熱性驚厥患兒血清IL-6、IL-10水平與呼吸道病毒感染的關(guān)系

楊艷娥 何文 李亞紅 劉潔 馬歆花 楊琳

熱性驚厥(Febrile seizures，F(xiàn)S)是兒童時期常見的驚厥性疾病，是體溫驟然升高導(dǎo)致大腦出現(xiàn)異常放電活動，從而引起全身肌肉的痙攣性發(fā)作，多見于嬰幼兒，患者年齡多為6個月到5歲，其發(fā)病率約為4%[1]。目前多項研究表明，呼吸道病毒感染是造成熱性驚厥的主要原因[2]，小兒常見呼吸道感染病原體有流感病毒A(Human Influenza A virus，F(xiàn)luA)、流感病毒B(Human Influenza B virus，F(xiàn)luB)、副流感病毒(Parainfluenza virus，PIV)、腺病毒(Adenovirus，ADV)、呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus，RSV)等[3]，但具體發(fā)病機制尚未明確。近期臨床研究發(fā)現(xiàn)，小兒熱性驚厥與細(xì)胞炎癥因子水平存在一定相關(guān)性，血清白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)可能參與了FS疾病的發(fā)生、發(fā)展過程[4-7]，但FS患兒血清IL-6、IL-10水平是否與呼吸道病毒感染有關(guān)，目前則鮮有報道。本研究通過檢測FS患兒血清中IL-6、IL-10水平，并分析不同類型病毒感染熱性驚厥患兒臨床特征及其相關(guān)危險因素。旨在明確FS患兒血清IL-6、IL-10水平與呼吸道病毒感染的關(guān)系，具體報道如下。

資料與方法

一、臨床資料

選取2016年4月～2018年4月來西安醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院就診的136例熱性驚厥患兒為研究對象，納入標(biāo)準(zhǔn)：①患兒均符合熱性驚厥的診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；②年齡0.5～5歲，體溫38～40℃；③患兒家屬均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①原發(fā)性心臟病、心臟瓣膜疾病及肝腎功能障礙患兒；②神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育異常、神經(jīng)發(fā)育遲緩患兒；③血液系統(tǒng)疾病、自身免疫系統(tǒng)疾病及其他代謝性疾病。按照疾病類型分為單純性熱性驚厥(Simple febrile seizures，SFS)和復(fù)雜性熱性驚厥(complex febrile seizures，CFS)。

SFS又稱典型驚厥，診斷標(biāo)準(zhǔn)為：①首次發(fā)病年齡4～36月；②體溫>38℃；③驚厥全身性發(fā)作，伴短暫意識喪失，④驚厥發(fā)作時間≤15min；⑤每次發(fā)熱伴驚厥發(fā)作一次；⑥無神經(jīng)系統(tǒng)感染及其他腦損傷。CFS又稱非典型驚厥，診斷標(biāo)準(zhǔn)為：①驚厥發(fā)作時間≥15min；②1d內(nèi)發(fā)作超過2次；③部分性發(fā)作，④反復(fù)發(fā)作，發(fā)作總次數(shù)超過5次。具備其中一個條件即可診斷為CFS。

SFS組72例，男39例，女33例，年齡0.6～5歲，平均年齡(2.53±1.75)歲，和CFS組64例，男35例，女29例，年齡0.5～5歲，平均年齡(2.45±1.82)歲，同期選擇88例健康兒童作為對照組研究對象，男48例，女40例，年齡0.6～5歲，平均年齡(2.52±1.78)歲。三組受試者性別、年齡等一般資料相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)西安醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

二、主要試劑及儀器

IL-6 ELISA試劑盒、IL-10 ELISA試劑盒均購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司，多功能酶標(biāo)儀購自美國Bio-Rad公司，其他檢測試劑購自上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司。

三、研究方法

1 標(biāo)本收集及處理

對所有受試者于清晨空腹時采集靜脈血5mL，靜置0.5h后，在4℃離心機(3000r/min)上離心10min，取上清，置于-20℃冰箱保存待測。于清晨收集鼻咽部分泌物及鼻咽部脫落細(xì)胞直接進行檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清IL-6、IL-10表達水平，血清IL-10水平測定采用IL-10 ELISA試劑盒，血清IL-6水平測定采用IL-6 ELISA試劑盒，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。為減小誤差，待測樣品均重復(fù)測定3次。采用免疫熒光法對所有受試者鼻咽部脫落細(xì)胞進行病毒抗原檢測，檢測病原類型有：流感病毒A型、流感病毒B型、副流感病毒、腺病毒、合胞病毒。

表1 三組一般資料比較

2 臨床數(shù)據(jù)收集

統(tǒng)計并記錄患者的性別、年齡、FS發(fā)作時體溫、熱程中最高體溫(熱峰)、驚厥持續(xù)時間、熱程、驚厥表現(xiàn)形式(部分性發(fā)作)、同一熱程多次驚厥發(fā)作、發(fā)作后出現(xiàn)PPIC等臨床特征。

