培養(yǎng)條件對(duì)食源性混合病原菌生物被膜形成的影響

張鈺皎，胡煒東，黃海英，趙雪平，孫子羽，滿都拉，陳忠軍，*

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010018；2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭014109）

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大腸桿菌（Escherichia coli）和沙門氏菌（Salmonella）是重要的食源性病原菌，其引起的食物中毒是最常見(jiàn)的細(xì)菌性疾病之一[1]。金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌適應(yīng)性極強(qiáng)，在各種不利環(huán)境中通常以生物被膜的形式生存[2]。細(xì)菌生物被膜（biofilm）是嵌入胞外多糖中的有組織的微生物聚集體，微生物附著于物體表面后，通過(guò)相互作用釋放胞外多糖將自身包裹其中而形成生物被膜[3]。食源性病原菌在形成生物被膜后對(duì)外界不良環(huán)境抵抗力增強(qiáng)，極難被抗生素等殺菌劑清除[4]。食源性病原菌生物被膜會(huì)對(duì)食品加工器具設(shè)備、加工廠地板和墻壁表面造成持續(xù)性污染，一旦清除不完全將會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的食品安全問(wèn)題，并造成因食品腐敗而引起的經(jīng)濟(jì)損失[5]。

生物被膜的形成過(guò)程中受到多種營(yíng)養(yǎng)因素的調(diào)控，比如載體、生長(zhǎng)溫度、時(shí)間、pH 值、培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)、碳源、氮源和活菌數(shù)等極大影響著生物被膜的形成量和黏附率[6]。鄧開(kāi)野等[5]發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌（S.aureus）生物被膜受到溫度、pH 值、初始菌濃度的影響。Rode等[8]發(fā)現(xiàn)溫度、氯化鈉、葡萄糖和乙醇的聯(lián)合作用可促進(jìn)金黃色葡萄球菌生物被膜的形成。食品加工環(huán)境的不同，形成食源性病原菌生物被膜的結(jié)構(gòu)也會(huì)不同。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者主要致力于研究單一菌種生物被膜的形成條件，對(duì)混合菌生物被膜研究鮮少。因此，探究培養(yǎng)條件對(duì)混合菌生物被膜形成的影響至關(guān)重要。

本文以96 孔聚苯乙烯培養(yǎng)板為載體，經(jīng)結(jié)晶紫染色法染色后，通過(guò)測(cè)定其黏附率，探究培養(yǎng)基pH 值、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌形成的混合菌生物被膜的影響，并采用響應(yīng)面法優(yōu)化最佳培養(yǎng)條件。根據(jù)文獻(xiàn)資料獲得3株單一菌的最佳培養(yǎng)條件[9-11]，在最佳形成條件下探究胰蛋白胨大豆肉湯（tryptone soy broth，TSB）培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)、NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)和葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌及其混合菌形成的生物被膜的影響。揭示培養(yǎng)條件對(duì)單一菌和混合菌生物被膜的影響規(guī)律，為今后探究食源性病原菌生物被膜生理生化特性和控制食品加工環(huán)境中生物被膜的形成提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 菌株

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）CMCC 26003-3、大腸桿菌（Escherichia coli）ATCC 11775-3、沙門氏菌（Salmonella）ATCC 14028：中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心。

1.1.2 試劑

磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉：天津市永大化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心；結(jié)晶紫、氯化鈉、氯化鉀：鴻之惠商貿(mào)有限公司；草酸銨、甲醇、冰醋酸、乙醇：上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。以上所用試劑均為分析純。

1.1.3 培養(yǎng)基

胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基：北京陸橋生物技術(shù)有限公司。

1.2 主要儀器與設(shè)備

Synergy H1 全功能微孔板檢測(cè)儀：美國(guó)伯騰儀器有限公司；SW-CJ-1FD 超凈工作臺(tái)：上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；GHP 隔水式恒溫培養(yǎng)箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；LDZX 全自動(dòng)高壓滅菌鍋：上海申安醫(yī)療器械廠；浦春JY 系列電子天平：上海浦春計(jì)量?jī)x器有限公司；XH-C 漩渦混勻器：常州未來(lái)儀器制造有限公司；PHS-3 型pH 計(jì)：上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 菌懸液的制備

