GC-MS法檢測苦木葉和皮的揮發(fā)性成分

王靜妮 鄧延秋 唐紅珍 黃惠 張振偉

【摘 要】目的： 檢測苦木葉和皮的揮發(fā)油成分并進行比較分析。方法：采用水蒸氣蒸餾（SD）法提取苦木葉和皮的揮發(fā)油成分，利用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用儀對其化學(xué)成分進行檢測。通過質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫（NiST08），結(jié)合人工譜圖解析，查對有關(guān)文獻數(shù)據(jù)，從基峰、相對豐度等方面進行比較，確定苦木葉和皮的揮發(fā)性成分，并采用峰面積歸一法確定各組分相對含量。結(jié)果：苦木葉中鑒定出24種化學(xué)成分，苦木皮中鑒定出23種化學(xué)成分，其中11種為兩者共同的成分。結(jié)論：苦木葉和皮來自苦木不同組織，其含有的揮發(fā)性化學(xué)成分種類不盡同，含量相差也較大，在苦木資源的進一步研究開發(fā)時應(yīng)區(qū)分對待。

【關(guān)鍵詞】?苦木葉;苦木皮;揮發(fā)油;氣質(zhì)聯(lián)用

【中圖分類號】R284.1?【文獻標志碼】 A?【文章編號】1007-8517（2019）17-0035-04

Abstract： Objective To analyze and compare the volatile oil components in the leaves and barks of picrasma quassioides. Methods The volatile oil samples of picrasma quassioides in the leaves and barks were prepared by steam distillation （SD）， and the constituents were qualitatively analyzed by GC-MS. The volatile components were determined on the basis of mass spectrometry database （NiST08） and the analysis of the spectrogram compared with the base peak and relative abundance while checking with related literature data. The content of each peak was detected by

the normalization method of peak area. Results 24 and 23 kinds of chemical components were detected from the leaves and barks of picrasma quassioides， respectively. Conclusions The chemical composition and content were different in the leaves and barks which should be noted in the further research and development of picrasma quassioides （D. Don） Benn.

Key?words：picrasma quassiodes （D. Don） Benn; Leaves; Barks; Volatile Oil; GC-MS

苦木（picrasma quassioides （D.Don） Benn）為苦木科苦木屬植物，以苦味著稱，固有“苦樹”“苦膽”之名，主要分布在我國黃河流域以南各省區(qū)，其中以廣東和廣西的資源比較豐富，喜生長在山坡，山谷較潮濕處[1]?！吨袊幍洹?015版收載的苦木藥材為苦木的干燥枝與葉，具有清熱祛濕、解毒消腫之功效，用于風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、溫?zé)釣a痢、濕疹、毒蛇咬傷等[2]?？嗄救~和苦木皮來自苦木不同的組織，首先從生長特點來看，苦木樹皮呈灰黑色，幼枝灰綠色，無毛，具明顯的黃色皮孔?？嗄救~為單數(shù)羽狀復(fù)葉，小葉卵狀長橢圓形或卵狀披針形，近無柄;先端銳尖，基部偏斜或稍圓，邊緣具純齒;兩面通常綠色，有的下表面淡紫紅色，沿中脈有柔毛。

苦木的化學(xué)成分復(fù)雜，目前國內(nèi)外對其化學(xué)成分的報道有鐵屎米酮類生物堿、咔巴啉類生物堿、苦木苦味素、甘遂型三萜、酚苷、酚酸、苯丙素、二氫黃酮苷類等化合物?，F(xiàn)代藥理研究表明，苦木具有抗菌消炎，解熱，降壓，對心臟的影響，增加局部血流量，降低轉(zhuǎn)氨酶，抗癌，抗蛇毒，抗瘧等廣泛的生物活性[3-6]。

一直以來對苦木化學(xué)成分的研究主要集中在苦木莖和粗枝，對苦木葉和皮的研究鮮有報道[7-8]。為填補苦木葉和苦木皮化學(xué)成分研究的空白，項目采用水蒸氣蒸餾（SD）法提取苦木葉和皮中的揮發(fā)油成分，利用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)對其化學(xué)成分進行檢測分析[9]，為進一步研究和開發(fā)苦木資源，擴大藥源提供研究基礎(chǔ)。

1?儀器和材料

1.1?儀器?Agilent 7890A-5975C 型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國 Agilent 公司）;DHG-9240A型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱（上海精密試驗設(shè)備有限公司）;DF-20臺式連續(xù)投料粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）;ME204E/02型電子天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）。

1.2?材料?苦木藥材（圖A、圖B）采購于廣西貴港市覃塘山區(qū)，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)譚勇教授鑒定為正品苦木picrasma quassioides （D.Don） Benn，無水乙醚（天津大茂化學(xué)試劑有限公司），無水硫酸鈉（天津大茂化學(xué)試劑有限公司）。

