吡嘧司特鉀咀嚼片的制備和質(zhì)量考察

姜 成，趙斌鋒

（浙江金立源藥業(yè)有限公司，浙江 紹興 312369）

吡嘧司特鉀是由美國施貴寶公司首先研制合成的抑制抗原引起的變態(tài)反應(yīng)介質(zhì)釋放的藥物，1991 年在日本由BMS 公司以Pemirolastion（商品名）、Mitsubishi-Tokyo 公司以Alegysal（商品名）上市，主要用于治療輕中度過敏性支氣管哮喘、過敏性鼻炎、過敏性皮炎及眼結(jié)膜炎等[1]，劑型主要為片劑[2-3]。由于咀嚼片[4]具有易咀嚼、味道可口（掩味或可接受的味道）、尺寸及形狀適中、易崩解的特點(diǎn)，本文作者采用《中華人民共和國藥典》規(guī)定的硬度、脆碎度和崩解度試驗(yàn)方法和要求[5]，進(jìn)行處方的優(yōu)化篩選；同時(shí)，按照《中華人民共和國藥典》規(guī)定的試驗(yàn)方法，對其進(jìn)行了含量、溶出度和穩(wěn)定性考察，成功制備出符合《中華人民共和國藥典》規(guī)定的吡嘧司特鉀咀嚼片。該劑型可以解決兒童患者用藥難題，為吡嘧司特鉀臨床用藥多樣化提供支持。

1 儀器與材料

MP5002 電子天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司），RC8MD 溶出儀（天津天大天發(fā)科技有限公司），UV-2600 紫外-可見分光光度計(jì)（日本Shimadzu 公司），標(biāo)準(zhǔn)篩（上虞五四建材儀器廠），DHG-9246A 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），ZPS008 實(shí)驗(yàn)室旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（上海天祥健臺制藥器械有限公司），BJ-2A 崩解時(shí)限測定儀（天津國銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司），YD-35 智能片劑硬度儀（天津天大天發(fā)科技有限公司），KBF720 穩(wěn)定性試驗(yàn)箱（德國Binder 公司）。

吡嘧司特鉀(浙江金立源藥業(yè)有限公司，批號0101820170412），蔗糖（南寧桂之隆藥用輔料有限公司），甘露醇、微晶纖維素（旭城株式會(huì)社），可溶性淀粉、羧甲基淀粉鈉、乳糖、硬酯酸鎂（安徽山河藥用輔料股份有限公司），預(yù)膠化淀粉（湖州展望藥業(yè)有限公司），阿司巴坦（西安泰華醫(yī)藥科技有限公司），桔子香精（泰興市三華食品添加劑廠），乙醇（湖南湘易康制藥有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 吡啶司特鉀嚼片的制備

2.1.1 制備工藝

按處方配比取吡嘧司特鉀、甘露醇、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、羧甲基淀粉鈉、阿司巴坦和桔子香精，分別過80 目篩，混合均勻，以體積分?jǐn)?shù)70%的乙醇溶液作潤濕劑，20 目篩濕法制粒，置80 ℃烘箱鼓風(fēng)干燥約2 h，18 目篩整粒，再混入處方量的硬脂酸鎂，壓片即得。

2.1.2 處方篩選

本品設(shè)計(jì)規(guī)格為5 mg，處方以吡嘧司特鉀為主藥，甘露醇為稀釋劑和矯味劑，預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素為稀釋劑，羧甲基淀粉鈉為崩解劑，阿司巴坦和桔子香精為矯味劑；硬脂酸鎂為潤滑劑；體積分?jǐn)?shù)70%乙醇為潤濕劑，通過對制粒情況和咀嚼片外觀性狀、口味、脆碎度以及崩解度項(xiàng)目的綜合考察，篩選最佳處方。各處方中吡嘧司特鉀均為5 mg、香精為3 mg、硬脂酸鎂3 mg，體積分?jǐn)?shù)70%乙醇適量，其他材料用量見表1。通過對不同處方工藝的制粒狀況和制成的咀嚼片的外觀性狀、口味、脆碎度以及崩解度考察，處方6 的各項(xiàng)常規(guī)檢查指標(biāo)較好，由此確立為本品的制備處方，考察結(jié)果見表2。

Table 1 Formulation of pemirolast potassium chewable tablets表1 吡嘧司特鉀咀嚼片的處方組成

2.2 吡啶司特鉀嚼片的含量測定

2.2.1 測定波長的選擇

分別取吡嘧司特鉀對照品和空白輔料適量，用水溶解并稀釋使成每1 mL 含吡嘧司特鉀約10 μg 的溶液。按《中華人民共和國藥典》2015 年版四部分光光度法，在波長200～400 nm 內(nèi)掃描測定。結(jié)果吡嘧司特鉀在波長357 nm 處有最大吸收，且輔料成份溶液在波長357 nm 處無吸收，故確定357 nm 為本品的檢測波長。

Table 2 Investigation of formulation of pemirolast potassium chewable tablets表2 吡嘧司特鉀咀嚼片處方的考察結(jié)果