四、統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

一、熱性驚厥患兒的臨床診斷結(jié)果

136例熱性驚厥患兒中診斷結(jié)果為上呼吸道感染63例(46.32%)，支氣管炎25例(18.38%)，支氣管肺炎14例(10.29%)，腹瀉9例(6.62%)，皰疹性口咽炎12例(8.82%)，急性腸胃炎13例(9.56%)，其中感染流感病毒A 41例(30.15%)，感染副流感病毒14例(10.29%)，感染腺病毒10例(7.35%)，感染合胞病毒2例(1.47%)，感染流感B病毒0例。

二、受試者血清中IL-6、IL-10水平

CFS組患兒血清中IL-6水平顯著高于SFS組和對照組(P<0.05)，SFS組患兒血清中IL-6水平顯著高于對照組(P<0.05)。CFS組患兒血清中IL-10水平顯著低于SFS組和對照組(P<0.05)，SFS組患兒血清中IL-10水平顯著低于對照組(P<0.05)(見表1)。

表1 受試者血清中IL-6、IL-10水平比較

注：與對照組比較，①P<0.05；與SFS組比較，②P<0.05。

三、FluA、PIV、ADV、RSV四種病毒感染熱性驚厥患兒血清中的IL-6、IL-10水平

FluA組熱性驚厥患兒血清中IL-6水平顯著高于PIV組、ADV組、RSV組(P<0.05)，F(xiàn)luA組熱性驚厥患兒血清中IL-10水平顯著低于PIV組、ADV組、RSV組(P<0.05)，PIV組、ADV組、RSV組熱性驚厥患兒血清中IL-6、IL-10水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)(見表2)。

表2 FluA組、PIV組、ADV組、RSV組熱性驚厥患兒血清中IL-6、IL-10水平比較

注：與PIV組比較，①P<0.05；與ADV組比較，②P<0.05；與RSV組比較，③P<0.05。

四、FluA、PIV、ADV、RSV四種病毒感染熱性驚厥患兒的臨床特征

FluA、PIV、ADV、RSV四組之間年齡、熱峰、熱程、同一熱程多次驚厥發(fā)作、PPIC比較差異具有顯著性(P<0.05)。FluA感染患兒的年齡最大，熱峰最高(P<0.05)；ADV感染患兒熱程最長(P<0.05)；FluA感染同一熱程中發(fā)作多次驚厥患兒數(shù)量最多；ADV感染患兒發(fā)生PPIC最多(見表3)。

表3 FluA、PIV、ADV、RSV四種病毒感染患兒的臨床特征

五、非典型熱性驚厥患兒臨床特征的危險因素分析

非典型熱性驚厥患兒主要臨床特征有部分性發(fā)作、同一熱程中多次驚厥發(fā)作、發(fā)作后出現(xiàn)PPIC。將年齡、性別、FS家族病史、FluA、PIV、ADV、RSV感染等作為Logistic模型的自變量，將FS非典型特征中部分性發(fā)作、同一熱程中多次驚厥發(fā)作、發(fā)作后出現(xiàn)PPIC分別作為因變量。結(jié)果顯示，年齡與部分性發(fā)作有關(guān)(P<0.05)，同一熱程中多次驚厥發(fā)作與年齡、FluA病毒有關(guān)(P<0.05)。PPIC與熱程、同一熱程中多次驚厥發(fā)作、ADV感染有關(guān)(P<0.05)(見表4)。

表4 FS非典型臨床特征的危險因素

討 論

熱性驚厥(FS)是嬰幼兒時期伴有發(fā)熱的驚厥疾病類型之一，大多由病毒等感染性疾病引起。上呼吸道感染是最為常見的伴發(fā)FS的疾病，其臨床表現(xiàn)為：意識突然喪失，多伴有雙眼球上翻，凝視或斜視，面肌或四肢強直陣攣或陣攣性發(fā)作，發(fā)作歷時短暫，嚴(yán)重者驚厥可反復(fù)發(fā)作，甚至呈持續(xù)狀態(tài)，嚴(yán)重影響患兒的身體健康[9-10]。FS的發(fā)病機制至今尚未明確，一般認(rèn)為在驚厥性放電時，體溫升高與肌肉抽搐使得腦代謝過程加快，消耗能量增加，給大腦造成了極大的代謝負(fù)擔(dān)，而兒童腦發(fā)育還未完全成熟，所以熱性驚厥發(fā)作和年齡有很大的關(guān)系，幼兒發(fā)病率顯著高于成人[11]。楊軍等[12]研究表明發(fā)病年齡、發(fā)作體溫、復(fù)雜性FS、有無家族史等是導(dǎo)致FS復(fù)發(fā)的獨立危險因素?？赡芘c患兒發(fā)病機制有關(guān)，此外呼吸道病毒感染也是造成熱性驚厥的主要原因，但具體機制不詳，研究表明小兒熱性驚厥可能與細(xì)胞免疫因子有關(guān)[13]。因此尋找有效的炎癥因子來反映熱性驚厥患兒的疾病進程，并探討其與呼吸道病毒感染的關(guān)系，對于評估患兒病情具有重要的意義。

