袁春輝
摘要 ? ?雞葡萄球菌病傳播途徑多,流行范圍廣,且沒有明顯的季節(jié)性,針對本病制定的預(yù)防措施效果不明顯。通過對送檢的淮南麻黃雞進(jìn)行臨床觀察、病理剖檢、細(xì)菌培養(yǎng)和PCR檢測,可以確診為金黃色葡萄球菌感染;同時對分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),篩選出高敏藥物,為治療提供依據(jù)。
關(guān)鍵詞 ? ?雞金黃色葡萄球菌病;淮南麻黃雞;細(xì)菌分離;藥敏試驗(yàn)
中圖分類號 ? ?S858.31 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 ? ?B
文章編號 ? 1007-5739(2019)20-0221-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識碼(OSID)
雞葡萄球菌病是由葡萄球菌引起的一種傳染病,是養(yǎng)雞業(yè)中危害嚴(yán)重的疾病之一,其致病菌主要是金黃色葡萄球菌,病菌類型多,給養(yǎng)雞業(yè)造成較大損失[1]。雛雞感染后多表現(xiàn)為急性敗血病的癥狀和病理變化,中雛為急性或慢性,成年雞多為慢性,雛雞和中雛感染后死亡率較高。現(xiàn)就肥東縣某養(yǎng)雞場雞葡萄球菌病的診治介紹如下。
1 ? ?發(fā)病與臨床癥狀
肥東縣某養(yǎng)雞場飼養(yǎng)逾5 000只20日齡淮南麻黃雞,飼養(yǎng)方式為籠養(yǎng)。雞于15 d前開始發(fā)病,死亡率為3%~4%。免疫過禽流感H5、H7、H9疫苗以及新城疫疫苗,沒有用藥情況,母雞產(chǎn)蛋率正常,小雞出殼率和孵化率正常。通過對送檢雛雞的臨床診斷發(fā)現(xiàn),雛雞共濟(jì)失調(diào)、精神沉郁、拉綠色稀糞。
2 ? ?剖檢
通過對病雞進(jìn)行解剖,可以看到明顯的病變部位和病變特征(圖1)。
3 ? ?實(shí)驗(yàn)室檢查
在無菌條件下剪取內(nèi)臟器官,涂布于培養(yǎng)基上,并在超凈工作臺上用四區(qū)劃線的方法進(jìn)行劃板。劃完之后,將培養(yǎng)基置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)過夜。菌落形態(tài)如圖2所示。
對病菌進(jìn)行革蘭氏染色,然后用油鏡觀察發(fā)現(xiàn),呈紫色,為革蘭氏陽性菌;細(xì)菌呈球形或橢圓形,無鞭毛,無芽孢,無莢膜,大多數(shù)呈葡萄串狀排列或成對分散排列[2](圖3)。
4 ? ?分離菌株的分子生物學(xué)鑒定
對純化后的細(xì)菌進(jìn)行細(xì)菌16S rRNA PCR檢測,PCR產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳,然后于凝膠成像系統(tǒng)中觀察。結(jié)果顯示,被檢樣品在1 500 bp左右出現(xiàn)特異性條帶(圖4)。將該菌16S rRNA擴(kuò)增產(chǎn)物送到合作的公司進(jìn)行測序,結(jié)果在NCBI上進(jìn)行同源性比較(表1)。結(jié)果顯示,分離菌株的16S rRNA與比對的金黃色葡萄球菌序列同源性達(dá)99%。
5 ? ?藥效試驗(yàn)
在無菌條件下,用鑷子夾取14種藥敏紙片貼于培養(yǎng)基表面,并輕輕壓實(shí),每個培養(yǎng)基表面貼7張藥敏紙片,保持每個紙片到中心的距離相同并且適中,然后將制作好的樣品放到37 ℃恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。12 h后,根據(jù)其產(chǎn)生的抑菌圈大小判斷該菌對各種抗菌藥物的敏感度(圖5)。分離出的細(xì)菌對林可霉素、氨芐西林、阿莫西林、紅霉素高敏,對阿奇霉素、羅紅霉素、萬古霉素、新霉素、慶大霉素、多西環(huán)素、諾氟沙星中敏;對復(fù)方新諾明、青霉素、頭孢氨芐耐受(表2)。
6 ? ?治療
根據(jù)分離菌株的藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果,建議養(yǎng)殖場主可選用林可霉素、氨芐西林、阿莫西林和紅霉素等對病雞進(jìn)行治療,及時控制病情,減少雞場經(jīng)濟(jì)損失。
7 ? ?體會
近年來,隨著規(guī)?;B(yǎng)雞場的迅速發(fā)展,很多雞病的針對性預(yù)防難度加大,加強(qiáng)疾病的診斷和有效治療顯得十分必要[3-4]。本案例表明,該菌株對林可霉素、氨芐西林、阿莫西林和紅霉素等特別敏感。因此,雞場應(yīng)立即用林可霉素、氨芐西林、阿莫西林和紅霉素等對患雞進(jìn)行治療。在使用抗生素治療時要注意不能過量,避免產(chǎn)生耐藥性問題,在用藥時要采用交叉用藥、聯(lián)合用藥[5-6]。
葡萄球菌病是一種條件性疾病,廣泛存在于自然中[7]。因此,預(yù)防葡萄球菌病主要從環(huán)境方面入手,經(jīng)常巡查和檢修雞舍設(shè)施,防止雞只出現(xiàn)外部的物理傷害;在注射疫苗時用消毒劑徹底消毒注射部位,防止細(xì)菌感染;要做好雞群的保健工作,在飼料中多添加維生素和抗應(yīng)激的中藥或西藥;育雛時要注意育雛舍的衛(wèi)生,做好消毒工作;另外,加強(qiáng)管理尤其重要,例如飼養(yǎng)員針對可疑的雞要及時進(jìn)行隔離和治療,對身體上有傷的雞最好挑出來重點(diǎn)培養(yǎng),對好動、好斗的雞也要單獨(dú)挑出來培養(yǎng),從傳染途徑上杜絕病菌傳播;負(fù)責(zé)人也要制定好消毒程序,特別是多水的季節(jié),要著重注意排除雞舍地面的水,做好干燥工作,從根源上杜絕該病菌的傳播[8]。
8 ? ?參考文獻(xiàn)
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現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技2019年20期