慕薩萊思葡萄酒對(duì)高脂血癥SD大鼠血脂的影響

李 虎，楊 悅，李婷婷，張麗娟，姜 薇，何 忻，侯旭杰，3*

（1.阿克蘇地區(qū)疾病預(yù)防控制中心，新疆 阿克蘇 843000；2.塔里木大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，新疆 阿拉爾 843300；3.南疆特色農(nóng)產(chǎn)品深加工兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 阿拉爾 843300）

血脂是生命細(xì)胞的基礎(chǔ)代謝必要物質(zhì)，脂代謝的主要指標(biāo)常以血清中的總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（highdensity lipoprotein cholesterol，LDL-C）等的含量來(lái)衡量[1]。高脂血癥的形成與血液中的LDL-C、HDL-C有關(guān)，HDL-C可以有效抑制細(xì)胞對(duì)LDL-C的攝取，阻礙膽固醇在細(xì)胞內(nèi)堆積，把過(guò)多的膽固醇以脂的形式轉(zhuǎn)運(yùn)出來(lái)，從而阻止動(dòng)脈硬化的發(fā)生[2]。同時(shí)，高水平的HDL-C有助于抗動(dòng)脈粥樣硬化，具有抑制低密度脂蛋白的氧化和保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的能力[3]。

脂代謝紊亂是導(dǎo)致心腦血管疾病蔓延和惡化的主要風(fēng)險(xiǎn)因素[4]。資料表明，全世界每年還有約1 200萬(wàn)人死于心血管疾病和腦中風(fēng)，我國(guó)的血脂疾病患病率達(dá)18.6%[5]。因此，及早對(duì)高脂血癥的預(yù)防和控制顯得尤為重要。常規(guī)的降脂類藥物的成本較高并且具有一定的毒副作用[6-8]。研究顯示，多酚、類黃酮、白藜蘆醇等天然抗氧化物質(zhì)有降低患高脂血癥的作用[9-12]。這種以天然植物為基礎(chǔ)的飲食療法，不僅可以降低用藥成本，并且?guī)缀鯖](méi)有毒副作用，而逐漸成為高脂血癥研究熱點(diǎn)。

慕薩萊思葡萄酒歷史悠久，以和田紅葡萄為原料，采用傳統(tǒng)的釀造工藝釀造，是一種具有西域特色的葡萄酒。慕薩萊思葡萄酒于2007年10月被列入國(guó)家非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)范圍[13]。慕薩萊思葡萄酒呈棕褐色，口味以酸甜為主、略帶苦澀，香氣豐富、具有典型的焦糖香和醇香[14]。慕薩萊思葡萄酒含有原花青素、多酚等物質(zhì)，具有一定的保健功能，近年來(lái)對(duì)慕薩萊思葡萄酒的研究主要集中于發(fā)酵菌群、風(fēng)味物質(zhì)及產(chǎn)品特性的相關(guān)研究[15-16]，對(duì)其影響高脂血癥動(dòng)物體內(nèi)脂質(zhì)代謝還未見(jiàn)有相關(guān)報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)慕薩萊思葡萄酒對(duì)高脂血癥SD大鼠降血脂的作用，通過(guò)建立SD大鼠高脂血癥模型，分別灌胃慕薩萊思、脫酒精慕薩萊思、生理鹽水、酒精（11%vol），測(cè)定血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）含量，并計(jì)算致動(dòng)脈硬化指數(shù)（atherogenic index，AI）和肝臟指數(shù)，了解慕薩萊思對(duì)高脂血癥SD大鼠血清血脂水平的影響，以期為慕薩萊思葡萄酒在食品功能性研究方面提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料

SD大鼠（無(wú)特定病原體（specific pathogen free，SPF）級(jí)，56只，雌雄各半，合格證號(hào)：XY（新）2003-0001）：新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。慕薩萊思葡萄酒（酒精度11%vol）：新疆刀郎慕薩萊思有限公司；脫酒精慕薩萊思：取適量500 mL慕薩萊思葡萄酒，35 ℃，0.1 MPa，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)4 h后，蒸餾水補(bǔ)齊[17]；全脂奶粉：伊利乳品有限公司；雞蛋、豬油：當(dāng)?shù)剞r(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。

1.1.2 化學(xué)試劑

0.9%氯化鈉注射液：石家莊石藥集團(tuán)；總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測(cè)定試劑盒：南京建成生物工程研究所；膽固醇（食品級(jí)）：天津化學(xué)試劑公司；基礎(chǔ)飼料（SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)鼠糧）：新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心；豬膽鹽（生化試劑）：蘇州榮氏生物制品有限公司。