2?GC-MS檢測苦木葉和皮的揮發(fā)油成分

2.1?實驗參數(shù)及分析條件?石英毛細管柱HP-5ms （30 m × 25 μm × 0.25 μm）;載氣為高純He（99.995%）;進樣口溫度250 ℃;進樣量1 μL;分流比20 ∶1。程序升溫：70～250 ℃，初始溫度70 ℃（保留1 min），以10 ℃/min速率升溫至250 ℃（保留1 min）。電離方式為EI，能量70 eV，離子源溫度230 ℃，電子倍增1.933 kV，掃描質(zhì)量范圍m/z 33～800。

2.2?苦木揮發(fā)油的提取?按照《中國藥典》2015版第四部附錄通則2204中揮發(fā)油測定法的甲法[10]，取經(jīng)粉碎的苦木葉和苦木皮各50 g，分別加1000 mL蒸餾水，蒸餾5 h至收集器中油量不再增加后停止加熱，放置1 h。用乙醚將揮發(fā)油從測定裝置中轉(zhuǎn)移出來，加入無水硫酸鈉除去殘余水分，經(jīng)0.45 μm 微孔濾膜過濾后，用得到淡黃色薄荷香氣味透明液體，收集冷藏備用。

2.3?揮發(fā)油成分檢測?按上述實驗參數(shù)及條件，使用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分別對苦木葉和皮的揮發(fā)油進行檢測分析，采用安捷倫GC-MS化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，以峰面積歸一法測得揮發(fā)性物質(zhì)各組分相對含量，苦木葉和苦木皮提取的揮發(fā)油總離子流圖分別見圖1、圖2。對總離子流圖中各峰經(jīng)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫（NiST08），配合人工譜圖解析，與譜庫的數(shù)據(jù)匹配度（SI）均達到90%以上，并查對有關(guān)數(shù)據(jù)文獻，從基峰、相對豐度等方面進行比較，最終鑒定了苦木葉和皮的揮發(fā)性成分見表3。

3?結(jié)果及分析

從苦木葉中檢測出24種揮發(fā)性成分，主要為烷烴類，其中二十四烷的含量最高（14.01%），十九烷次之（13.24%）。含量較多的非烷烴類有石竹素（5.45%）、油酸酰胺（4.25%）、棕櫚酸（2.73%）、環(huán)氧化蛇麻烯Ⅱ（2.02%）、β-石竹烯（2.00%）、α-石竹烯（1.40%），β-欖香烯（1.32%）等，其他成分如對乙烯基愈創(chuàng)木酚、反式-橙花叔醇、桉油烯醇、雪松醇、17-三十五烷酮、硬脂酰胺等含量都在1%以下。

從苦木皮中檢測出23種揮發(fā)性成分，與苦木葉類似，含量最高的成分為烷烴類，其他非烷烴類成分如棕櫚酸（12.47%）、γ-三烯生育酚（6.58%）含量也較多，而壬醛、α-蒎烯、蓽澄茄油烯、月桂酸、石竹素、雪松醇、肉豆蔻酸、西柏烷、9， 10-亞甲基油酸甲酯等揮發(fā)性成分的含量都在1%以下。

研究運用采用水蒸氣蒸餾的方法，獲取苦木葉和皮中的揮發(fā)油，再用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對其化學(xué)成分進行分析，采用峰面積歸一法確定各組分相對含量，從苦木葉和苦木皮中分別鑒定了24種和23種揮發(fā)性成分，除了常見的烷烴類成分外，苦木葉中還檢測到具有顯著抗癌活性作用β-欖香烯成分。此外，苦木葉和皮中同時檢測到桉油烯醇、石竹素、雪松醇、植酮、棕櫚酸、十六烷、17-三十五烷酮、二十六碳烯等11種共同成分，但這些成分在兩者中含量有所相同，如棕櫚酸在苦木皮中含量達到12.47%，但苦木葉中只有2.73%，石竹素在苦木的葉中含有5.45%，但是在苦木皮中僅含有0.88%。在實驗中受到實驗條件的影響，例如水蒸氣蒸餾中，損失了部分的產(chǎn)品，這也可能影響實驗結(jié)果;在產(chǎn)品的保存過程中也會對實驗數(shù)據(jù)有一定影響。

總之，一直以來，苦木化學(xué)成分的研究主要集中在苦木莖和枝等方面，故對其葉和皮不同的揮發(fā)性成分分析，為苦木的相關(guān)研究提供了有力的空間和研究思路，為擴大藥源研究，進一步開發(fā)利用苦木藥用資源提供了一定的研究基礎(chǔ)和參考。

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（收稿日期：2019-06-24?編輯：劉?斌）