田寶瑩
【摘 要】隨著分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的迅速發(fā)展,該技術(shù)普遍應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的各方面。論文介紹了分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)中的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、生物芯片技術(shù)、分子生物傳感器、DNA測(cè)序和蛋白質(zhì)相關(guān)分離純化技術(shù),并對(duì)其發(fā)展前景進(jìn)行了簡(jiǎn)單地描述。
【Abstract】With the rapid development of molecular biology testing technology, this technology is widely used in all aspects of medical examination. This paper introduces the polymerase chain reaction, biochip technology, molecular biosensor, DNA sequencing and protein-related separation and purification techniques in molecular biology testing technology, and briefly describes its development prospects.
【關(guān)鍵詞】分子生物學(xué)檢驗(yàn);技術(shù);醫(yī)學(xué)檢驗(yàn);應(yīng)用方向
【Keywords】molecular biology testing; technology; medical examination; application direction
【中圖分類號(hào)】R446? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 【文章編號(hào)】1673-1069(2019)08-0148-02
1 引言
分子生物學(xué)檢驗(yàn)是分子生物學(xué)技術(shù)在臨床檢驗(yàn)診斷應(yīng)用中發(fā)展起來(lái)的,以疾病為中心、以生物分子標(biāo)志物為靶標(biāo)的新一代臨床檢驗(yàn)診斷技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)對(duì)微量生物樣本、微量生物分子及其微小變化的快速檢驗(yàn),成為疾病風(fēng)險(xiǎn)分析和早期診斷的重要手段[1]。
2 分子生物學(xué)檢驗(yàn)應(yīng)用的主要技術(shù)
①聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種在生物體細(xì)胞外通過(guò)酶促合成特異DNA片段的方法,又稱多聚酶鏈反應(yīng)。該技術(shù)突破了以往在科學(xué)研究和檢驗(yàn)診斷中不易獲得豐富的樣品靶DNA序列的缺陷。在目前的臨床分子生物學(xué)中,PCR技術(shù)已廣泛應(yīng)用于寄生蟲(chóng)學(xué)、微生物學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、基因治療、食品檢測(cè)、出入境檢驗(yàn)檢疫等諸多領(lǐng)域[2],并以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)衍生出了其他技術(shù),如PCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析法是檢測(cè)與特定的酶切位點(diǎn)有關(guān)突變的方法;等位基因特異性PCR技術(shù)可以進(jìn)行基因型鑒定;PCR-單鏈構(gòu)象多態(tài)性技術(shù)可以揭示產(chǎn)物序列內(nèi)的多態(tài)性;實(shí)時(shí)熒光“定量聚合酶鏈反應(yīng),定量PCR”可以對(duì)目的DNA進(jìn)行定量,更加準(zhǔn)確和方便。
②生物芯片技術(shù)代表高通量密集型的技術(shù),主要依據(jù)芯片上固定的探針(基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、組織芯片)地不同,能夠一次性地對(duì)大量的生物分子進(jìn)行檢測(cè)。如基因表達(dá)譜、突變測(cè)定、多態(tài)性分析、基因組文庫(kù)、雜交測(cè)序等[3]。在臨床診斷、科學(xué)研究和流行病學(xué)篩選中具有廣泛的應(yīng)用前景。
③分子生物傳感器是一種對(duì)生物物質(zhì)敏感并可以將其濃度轉(zhuǎn)換為電信號(hào)進(jìn)行檢驗(yàn)的儀器,是以固定化的生物分子作為識(shí)別原件與適當(dāng)?shù)睦砘瘬Q能器以及信號(hào)放大器裝置構(gòu)成的一整套分析系統(tǒng)。分子生物傳感器可以廣泛地應(yīng)用于人體體液中一些小分子有機(jī)物、生物大分子等多種物質(zhì)的檢驗(yàn)檢測(cè)中。這些項(xiàng)目都為病情的診斷、職業(yè)環(huán)境的監(jiān)測(cè)提供了可靠的分析數(shù)據(jù)[4]。
④DNA測(cè)序技術(shù)可以為臨床疾病的分子診斷提供最精確的判定依據(jù)。第一代測(cè)序以雙脫氧末端終止法為主,缺點(diǎn)是費(fèi)用高、速度慢。第二代測(cè)序以焦磷酸測(cè)序、合成測(cè)序和芯片測(cè)序三大技術(shù)平臺(tái)為代表,使DNA測(cè)序進(jìn)入了通量高、成本低、規(guī)模大的時(shí)代。第三代測(cè)序以單分子實(shí)時(shí)測(cè)序?yàn)橹?,速度更快[5]。
⑤蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)與基因組測(cè)序技術(shù)相結(jié)合,從而為蛋白組學(xué)的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供了準(zhǔn)確的基因序列編碼框架,使人類的研究重點(diǎn)集中在應(yīng)用蛋白組學(xué)的研究上,并發(fā)現(xiàn)新的早期診斷和早期監(jiān)測(cè)的生物標(biāo)志物,更加充分地了解疾病進(jìn)程,加速藥物研究的發(fā)展[6]。該技術(shù)主要包括色譜技術(shù)、抗體工程和蛋白質(zhì)工程。
3 結(jié)語(yǔ)
綜上所述,當(dāng)前分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域中受到普遍認(rèn)可,規(guī)范運(yùn)用分子生物技術(shù)可明顯減少醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)程序中交叉污染的有關(guān)問(wèn)題,同時(shí),能夠提升醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)操作的整體效率,使醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的靈敏度、特異度、精確度得到提升,未來(lái)的發(fā)展前景良好。
【參考文獻(xiàn)】
【1】胡頌恩.分子生物學(xué)與檢驗(yàn)技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2018.
【2】Li H,Bai R,Zhao Z,etal.Application of droplet digital PCR to detect the pathogens of infectious diseases[J].Bioscience reports,2018,Dec,38(6):237-245.
【3】武衛(wèi)杰,冷遠(yuǎn)逵,沈夢(mèng)飛等.基于功能納米材料的液相生物芯片檢測(cè)技術(shù)[J].化學(xué)進(jìn)展,2019,31(2/3):283-299.
【4】宮薇薇,范俊梅,劉麗莉等.基于陽(yáng)離子型芘衍生物超分子生物傳感器的制備和傳感性能研究[J].中國(guó)化學(xué),2018(3):3-4.
【5】徐疏梅.新一代DNA測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用與研究進(jìn)展[J].徐州工程學(xué)院學(xué)報(bào),2018,33(4):60-64.
【6】楊楠,白劍.蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)研究進(jìn)展[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2017,17(101):24-25.