將金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌活化后，分別接種于 TSB 培養(yǎng)基，于 37 ℃、120 r/min 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜。將菌懸液稀釋至OD600nm約為0.1，備用[12]。

1.3.2 單一菌和混合菌生物被膜的培養(yǎng)

將金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌以1%的接種量分別接種于事先裝有200 μL TSB 培養(yǎng)基的96 孔微量板中，37 ℃下培養(yǎng)24 h 后，微孔板檢測(cè)儀測(cè)其630 nm 下的光密度值A(chǔ)1，空白對(duì)照記為A1C?？瞻讓?duì)照組只加TSB 培養(yǎng)基，且試驗(yàn)組及對(duì)照組均進(jìn)行3 次平行試驗(yàn)。將3 株單一菌懸液以體積比1 ∶1 ∶1 混合后，以1%的接種量接種于每孔添加了200 μL TSB 培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)96 孔板中。在最適條件下培養(yǎng)后，用微孔板檢測(cè)儀測(cè)定630 nm 下的光密度值，處理方法同單一菌[13]。

1.3.3 生物被膜黏附率的測(cè)定

棄去96 孔板中的培養(yǎng)基后，每空加入300 μL 磷酸鹽緩沖液沖洗3 次；然后于每孔中添加200 μL 無(wú)水甲醇固定15 min 后棄去懸浮液，并于60 ℃下干燥1 h；隨后添加200 μL 2 %結(jié)晶紫染液染色20 min，蒸餾水沖洗孔壁至沖洗液無(wú)色，干燥；最后于每孔中添加300 μL 33%冰醋酸，放置10 min；微孔板檢測(cè)儀震蕩 10 min 后測(cè)定 A2和 A2c[14]。黏附率（B 值）的計(jì)算公式為：

式中：A1、A2為培養(yǎng)和染色后的光密度值；A1c、A2c為空白對(duì)照的光密度值。

1.3.4 混合菌生物被膜最佳形成條件的確定

1.3.4.1 培養(yǎng)基pH 值、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)混合菌生物被膜黏附率的影響

分別配制 pH 值為 5、6、7、8、9 的 TSB 培養(yǎng)基，滅菌[15]。每孔中分別加入200 μL 上述培養(yǎng)基，混合菌接種后于37 ℃下靜置培養(yǎng)24 h?；旌暇じ铰实臋z測(cè)如上所述，平行試驗(yàn)3 次。以混合菌生物被膜的黏附率確定最佳培養(yǎng)基pH 值。用此方法依次確定混合菌生物被膜的最佳培養(yǎng)溫度（25、30、37、40、45 ℃）和培養(yǎng)時(shí)間（12、24、36、48、60 h）[16]。

1.3.4.2 通過(guò)響應(yīng)面分析確定混合菌生物被膜最佳培養(yǎng)條件

依據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)培養(yǎng)基pH 值、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間3 個(gè)影響因素進(jìn)行響應(yīng)面分析。使用Design Expert 8.0.6 軟件設(shè)計(jì)模型，獲取最佳培養(yǎng)條件參數(shù)。

1.3.5 不同營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)生物被膜黏附率的影響

1.3.5.1 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響

分別配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%、0.4%、0.8%、1.6%、3.2%、6.4%的TSB 培養(yǎng)基，滅菌。每孔中分別加入200 μL 不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的TSB 培養(yǎng)基，單一菌和混合菌分別在最適條件下培養(yǎng)[17]。參照1.3.3 測(cè)定單一菌和混合菌生物被膜的黏附率，進(jìn)行3 次平行試驗(yàn)。

1.3.5.2 NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響

分別配制含NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%的 TSB 培養(yǎng)基，滅菌后于每孔中加入200 μL 含不同NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)的TSB培養(yǎng)基，單一菌和混合菌生物被膜的培養(yǎng)方法及黏附率的檢測(cè)方法如1.3.2 和1.3.3 所述，平行試驗(yàn)3 次[18]。

