29 株金針菇菌株菌絲生長(zhǎng)特性比較

楊和川，譚一羅，蘇文英，徐 艷，王朝暉，秦裕營(yíng)，周振玲*

（1 連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，江蘇連云港 222000；2 連云港市市區(qū)水工程管理處）

金針菇（Flammulina filiformis）又名冬菇、樸菇、毛柄金錢(qián)菌、構(gòu)菌等，味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，具有抗腫瘤、提高免疫力、降血壓、降血脂等藥用價(jià)值，市場(chǎng)前景廣闊[1-3]。中國(guó)金針菇栽培歷史悠久，種質(zhì)資源豐富，傳統(tǒng)的金針菇栽培存在生產(chǎn)周期長(zhǎng)、栽培流程復(fù)雜、受氣候影響等缺點(diǎn)。隨著食用菌生產(chǎn)技術(shù)的發(fā)展和市場(chǎng)需求的增加，工廠化栽培模式已經(jīng)成為當(dāng)前金針菇生產(chǎn)的主流方法[4,5]。金針菇的工廠化生產(chǎn)具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、品質(zhì)好、周年生產(chǎn)等特點(diǎn)，因此，篩選菌絲生長(zhǎng)迅速、吃料快、生長(zhǎng)周期短、產(chǎn)量高的優(yōu)質(zhì)金針菇菌株對(duì)工廠化金針菇品種的研究、降低生產(chǎn)成本等尤為重要。研究采用平板培養(yǎng)法和菌絲吃料試驗(yàn)2 種方法研究29 株供試金針菇栽培菌株的菌絲生長(zhǎng)特性，并通過(guò)菌絲生長(zhǎng)指數(shù)及菌絲吃料速率綜合篩選優(yōu)質(zhì)金針菇菌株，旨在為金針菇工廠生產(chǎn)及新品種選育提供一定理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

29 株供試金針菇栽培菌株的編號(hào)和來(lái)源如表1所示。

表1 供試菌株編號(hào)及來(lái)源

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 平板培養(yǎng)法測(cè)定菌絲生長(zhǎng)特性。將供試菌株母種分別于MYG 固體培養(yǎng)基（配方：麥芽糖10g，葡萄糖5g，酵母粉5g，瓊脂粉15g，水1L，pH 自然）平板活化，25℃培養(yǎng)7d；從平板外緣取直徑0.6cm 菌塊分別接種至MYG 平板中央，試驗(yàn)設(shè)3 組重復(fù)，25℃培養(yǎng)觀察，記錄菌絲均勻度、密度等長(zhǎng)勢(shì)情況，當(dāng)有一組菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)平板時(shí)，測(cè)量全部供試菌株直徑，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)速率。

1.2.2 菌絲吃料速率比較。將金針菇栽培料（配方：棉籽殼38%、木屑25%、麩皮32%，玉米粉3%、輕質(zhì)碳酸鈣1.5%、過(guò)磷酸鈣0.5%，含水量62%）裝入直徑3cm 試管中，每支試管裝料60g（濕重），封口膜將試管口封好后121℃滅菌2h。每支試管分別接種3 塊直徑0.6cm菌塊，試驗(yàn)設(shè)3 組重復(fù)，放于25℃培養(yǎng)，記錄供試菌株吃料情況。

1.2.3 菌絲長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[6,7]。供試菌株菌絲平板培養(yǎng)長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如下：5 分表示菌絲濃密且均勻；4 分表示菌絲濃密，較均勻；3 分表示菌絲較濃密，較均勻；2 分表示菌絲較稀疏，較均勻；1 分表示菌絲稀疏且不均勻。

1.2.4 菌絲生長(zhǎng)指數(shù)[8-9]。菌絲生長(zhǎng)指數(shù)（I）=菌落長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分（N）×菌絲生長(zhǎng)速率（V）。式中菌絲生長(zhǎng)速率單位為cm/d。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理。采用軟件Microsoft Excel 2017 和GraphPad Prism 5 對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 基于平板培養(yǎng)法的菌絲生長(zhǎng)特性

2.1.1 供試菌株菌絲生長(zhǎng)情況。29 株供試金針菇菌株菌絲生長(zhǎng)情況見(jiàn)表2。說(shuō)明不同品種金針菇菌絲在培養(yǎng)平板上的菌絲密度、均勻度不同，綜合菌絲均勻度和密度發(fā)現(xiàn)7 號(hào)、12 號(hào)、16 號(hào)、22 號(hào)、23 號(hào)、29 號(hào)金針菇菌株菌絲濃密且均勻，生長(zhǎng)最好，4 號(hào)菌株在培養(yǎng)平板上菌絲長(zhǎng)勢(shì)稀疏、不均勻、生長(zhǎng)最差。