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取吡嘧司特鉀對照品約20 mg，精密稱定，置于500 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別吸取上述溶液1、2、3、4 和5 mL 置于10 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。用紫外-可見分光光度儀在波長357 nm 處分別測定吸光度，以質(zhì)量濃度對吸光度進(jìn)行回歸，其回歸方程為A=3.1×10-3+6.21×10-2ρ（r=0.999 8，n=5），吡嘧司特鉀水溶液的質(zhì)量濃度在3.6～18.0 μg·L-1內(nèi)線性良好。

2.2.3 精密度試驗(yàn)

取同一批號本品6 份各10 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀5 mg），置于50 mL 量瓶中，用水溶解（必要時(shí)可超聲）并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液1 mL 置于10 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液。按“2.2.5”條方法，在波長357 nm 處測定吸光度，計(jì)算含量。結(jié)果測量值平均RSD 為0.51%，表明本方法的重現(xiàn)性及精密度較好。

2.2.4 回收率試驗(yàn)

田卓對馬老說，我們“十大本土最具發(fā)展?jié)摿Ψ康禺a(chǎn)企業(yè)”評選活動(dòng)的策劃就是高先生做的，操作性很強(qiáng)，目前進(jìn)展得很順利，具體情況我會(huì)單獨(dú)向您匯報(bào)的。

按本品規(guī)格的50%、80%、100%（并以一定放大比例）分別精密稱取吡嘧司特鉀；再分別精密稱取混合粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀10 mg），置于100 mL 量瓶中，用水溶解（必要時(shí)可超聲）并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液1 mL，置于10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液。另取吡嘧司特鉀對照品約10 mg，精密稱定，置于100 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。按“2.2.5”條方法測定吸光度，計(jì)算得其平均回收率為99.44%（n=9），RSD 為0.55%。

2.2.5 含量測定

取本品10 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀5 mg），置于50 mL量瓶中，用水溶解（必要時(shí)可超聲）并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液1 mL 置于10 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液。另取吡嘧司特鉀對照品適量，精密稱定，加水溶解并稀釋成每1 mL 含10 μg 的溶液，搖勻，作為對照溶液。結(jié)果20180618、20180619 和20180620三批樣品的含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為99.19%、98.96%和98.63%。

2.3 吡啶司特鉀嚼片的溶出度考察

2.3.1 溶出均一性考察

按《中華人民共和國藥典》2015 年版四部溶出度測定法，以水900 mL 為溶劑，轉(zhuǎn)速為100 r·min-1，依法操作。分別于5、10、15、30、45、60 和60 min 時(shí)取樣各10 mL，同時(shí)補(bǔ)加等量同溫度水，濾過，取續(xù)濾液作為供試溶液；另取吡嘧司特鉀對照品約10 mg，精密稱定，置于100 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 mL，置于10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。將上述供試溶液和對照溶液在波長357 nm 處分別測定吸光度，計(jì)算出每片在不同時(shí)間點(diǎn)的溶出度，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，吡嘧司特鉀咀嚼片10 min 溶出度平均值達(dá)95.39%，不同樣品測得的溶出度無顯著差異，溶出均一性良好，符合《中華人民共和藥典》規(guī)定的要求。

Table 3 Test results of dissolution homogeneity of pemirolastpotassium chewable tablets表3 吡嘧司特鉀咀嚼片溶出均一性試驗(yàn)結(jié)果

2.3.2 溶出度測定

取本品適量，照《中華人民共和國藥典》2015 年版四部溶出度測定法，以水900 mL 為溶劑，轉(zhuǎn)速為100 r·min-1，依法操作，于30 min 時(shí)取樣15 mL，濾過，取續(xù)濾液作為供試溶液；另取吡嘧司特鉀對照品約10 mg，精密稱定，置于100 mL 量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置10 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。按“2.2.5”條方法測定并計(jì)算每片的溶出量。結(jié)果20180618、20180619 和20180620 三批樣品溶出度結(jié)果分別為99.01%、98.55%和98.37%。

2.4 吡啶司特鉀嚼片中有關(guān)物質(zhì)的檢測

取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于吡嘧司特鉀5 mg），精密稱定，置于50 mL 量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試溶液。量取供試溶液1 mL，置于100 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為預(yù)試溶液，即對照溶液。按《中華人民共和國藥典》2015 年版四部高效液相色譜法測定。色譜條件為：用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以水（用冰醋酸調(diào)pH 值至3.5）-甲醇（體積比60∶40）為流動(dòng)相，檢測波長為257 nm，理論板數(shù)以吡嘧司特鉀峰計(jì)算應(yīng)不低于2 500。取預(yù)試溶液20 μL 注入液相色譜儀中，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10%～25%，再分別取供試溶液和對照溶液各20 μL 注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的兩倍，供試溶液中如有雜質(zhì)峰，量取各雜質(zhì)峰面積之和，與對照溶液主峰面積的1.5 倍比較。結(jié)果20180618、20180619 和20180620 三批產(chǎn)品中有關(guān)物質(zhì)的含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.23%、0.23%和0.22%。

2.5 吡啶司特鉀嚼片的穩(wěn)定性考察

2.5.1 吡嘧司特鉀咀嚼片的強(qiáng)度穩(wěn)定性試驗(yàn)