1.3.5.3 葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)混合菌生物被膜黏附率的影響

分別配制含葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%的 TSB 培養(yǎng)基，滅菌后于每孔中加入200 μL 含不同葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的TSB 培養(yǎng)基，單一菌和混合菌生物被膜的培養(yǎng)方法及黏附率的檢測(cè)方法同1.3.2 和1.3.3，平行試驗(yàn)3 次[19]。

1.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

利用Microsoft Excel 2016 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)作圖處理，Design Expert 8.0.6 軟件設(shè)計(jì)響應(yīng)面模型。

2 結(jié)果與分析

2.1 混合菌生物被膜最佳形成條件的確定

2.1.1 不同培養(yǎng)基pH 值、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)混合菌生物被膜黏附率的影響

將不同條件下形成的混合菌生物被膜結(jié)晶紫染色法染色后，對(duì)混合菌生物被膜黏附率（B 值）進(jìn)行測(cè)定，確定最佳培養(yǎng)基pH 值、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間，結(jié)果如圖1 所示。

圖1 培養(yǎng)基pH 值、溫度和時(shí)間對(duì)混合菌生物被膜黏附率的影響Fig.1 Effect of medium pH value，temperature，time on the adhesion rate of mixed biofilm

由圖1 可知，混合菌生物被膜的黏附率隨著培養(yǎng)基pH 值的變化呈現(xiàn)先提高后降低的趨勢(shì)，并于pH 7時(shí)達(dá)到最大黏附率0.036 4。馬燕等[20]研究蜂房哈夫尼亞菌生物被膜時(shí)發(fā)現(xiàn)，中性培養(yǎng)條件更利于其生物被膜的形成。因此，在混合菌生物被膜培養(yǎng)中應(yīng)選用此培養(yǎng)基pH 值，過(guò)酸或過(guò)堿的培養(yǎng)基都會(huì)抑制混合菌生物被膜的形成?；旌暇锉荒さ酿じ铰孰S著培養(yǎng)溫度的增加也呈現(xiàn)先提高后降低的趨勢(shì)，在37 ℃時(shí)的混合菌黏附率高達(dá)0.035 1。低于37 ℃時(shí)，由于溫度過(guò)低，生物被膜形成緩慢，導(dǎo)致黏附能力較弱。而超過(guò)37 ℃后，黏附率明顯下降，說(shuō)明過(guò)高的溫度會(huì)減弱生物被膜的形成能力。郝旭昇等[21]探究了不同生長(zhǎng)溫度（12、25、37 ℃）對(duì)阪崎克羅諾腸桿菌ATCC 29004 生物被膜形成的影響，發(fā)現(xiàn)25 ℃和37 ℃下阪崎克羅諾腸桿菌的黏附菌量和生物被膜形成量高于12 ℃，但是阪崎克羅諾腸桿菌在37 ℃形成了更加致密且立體的生物被膜結(jié)構(gòu)。綜合考慮，混合菌生物被膜的最佳培養(yǎng)溫度為37 ℃。不同培養(yǎng)時(shí)間對(duì)B 值的影響顯著，培養(yǎng)24 h時(shí)所得的混合菌黏附率明顯高于其他組分，因此選用24 h 為最佳培養(yǎng)時(shí)間。

2.1.2 響應(yīng)面法優(yōu)化混合菌生物被膜的形成條件

依據(jù)單因素試驗(yàn)分析結(jié)果，以黏附率（Y）為響應(yīng)值，采用Design Expert 8.0.6 設(shè)計(jì)三因素三水平的Box-Behnken 試驗(yàn)。響應(yīng)面模型因素與水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平表Table 1 Factors and their levels of response surface design

表2 Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table 2 Response surface design arrangement and corresponding experimental data

