子,用水漂洗干凈后,置于室內(nèi)陰涼處曬干后進(jìn)行種子萌發(fā)試驗(yàn).營(yíng)養(yǎng)土由稻田土40%+腐葉土40%+壓縮椰磚20%組成.
1.2.1 種子處理挑選大小均勻、顆粒飽滿、優(yōu)質(zhì)完整的種子,先用10%的NaClO消毒15min,蒸餾水洗去殘留.
1.2.2 發(fā)芽試驗(yàn)與統(tǒng)計(jì)
不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理:將種子分別浸入不同濃度(50、100、150、200 和250 mg.L-1)的IAA、IBA、NAA、6-BA溶液中浸泡24h,再用蒸餾水漂洗5min后,將拌好、消毒的營(yíng)養(yǎng)土在育苗盤內(nèi)鋪30mm厚,將種子均勻撒在土的表層,蓋上一層松散的濕土,每處理30粒,3次重復(fù).
不同浸種時(shí)間處理:將種子分別浸入100mg/L 的IAA、IBA、NAA、6-BA溶液中,分別浸泡12h、18h、24h、48 h,再用蒸餾水漂洗5min后,將拌好的營(yíng)養(yǎng)土在育苗盤內(nèi)鋪30mm厚,將種子均勻撒在土的表層,蓋上一層松散的濕土,每處理30粒,3次重復(fù).
空白對(duì)照組:清水浸泡種子浸泡24h做對(duì)照實(shí)驗(yàn),置于營(yíng)養(yǎng)土上,每處理30粒,3次重復(fù).
種子萌發(fā)在30℃,75%濕度的溫室大棚里進(jìn)行,試驗(yàn)期間保持營(yíng)養(yǎng)土濕潤(rùn),10d 后可以開始觀察種子發(fā)芽情況,并進(jìn)行發(fā)芽率的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),之后每隔5d統(tǒng)計(jì)1次發(fā)芽率,20d 后統(tǒng)計(jì)發(fā)芽勢(shì),30d 后所得數(shù)據(jù)為最終的發(fā)芽率,胚根突破種皮即可視為發(fā)芽.
發(fā)芽勢(shì)(%)=規(guī)定時(shí)間內(nèi)種子發(fā)芽數(shù)/總體種子數(shù)×100
發(fā)芽率(%)=種子總發(fā)芽數(shù)/總體種子數(shù)×100
各組試驗(yàn)重復(fù)3 次,取平均值,采用Microsoft Excel 2010 軟件計(jì)算平均值及標(biāo)準(zhǔn)誤差.結(jié)果采用“平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤差”表示,用IBM SPSS Amos 22 進(jìn)行單因素方差分析(One-wayANOVA),采用Duncan法和LSD法進(jìn)行不同處理間的顯著性檢驗(yàn).
2.1.1 IAA處理對(duì)種子萌發(fā)的影響
從表1 可知,五指毛桃種子經(jīng)過不同濃度的IAA溶液浸種處理后,種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率高于空白對(duì)照組.而隨著溶液濃度的增加,五指毛桃的發(fā)芽勢(shì)和最終發(fā)芽率也隨著增高.當(dāng)IAA 濃度達(dá)到200 mg.L-1時(shí),種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率最高,分別為40.00±3.34%和57.78±1.92%,而空白對(duì)照組為20.00±3.65% 和30.00±3.03%.200 mg.L-1.之后隨著濃度的提高,種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率下降,IAA濃度250 mg.L-1浸種處理發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為36.67±3.34% 和46.67±3.34%.可見.當(dāng)IAA濃度達(dá)到200 mg.L-1時(shí)處理效果最好,種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率最高.
表1 IAA對(duì)五指毛桃種子萌發(fā)的影響
2.1.2 IBA處理對(duì)種子萌發(fā)的影響
從表2可知,在50-200 mg.L-1的濃度范圍內(nèi),隨著IBA濃度的上升,種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率也隨之上升;在濃度200 mg.L-1時(shí),發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為63.33±1.93%和73.33±1.92%,而空白對(duì)照組為20.00±3.65%和30.00±3.03%.之后隨著IBA 濃度的提高,五指毛桃的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率開始下降.IBA濃度250 mg.L-1浸種處理發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為41.11±3.09%和46.67±3.85%.可見,200 mg.L-1的IBA溶液浸種對(duì)五指毛桃種子萌發(fā)促進(jìn)作用最佳.
表2 IBA對(duì)五指毛桃種子萌發(fā)的影響
2.1.3 NAA處理對(duì)種子萌發(fā)的影響
從表3 可知,五指毛桃種子經(jīng)過不同濃度的NAA溶液浸種處理后,種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率高于空白對(duì)照組.200 mg.L-1的NAA溶液處理下的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率達(dá)到最大,分別為65.56±3.34%和77.78±3.34%,而空白對(duì)照組為20.00±3.65%和30.00±3.03%.當(dāng)濃度大于200 mg.L-1時(shí),隨著濃度的提高,發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率明顯降低.NAA濃度250 mg.L-1浸種處理發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為53.33±3.85%和61.11±3.33%.可見,NAA溶液對(duì)五指毛桃種子萌發(fā)具有促進(jìn)效果,當(dāng)濃度為200 mg.L-1時(shí)處理效果最佳.