最佳處方樣品模擬商品包裝，分別在光照（4 500±500）lx、高溫（60 ℃）及高濕（75%）條件下，在第5 天、第10 天取樣，進(jìn)行外觀、含量、溶出度和有關(guān)物質(zhì)考察，結(jié)果見表4。結(jié)果表明：處方樣品在光照、高溫條件下考察10 d 后，各項(xiàng)檢查指標(biāo)均表現(xiàn)穩(wěn)定，表明該處方適合本品的制備，結(jié)合一般咀嚼片的貯存條件，本品仍宜室溫、遮光、密閉保存。

Table 4 Observation results of stress testing of pemirolast potassium chewable tablets表4 吡嘧司特鉀咀嚼片的強(qiáng)度穩(wěn)定性試驗(yàn)考察結(jié)果

2.5.2 吡嘧司特鉀咀嚼片的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)

將三批模擬銷售包裝的樣品置于相對濕度為75%、溫度為40 ℃的條件下存放，分別于第1、2、3、6 月取樣，對樣品的性狀、溶出度、含量和有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行考察，結(jié)果見表5。結(jié)果表明：吡嘧司特鉀咀嚼片樣品在包裝條件下，高溫、高濕條件下存放6 個(gè)月后，各項(xiàng)檢查指標(biāo)均未見明顯變化。

Table 5 Test results of accelerated stability of pemirolast potassium chewable tablets表5 吡嘧司特鉀咀嚼片的高溫、高濕加速試驗(yàn)結(jié)果

2.5.3 吡嘧司特鉀咀嚼片的長期留樣穩(wěn)定性考察

將三批模擬銷售包裝的吡嘧司特鉀咀嚼片，置溫度（25 ± 2）℃、相對濕度為60% ± 5%的條件下，分別于3、6、9、12 個(gè)月取樣，并對其性狀、溶出度、含量進(jìn)行考察，用高效液相色譜法進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，12 個(gè)月的長期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果見表6。

Table6 Test results of long-term stability of pemirolast potassium chewable tablets表6 吡嘧司特鉀咀嚼片樣品長期留樣試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

3.1 劑型與處方選擇

吡嘧司特鉀劑型以傳統(tǒng)的片劑為主，后來又出現(xiàn)了外用的鼻噴劑[6]和滴眼液[3,7]，但針對不同適應(yīng)癥，尤其是兒童及動(dòng)物保健用藥使用傳統(tǒng)片劑有諸多不便。加之，咀嚼片[8]有溶出快和服用攜帶方便等優(yōu)點(diǎn)，所以該劑型作為首先。

處方選擇根據(jù)FDA 發(fā)布的咀嚼片關(guān)鍵質(zhì)量屬性指導(dǎo)原則，咀嚼片應(yīng)具備的四大特征：易咀嚼、味道可口（掩味或可接受的味道）、尺寸及形狀適中、易崩解，以有利于藥片破碎和活性成分溶出。咀嚼片的關(guān)鍵質(zhì)量屬性包括硬度、崩解時(shí)限、溶出度以及其他影響生物利用度和生物等效性的因素[9]，為處方篩選提供依據(jù)。

3.2 含量、溶出度和有關(guān)物質(zhì)檢測方法

含量和溶出度常見報(bào)道有HPLC[7]、RP-HPLC[9-10]，紫外-可見分光光度法較為少見，雖然HPLC、RP-HPLC 有檢測精準(zhǔn)的優(yōu)點(diǎn)，但費(fèi)用高，且耗時(shí)。根據(jù)吡嘧司特鉀對紫外-可見光有顯著的特征吸收峰，確立采用紫外-可見分光光度法測定。驗(yàn)證表明，該方法可以滿足檢測要求和相應(yīng)的檢測精度，并且有省時(shí)省力、簡單易行的優(yōu)點(diǎn)。

有關(guān)物質(zhì)的檢測采用HPLC 方法，專屬性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，吡嘧司特鉀與其降解物質(zhì)的分離效果令人滿意，溶劑水及輔料在此條件下無干擾，經(jīng)過驗(yàn)證，該方法精密度高、穩(wěn)定性好。因此采用本法作為吡嘧司特鉀咀嚼片的有關(guān)物質(zhì)檢查法。

3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)考察

影響因素試驗(yàn)考察并沒有按照起草的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行全檢，只是有重點(diǎn)選擇性狀、溶出度和有關(guān)物質(zhì)作為考察重點(diǎn)，因?yàn)樵谔幏胶Y選一節(jié)中，已選取硬度、脆碎度和崩解度作為篩選依據(jù)。影響因素試驗(yàn)可以為處方調(diào)整提供支持，同時(shí)對產(chǎn)品的貯存和有效期的制定提供依據(jù)。

加速穩(wěn)定性和長期留樣穩(wěn)定性試驗(yàn)為產(chǎn)品的有效期提供參考依據(jù)和數(shù)據(jù)。長期留樣12 個(gè)月數(shù)據(jù)顯示各個(gè)考察項(xiàng)目未見明顯變化。