應(yīng)用回歸分析對(duì)方程和方程的各因子進(jìn)行方差分析，分析結(jié)果如表3 所示。

從表3 中可以看出，該模型極其顯著（P＜0.01），失擬項(xiàng)不顯著（P＞0.05），模型的決定系數(shù) R2=0.985 3，因此可選用該方程代替真實(shí)試驗(yàn)點(diǎn)對(duì)響應(yīng)值有效預(yù)測(cè)和分析。培養(yǎng)時(shí)間和培養(yǎng)溫度對(duì)混合菌生物被膜的形成影響極顯著（P＜0.01），二次項(xiàng) A2、B2和 C2極顯著（P＜0.01），交叉項(xiàng) AB、BC 極顯著（P＜0.01），其它均不顯著。各因素對(duì)混合菌生物被膜黏附率的影響程度順序?yàn)锳>B>C，即培養(yǎng)溫度＞培養(yǎng)時(shí)間＞培養(yǎng)基pH 值。

將某因素固定在中心值不變，分析另外兩個(gè)因素的交互作用對(duì)混合菌生物被膜黏附率的影響結(jié)果，如圖2 所示。

圖2 兩因素及其交互作用響應(yīng)面圖Fig.2 Surface plot and contour for reciprocal effection of three operating parameters

比較圖2 曲面圖和等高線可以看出，培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)混合菌生物被膜的黏附率影響顯著，表現(xiàn)為曲面較陡。而培養(yǎng)基pH 值對(duì)于黏附率影響不顯著，培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間的交互作用極顯著。各因素之間兩兩交互作用對(duì)混合菌生物被膜黏附率的影響強(qiáng)度由強(qiáng)到弱依次為：AB＞BC＞AC，與方差分析結(jié)果一致?；貧w方程求解的最佳培養(yǎng)條件經(jīng)驗(yàn)證為：培養(yǎng)溫度36.2 ℃，培養(yǎng)時(shí)間21.3 h，培養(yǎng)基pH 7.12，此條件下混合菌生物被膜的黏附率可達(dá)0.032 4。為實(shí)際操作方便，將理論混合菌生物被膜形成條件調(diào)整為培養(yǎng)溫度為36 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為22 h，培養(yǎng)基pH 值為7。

2.2 不同營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)生物被膜黏附率的影響

2.2.1 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響

培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響見(jiàn)圖3。

圖3 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響Fig.3 Effect of medium quality score on the adhesion rate of biofilm

微生物生物被膜的形成過(guò)程中，營(yíng)養(yǎng)條件是影響其黏附率的最大因素之一。TSB 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)的不同，使其為微生物的黏附提供的營(yíng)養(yǎng)不同，造成微生物生物被膜黏附率的波動(dòng)。由圖3 可知，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和混合菌生物被膜的黏附率隨著培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)的變化呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì)。且當(dāng)TSB 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.6%時(shí)，形成的生物被膜黏附率最大，即大腸桿菌黏附率為0.065 2，沙門氏菌為0.030 2，金黃色葡萄球菌為0.083 2 和混合菌為0.035。單一菌和混合菌的黏附率在TSB 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.2%時(shí)呈明顯下降趨勢(shì)，因?yàn)槲⑸镌跔I(yíng)養(yǎng)脅迫環(huán)境下傾向于形成生物被膜，以保護(hù)自身不被外界不利條件所影響。研究發(fā)現(xiàn)混合菌生物被膜的黏附率低于金黃色葡萄球菌和大腸桿菌單獨(dú)形成生物被膜的黏附率。這表明混合菌生物被膜中的菌株間互相存在著競(jìng)爭(zhēng)作用，這種競(jìng)爭(zhēng)作用的存在會(huì)使得自然條件下形成的混合菌生物被膜的黏附率有所降低。

2.2.2 NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響

NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)3 株單一菌及其混合菌生物被膜黏附率的影響見(jiàn)圖4。

圖4 NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響Fig.4 Effect of NaCl quality score on the adhesion rate ofbiofilm