1.1.3 飼料

基礎(chǔ)飼料：粗蛋白24.3%、粗脂肪7.5%、粗灰粉8.6%、粗纖維3.5%、磷0.7%、鈣1.16%、含水量7.5%。高脂飼料：基礎(chǔ)飼料78.9%、豬油10%、蛋黃5%、奶粉5%、膽固醇1%，豬膽鹽0.1%。

1.2 儀器與設(shè)備

7060型自動(dòng)生化分析儀：日本日立精密儀器公司；SENCO-R型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海申生有限公司；754C型紫外分光光度計(jì)：上海天翔光學(xué)儀器有限公司；Mettler AE24型電子天平：上海精密儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物模型試驗(yàn)

（1）適應(yīng)性喂養(yǎng)

SPF級(jí)SD大鼠56只，雌雄各半，基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)（（20±3）℃，濕度60%，每日保證光照時(shí)間12 h，自由飲食、飲水）10 d后隨機(jī)分為7組：分別為空白對(duì)照組、高脂模型、酒精組、慕薩萊思（高、中、低）劑量組、慕薩萊思脫酒精組。

（2）高血脂大鼠喂養(yǎng)及給藥

除空白對(duì)照組喂食基礎(chǔ)飼料以外，其余6組喂食高脂飼料。同時(shí)各組分別灌胃給藥?？瞻讓?duì)照組、高脂血癥模型對(duì)照組灌胃給藥0.9%生理鹽水（9 mL/kg），慕薩萊思低、中、高劑量組分別灌胃給藥慕薩萊思（3 mL/kg、6 mL/kg、9 mL/kg），脫酒精慕薩萊思組灌胃給藥脫酒精后的慕薩萊思（9 mL/kg），酒精組灌胃給藥11%vol的食用酒精（9mL/kg），連續(xù)4周，每天1次。4周后，禁食12 h，麻醉，眼眶靜脈取血，血液離心后進(jìn)行血脂測(cè)定。解剖后取其肝臟，生理鹽水沖洗，濾紙吸干，稱量肝臟的質(zhì)量。

1.3.2 檢測(cè)方法

TC、TG、LDL-C、HDL-C的檢測(cè)：參照試劑盒說(shuō)明書。肝臟系數(shù)、致動(dòng)脈硬化指數(shù)（AI）計(jì)算公式如下：

1.3.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 13.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間差異檢驗(yàn)采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 高脂血癥SD大鼠模型的判定

對(duì)大鼠進(jìn)行高血脂飼料喂養(yǎng)，靜脈血TC、TG、LDL-C、HDL-C含量與空白對(duì)照組對(duì)比結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 高脂血癥SD大鼠模型的判定Table1 Identification of hyperlipidemia SD rats model

由表1可知，高脂模型組血清中TG、TC、LDL-C的含量明顯高于空白對(duì)照組（P＜0.05），血清中HDL-C含量顯著降低（P＜0.05），說(shuō)明此次試驗(yàn)高血脂大鼠建模成功。

2.2 慕薩萊思葡萄酒對(duì)SD大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C水平的影響

不同組大鼠經(jīng)不同給藥處理后靜脈血中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖1。

由圖1可知，酒精組血清中TC、LDL-C、TG各項(xiàng)指標(biāo)水平均高于其他對(duì)照組，HDL-C指標(biāo)在所有實(shí)驗(yàn)組中最低為0.68 mmol/L。慕薩萊思脫酒精組，慕薩萊思（高、中、低）劑量實(shí)驗(yàn)組中TC、LDL-C、TG含量較高脂血癥模型組有明顯降低，HDL-C含量顯著升高，其中HDL-C含量最高的是慕薩萊思脫酒精組為0.99 mmol/L。不同劑量組之間對(duì)比發(fā)現(xiàn)慕薩萊思中劑量組血清中TC、LDL-C、TG低于其他兩個(gè)劑量組，HDL-C含量高于其他兩個(gè)劑量組，慕薩萊思高劑量組和低劑量組之間血清中TC、LDL-C、TG、HDL-C含量相差較小，TC分別為1.82 mmol/L、1.71 mmol/L、LDL-C分別為0.65mmol/L、0.69mmol/L、TG分別為1.05mmol/L、1.01mmol/L、HDL-C分別為0.9 mmol/L、0.82 mmol/L。結(jié)果表明，慕薩萊思有顯著降低高脂血癥SD大鼠血脂水平的作用，而酒精對(duì)照組沒(méi)有明顯的效果。