IL-6是神經(jīng)細(xì)胞因子家族中的一員，是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴因子。能夠促進和活化T細(xì)胞及刺激B細(xì)胞和免疫球蛋白分泌其他生長因子，且具有參與多種細(xì)胞生長、分化和調(diào)節(jié)的功能，但IL-6表達過量可導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生病理改變[14]，李珍等[15]研究表明IL-6基因多態(tài)性與小兒熱性驚厥發(fā)病具有顯著相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示復(fù)雜性熱性驚厥患兒血清IL-6水平顯著高于單純性熱性驚厥組和對照組，單純性熱性驚厥患兒血清IL-6水平顯著高于對照組，提示血清IL-6水平可能與小兒熱性驚厥發(fā)病嚴(yán)重程度有關(guān)。

IL-10是一種抗炎性因子，能夠參與免疫細(xì)胞及炎癥細(xì)胞的生物調(diào)節(jié)，自身免疫性疾病、感染性疾病等多種疾病中有發(fā)揮下調(diào)炎癥反應(yīng)，拮抗炎性介質(zhì)的作用[16]。夏烈新等[17]研究表明癲癇大鼠海馬神經(jīng)元IL-10水平顯著低于正常大鼠，說明IL-10可能有抗癲癇作用。梁粵[18]研究表明肺炎支原體患兒喘息組與非喘息組外周血IL-10水平均顯著低于正常兒童，說明IL-10對炎癥反應(yīng)具有負(fù)調(diào)節(jié)作用。本研究結(jié)果顯示復(fù)雜性熱性驚厥患兒血清IL-10水平顯著低于單純性熱性驚厥組和對照組，單純性熱性驚厥患兒血清IL-10水平顯著低于對照組，提示血清IL-10水平可能具有一定的抗炎癥反應(yīng)的作用，進而影響熱性驚厥疾病的進程。

研究表明熱性驚厥多由病毒性上呼吸道感染引起，常見的呼吸道感染病毒有FluA、FluB、PIV、ADV和RSV，不同病毒類型患兒臨床表現(xiàn)均不相同[19]。本研究結(jié)果顯示FluA、PIV、ADV、RSV四組之間年齡、熱峰、熱程、同一熱程多次驚厥發(fā)作、PPIC比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，提示年齡、熱峰、熱程、同一熱程多次驚厥發(fā)作、PPIC等可能是影響熱性驚厥患兒疾病發(fā)展及預(yù)后的重要因素。Pavlidou等[20]研究了FS患兒癲癇的預(yù)后因素，包括患兒病史、發(fā)熱時間、發(fā)熱原因、發(fā)熱頻率、年齡、病灶、FS持續(xù)時間和同一發(fā)熱期間驚厥復(fù)發(fā)等相關(guān)信息。結(jié)果發(fā)現(xiàn)復(fù)雜性FS患兒癲癇風(fēng)險是其他患兒的3.6倍，F(xiàn)S發(fā)病年齡、家族史、多次發(fā)作等是FS復(fù)發(fā)的顯著因素，本研究結(jié)果顯示年齡與部分性發(fā)作有關(guān)，同一熱程中多次驚厥發(fā)作與年齡、FluA病毒有關(guān)。PPIC與熱程、同一熱程中多次驚厥發(fā)作、ADV感染有關(guān)。提示年齡、同一熱程中多次驚厥發(fā)作、FluA、PPIC等可能是FS發(fā)作的重要因素，臨床上應(yīng)注意及早預(yù)防。進一步分析顯示FluA組熱性驚厥患兒血清中IL-6水平顯著高于PIV組、ADV組、RSV組，F(xiàn)luA組熱性驚厥患兒血清中IL-10水平顯著低于PIV組、ADV組、RSV組，且FluA感染的年齡最大，熱峰最高，F(xiàn)luA感染同一熱程發(fā)作多次驚厥患兒數(shù)量最多，提示FluA可能是FS發(fā)病的高危因素。

綜上所述，F(xiàn)S患兒血清IL-6表達水平上調(diào)，IL-10表達水平下調(diào)，不同病毒感染的熱性驚厥患兒臨床表現(xiàn)不同，年齡、同一熱程中多次驚厥發(fā)作、FluA、PPIC等可能是FS發(fā)作的重要因素，其中FIuA可能是FS發(fā)病的高危因素。然而，本研究僅初步探究FS患兒血清IL-16、IL-10水平與呼吸道病毒感染的相關(guān)性，具體生物學(xué)相關(guān)調(diào)節(jié)機制仍未明確，需進一步深入研究。另外，本研究樣本數(shù)量較少，下一步準(zhǔn)備擴大樣本容量繼續(xù)進行研究，以期為FS患者的臨床治療提供一定參考依據(jù)。