從圖4 可以看出，單一菌和混合菌生物被膜的黏附率隨著NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加逐漸降低。剛添加0.2%的NaCl 時(shí)，4 種生物被膜的形成都已受到抑制。當(dāng)NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.4%時(shí)，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌單獨(dú)形成的生物被膜明顯被抑制，即下降率為大腸桿菌0.026，金黃色葡萄球菌0.042，沙門氏菌0.012。但混合菌生物被膜的總體下降率明顯低于3 株單一菌的下降率，說(shuō)明混合菌生物被膜對(duì)NaCl 的敏感性較弱。根據(jù)文獻(xiàn)[22]可知，混合菌生物被膜中菌株的相互競(jìng)爭(zhēng)作用雖導(dǎo)致黏附率降低，但是由于不同微生物分泌的胞外物質(zhì)不同，增加了混合菌生物被膜的復(fù)雜性使得混合菌生物被膜對(duì)外界的抵抗力較強(qiáng)。高濃度的NaCl 產(chǎn)生的滲透壓可使細(xì)胞脫水直至死亡[23]。因此，NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)越高，微生物生物被膜的黏附率越低?？赏茰y(cè)一定濃度的NaCl 可以有效抑制微生物形成生物被膜，為食品加工中有效控制生物被膜的生長(zhǎng)提供依據(jù)。

2.2.3 葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響

葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響見(jiàn)圖5。

圖5 葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)生物被膜黏附率的影響Fig.5 Effect of glucose quality score on the adhesion rate of biofilm

微生物生物被膜中的主要成分是多糖，糖源是調(diào)控微生物形成生物被膜的主要因素之一。靳嘉巍等[24]研究表明，碳源直接決定了微生物形成生物被膜的能力，且含糖量高的微生物形成生物被膜的能力愈高。由圖5 可知，單一菌和混合菌在含葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0%～0.8%的TSB 培養(yǎng)基中的黏附率是逐漸上升的，說(shuō)明葡萄糖可增強(qiáng)單一菌和混合菌生物被膜的形成能力。且大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和混合菌的黏附率于葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%時(shí)達(dá)到最大，即大腸桿菌黏附率為0.079，沙門氏菌為0.029 8，金黃色葡萄球菌為0.096 6 和混合菌為0.042 2。葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.0%～1.4%間黏附率雖有所下降，但仍可促進(jìn)細(xì)菌黏附作用。因此可知，一定濃度的碳源可有效促進(jìn)微生物形成生物被膜，且混合菌生物被膜對(duì)葡萄糖較單一菌生物被膜敏感性強(qiáng)，在葡萄糖僅為0.2%時(shí)黏附率已高達(dá)0.038 2，且基本維持穩(wěn)定。因此在食品加工過(guò)程中，應(yīng)多次清洗食品加工器具及設(shè)備，盡可能降低食品加工過(guò)程中的糖分殘留量，以避免微生物形成生物被膜而造成食品安全隱患。

3 結(jié)論

以96 孔微量板作為單一菌和混合菌生物被膜的黏附載體，通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)化了培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間和培養(yǎng)基pH 值對(duì)食源性病原菌金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌形成的混合菌生物被膜的最佳形成條件。結(jié)果表明，混合菌生物被膜的最佳培養(yǎng)溫度為36 ℃，最佳培養(yǎng)時(shí)間為22 h，最適培養(yǎng)基pH 值為7。在此最佳培養(yǎng)條件下進(jìn)一步研究營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)單一菌和混合菌生物被膜形成能力的影響，研究發(fā)現(xiàn)TSB 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)、NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)和葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)均對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌和混合菌生物被膜的形成能力有顯著影響。其中TSB 培養(yǎng)基質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.6 %時(shí)形成的生物被膜黏附率最大；碳源加強(qiáng)了單一菌和混合菌生物被膜的黏附率，因此在高糖類食品生產(chǎn)中應(yīng)格外注意病原菌生物被膜的形成；而當(dāng)NaCl 質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于0.4%時(shí)，對(duì)食源性病原菌生物被膜的形成有一定的抑制作用，因此在食品加工中可以通過(guò)添加NaCl，并結(jié)合其它抑菌方法來(lái)抑制清除食源性病原菌形成的生物被膜。