表3 NAA對(duì)五指毛桃種子萌發(fā)的影響
2.1.4 6-BA處理對(duì)種子萌發(fā)的影響
從表4 可知,隨著6-BA 溶液濃度的增加,五指毛桃種子發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率升高.當(dāng)濃度達(dá)到200 mg.L-1時(shí),6-BA溶液處理后的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率高于其他濃度和空白對(duì)照組,分別為76.67±6.9%和88.89±5.09%,空白對(duì)照組為20.00±3.65%和30.00±3.03%.當(dāng)濃度大于200 mg.L-1時(shí),隨著濃度的提高,發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率明顯降低.6-BA 溶液250 mg.L-1處理后的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為66.67±1.92 %和71.11±1.93%.可見,6-BA溶液200 mg.L-1的處理效果最佳.
表4 6-BA對(duì)五指毛桃種子萌發(fā)的影響
從表5可以看出,五指毛桃種子經(jīng)過200 mg.L-1的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑浸種不同時(shí)間處理后,種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率都比空白對(duì)照組有所提高.但是,當(dāng)浸種時(shí)間為12-18h時(shí),種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率隨著浸種時(shí)間的增加而提高;當(dāng)浸種時(shí)間達(dá)到24h時(shí),五指毛桃種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率高于其他浸種時(shí)間和空白對(duì)照組.當(dāng)浸種時(shí)間達(dá)到48h 時(shí),其發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率比浸種時(shí)間24h時(shí)較低.因此,浸種24h有利于五指毛桃種子萌發(fā).其中五指毛桃種子經(jīng)過200 mg.L-1的6-BA浸種24h的處理效果最好,發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率高于其他濃度、其他植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和空白對(duì)照組.
表5 浸種時(shí)間對(duì)五指毛桃種子萌發(fā)的影響
(續(xù)表5)
實(shí)驗(yàn)表明:不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理,當(dāng)IAA最佳濃度達(dá)到200 mg.L-1時(shí),種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為40.00±3.34%和57.78±1.92%;IBA 最佳濃度200 mg.L-1時(shí),發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為63.33±1.93% 和73.33±1.92%;NAA 最佳濃度200 mg.L-1的溶液處理下的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率分別為65.56±3.34%和77.78±3.34%;當(dāng)浸種時(shí)間達(dá)到24h 時(shí),五指毛桃種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率高于其他浸種時(shí)間和空白對(duì)照組.種子萌發(fā)是一個(gè)非常復(fù)雜的過程,許多研究結(jié)果證明,胚的生理休眠主要是因?yàn)橐种苿舛冗^高,而促進(jìn)劑濃度過低,適當(dāng)?shù)氖褂弥参锷L(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,能夠有效地打破種子休眠,能夠促進(jìn)種子發(fā)芽和誘導(dǎo)休眠芽生長(zhǎng),具有高效、穩(wěn)定、廉價(jià)和易于使用等特點(diǎn)[8].李鮮花等[9]研究結(jié)果80 mg.L-16-BA 浸種對(duì)黃秋葵種子萌發(fā)效果最好;該實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果:植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑較低濃度促進(jìn)植物種子萌發(fā),高濃度抑制種子萌發(fā),這與前人使用6 -BA 浸種處理不同植物種子所得的研究結(jié)果類似[8-13].馬新等[12]研究了吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)及ABT 溶液對(duì)文冠果種子發(fā)芽特性及幼苗生長(zhǎng)發(fā)育的影響,ABT 處理下文冠果種子的發(fā)芽特性及生長(zhǎng)指標(biāo)均優(yōu)于其他處理,并且5 d 為最佳浸種時(shí)間.田月娥等[13]研究十種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理對(duì)苦瓜和葫蘆種子萌發(fā)的影響,結(jié)果表明NAA、6-BA、IAA能促進(jìn)苦瓜和葫蘆種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)的提高與該實(shí)驗(yàn)結(jié)果類似.
綜上可知,IAA、IBA、NAA、6-BA 對(duì)羅浮山五指毛桃種子萌發(fā)有顯著影響,其中以6-BA處理效果最好,可顯著提高五指毛桃種子萌發(fā)率.五指毛桃種子經(jīng)過200 mg.L-1的6-BA 試劑浸種24h 的處理效果最好,發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率高于其他濃度、其他植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和空白對(duì)照組,分別為76.67±6.9%和88.89±5.09%.建議在栽培種植五指毛桃,播種時(shí)用200 mg.L-1的6-BA浸種24h的處理,提高種子萌發(fā)率,進(jìn)一步發(fā)展南藥五指毛桃.