圖1 慕薩萊思葡萄酒對(duì)高脂血癥SD大鼠總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇水平的影響Fig.1 Effect of Msalais wine on total cholesterol,triglyceride,highdensity lipoprotein cholesterol,low-density lipoprotein cholesterol levels of hyperlipidemia SD rats

研究表明，葡萄酒中所含的類胡蘿卜素、酚類物質(zhì)、類黃酮類物質(zhì)和白藜蘆醇具有一定的調(diào)節(jié)血脂和脂蛋白水平的作用，對(duì)心血管系統(tǒng)起到一定的保護(hù)作用[18-20]。同時(shí)長(zhǎng)期攝入酒精能引起血液膽固醇、甘油三酯的升高，并且?guī)?lái)不同程度的肝臟和心血管的損傷[21]，過(guò)量的酒精攝入能抑制HDL-C的合成，導(dǎo)致HDL-C含量下降，增加脂質(zhì)代謝紊亂程度[22]，也進(jìn)一步驗(yàn)證了實(shí)驗(yàn)中酒精實(shí)驗(yàn)組沒(méi)有明顯的降低SD大鼠血清中血脂水平的作用。

2.3 慕薩萊思葡萄酒對(duì)高脂血癥SD大鼠AI、肝臟指數(shù)的影響

不同組大鼠經(jīng)不同給藥處理后靜脈血AI、肝臟指數(shù)結(jié)果見(jiàn)表2。

致動(dòng)脈硬化指數(shù)（AI）常用來(lái)反映動(dòng)脈硬化程度的嚴(yán)重性，數(shù)值越大，誘發(fā)心腦血管病的幾率越高。肝臟指數(shù)可以直接反映肝臟質(zhì)量占體質(zhì)量的比值。由表2可知，酒精實(shí)驗(yàn)組肝臟指數(shù)略低于高脂組，AI均高于所有其他對(duì)照組。與高血脂癥模型組比較，慕薩萊思脫酒精組、慕薩萊思（高、中、低）劑量組AI、肝臟指數(shù)明顯降低（P＜0.05），AI、肝臟指數(shù)由高到低依次是：高脂模型組＞慕薩萊思（高、中、低）劑量組＞慕薩萊思脫酒精組＞空白組。慕薩萊思不同劑量組之間對(duì)比發(fā)現(xiàn)慕薩萊思中劑量組AI、肝臟指數(shù)低于其他兩個(gè)劑量組。結(jié)果表明，慕薩萊思有顯著降低高脂血癥SD大鼠AI水平和肝臟指數(shù)的作用（P＜0.05），而酒精對(duì)照組沒(méi)有明顯的效果（P＞0.05）。

表2 慕薩萊思葡萄酒對(duì)高脂血脂SD大鼠致動(dòng)脈硬化指數(shù)、肝臟指數(shù)的影響Table 2 Effect of Msalais wine on arteriosclerosis index and liver index of hyperlipidemia SD rats

長(zhǎng)期喂食高脂飼料，容易造成小鼠肝臟脂肪過(guò)載和脂質(zhì)代謝障礙，肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積量增加。同時(shí)血脂的代謝是否正常也是預(yù)防動(dòng)脈硬化的關(guān)鍵[23]。慕薩萊思葡萄酒有效的改善血脂含量，對(duì)預(yù)防動(dòng)脈硬化起到一定的作用，同時(shí)慕薩萊思葡萄酒可以在一定程度上改善肝細(xì)胞對(duì)TG的轉(zhuǎn)運(yùn)和膽固醇沉積的作用，降低肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積，從而有效的降低肝臟指數(shù)。

3 結(jié)論

慕薩萊思可以顯著降低高脂血癥SD大鼠血清中的TC、TG、LDL-C含量，進(jìn)一步調(diào)節(jié)SD大鼠血脂代謝。通過(guò)肝臟指數(shù)的對(duì)比發(fā)現(xiàn)慕薩萊思具有緩解高脂血癥SD大鼠肝臟脂質(zhì)的蓄積和降低AI指數(shù)的作用。綜合上述，減少酒精攝入和適量的攝取慕薩萊思葡萄酒能夠有效調(diào)節(jié)SD大鼠血脂的功效。本研究結(jié)果為改善心腦血管疾病方面提供了一定的數(shù)據(jù)支持。