2.1.2 供試菌株菌絲生長(zhǎng)速率比較。由表3 可以發(fā)現(xiàn)29 株供試金針菇菌株在培養(yǎng)平板上萌發(fā)時(shí)間、滿(mǎn)皿天數(shù)和生長(zhǎng)速率各不相同，所有供試菌株均能在0.5～1.5d 萌發(fā)，在7～10d 長(zhǎng)滿(mǎn)平板，菌絲平均生長(zhǎng)速率在0.87～1.27cm/d，不同供試菌株間具有明顯差異。3號(hào)、7 號(hào)、22 號(hào)、23 號(hào)、29 號(hào)菌株均在0.5d 萌發(fā)，最快7d 即可長(zhǎng)滿(mǎn)平板，在P＜0.05 時(shí)，29 號(hào)菌株與7 號(hào)菌株生長(zhǎng)速率沒(méi)有顯著差異，但29 號(hào)菌株生長(zhǎng)速率顯著大于其它供試菌株。15 號(hào)、16 號(hào)、18 號(hào)菌株8d 長(zhǎng)滿(mǎn)平板，其中18 號(hào)菌株菌絲萌發(fā)時(shí)間為1d，說(shuō)明雖然萌發(fā)時(shí)間較晚，但萌發(fā)后菌絲生長(zhǎng)速率較快。5 號(hào)、6 號(hào)、9號(hào)、10 號(hào)、11 號(hào)、12 號(hào)、13 號(hào)、24 號(hào)、25 號(hào)、28 號(hào)菌株9d 長(zhǎng)滿(mǎn)平板，其余菌株10d 長(zhǎng)滿(mǎn)平板，其中4 號(hào)菌株生長(zhǎng)速率顯著慢于其它供試菌株。

表2 培養(yǎng)平板上供試菌株菌絲生長(zhǎng)情況

綜合表2 和表3 發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)菌絲長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分較低的菌株生長(zhǎng)速率也較慢，但是部分供試菌株生長(zhǎng)速率與菌絲長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分不完全一致。例如，雖然18 號(hào)菌株生長(zhǎng)速率較快，但菌絲不夠濃密且不均勻，評(píng)分為2 分；12 號(hào)菌株生長(zhǎng)速率較慢，但菌絲濃密且均勻，評(píng)分為5分。

表3 培養(yǎng)平板上供試菌株菌絲生長(zhǎng)速率

2.1.3 供試菌株生長(zhǎng)指數(shù)比較。29 株供試菌株平板培養(yǎng)菌絲生長(zhǎng)指數(shù)見(jiàn)圖1。29 號(hào)菌株菌絲生長(zhǎng)指數(shù)最高，為6.35，7 號(hào)、22 號(hào)、23 號(hào)菌株次之，在6.00～6.25 之間；1 號(hào)、2 號(hào)、5 號(hào)、8 號(hào)、14 號(hào)、18 號(hào)、20 號(hào)、21 號(hào)、27號(hào)生長(zhǎng)指數(shù)較低，在1.86～2.26 之間，4 號(hào)菌株生長(zhǎng)指數(shù)最低，僅0.87。

圖1 供試菌株菌絲生長(zhǎng)指數(shù)

2.2 菌絲吃料速率比較

菌絲吃料試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)29 株金針菇菌株菌絲吃料速率各不相同（圖2），7 號(hào)菌株吃料最快，達(dá)到0.47cm/d；3 號(hào)、6 號(hào)、10 號(hào)、11 號(hào)、12 號(hào)、13 號(hào)、14 號(hào)、15 號(hào)、16號(hào)、17 號(hào)、22 號(hào)、23 號(hào)、24 號(hào)、26 號(hào)、28 號(hào)、29 號(hào)吃料速率較快，在0.40-0.46cm/d；1、2、4、5、18、19、20、21 吃料速率較慢，僅在0.25～0.28cm/d。

圖2 供試菌株菌絲吃料速率

3 討論

菌絲生長(zhǎng)迅速、長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)且濃密的食用菌菌種是實(shí)際生產(chǎn)中優(yōu)質(zhì)菌株的表現(xiàn)之一[10]。試驗(yàn)結(jié)果表明7 號(hào)、22 號(hào)、23 號(hào)、29 號(hào)金針菇菌株菌絲生長(zhǎng)良好，在培養(yǎng)平板上萌發(fā)快，菌絲生長(zhǎng)濃密且均勻，長(zhǎng)勢(shì)評(píng)分達(dá)到5分，菌絲平均生長(zhǎng)速率快，均能7d 滿(mǎn)皿；在吃料試驗(yàn)中，菌絲吃料迅速，可達(dá)0.44～0.47cm/d，是潛在的金針菇工廠化生產(chǎn)優(yōu)良菌株。

菌絲生長(zhǎng)特性是衡量金針菇菌種質(zhì)量的重要指標(biāo)，但不是唯一衡量標(biāo)準(zhǔn)[11]。例如，本試驗(yàn)供試菌株中2號(hào)和5 號(hào)菌株為目前金針菇工廠化生產(chǎn)使用的白色栽培菌株，但其菌絲在平板培養(yǎng)時(shí)菌絲長(zhǎng)勢(shì)較稀疏，生長(zhǎng)速率以及吃料速率等均較慢，說(shuō)明不能僅以菌絲生長(zhǎng)特性來(lái)判斷菌株質(zhì)量情況。蘇桂平等[12]研究表明金針菇菌株的產(chǎn)量與菌絲生長(zhǎng)速率相關(guān)性不大，與菌絲長(zhǎng)勢(shì)有一定相關(guān)性。張利菁等[13]研究表明金針菇菌株菌絲生長(zhǎng)特性與產(chǎn)量具有良好的相關(guān)性，但也發(fā)現(xiàn)產(chǎn)量最高的金針菇菌株其菌絲生長(zhǎng)特性并不是最優(yōu)。因此，進(jìn)一步開(kāi)展出菇試驗(yàn)，結(jié)合菌株農(nóng)藝性狀的研究對(duì)優(yōu)質(zhì)金針菇菌種的鑒定是必不可少的。