PODXL蛋白在胃癌組織中的表達(dá)水平及與臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性分析

宋進(jìn)文

【摘要】 目的：探討PODXL蛋白在胃癌組織中的表達(dá)水平及與臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性分析。方法：選取筆者所在醫(yī)院收治的68例胃癌患者及同期68例健康人群作為觀察對(duì)象，檢測(cè)血清PODXL蛋白含量變化，分析PODXL蛋白表達(dá)水平與胃癌患者的病理特征及預(yù)后之間的相關(guān)性。結(jié)果：與對(duì)照組相比，胃癌患者組PODXL蛋白的陽性表達(dá)率顯著高于對(duì)照組（86.76% vs 7.35%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;PODXL陽性表率與胃癌患者的腫瘤大小、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05）;胃癌Ⅲ～Ⅳ期的患者PODXL陽性表達(dá)情況高于Ⅰ～Ⅱ期（87.72% vs 63.63%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;PODXL在高、中分化的胃癌患者中的陽性表達(dá)率高于低分化的胃癌患者（88.06% vs 0），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=6.553，P<0.05）。多因素Cox回歸分析顯示，PODXL蛋白呈陽性表達(dá)、胃癌組織低分化及TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期是胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P<0.05）。結(jié)論：PODXL蛋白在胃癌組織中的表達(dá)顯著升高，推測(cè)其含量的增多推動(dòng)了胃癌組織的增生、分化及發(fā)展，可成為早期診斷胃癌及推測(cè)其疾病發(fā)展的生物學(xué)指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 PODXL蛋白; 臨床病理特征; 胃癌; 相關(guān)性分析

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.24.015 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2019）24-00-03

【Abstract】 Objective：To investigate the expression of PODXL protein in gastric cancer and its correlation with clinicopathological features and prognosis.Method：68 patients with gastric cancer and 68 healthy people in the same period were selected as observation objects to detect the changes of serum PODXL protein content in gastric cancer，and to analyze the correlation between the expression of PODXL protein and the pathological characteristics and prognosis of gastric cancer patients.Result：Compared with the control group，the positive expression rate of PODXL protein in gastric cancer group was significantly higher than that in control group（86.76% vs 7.35%），the difference was statistically significant（P<0.05）.The positive rate of ODXL was not correlated with tumor size，tumor location，lymph node metastasis and distant metastasis in patients with gastric cancer（P>0.05），but the positive expression of PODXL in patients with stage Ⅲ-Ⅳ gastric cancer was significantly higher than that in stage Ⅰ-Ⅱ（87.72% vs 63.63%）.The positive expression rate of PODXL in well and moderately differentiated gastric cancer patients was significantly higher than that in poorly differentiated gastric cancer patients（88.06% vs 0），and the difference was significant（字2=6.553，P<0.05）.Multivariate Cox regression analysis showed that PODXL protein was positive.Expression，poor differentiation and TNM stage of gastric cancer were independent prognostic risk factors in patients with gastric cancer（P<0.05）.Conclusion：The expression of PODXL protein in gastric cancer tissue is significantly increased.It is speculated that the increase of its content promotes the proliferation，differentiation and development of gastric cancer tissue，and can be used as a biological index for early diagnosis and disease development of gastric cancer.

【Key words】 PODXL protein; Clinicopathological features; Gastric cancer; Correlation analysis

First-authors address：Third Peoples Hospital of Yangxin County，Yangxin 435200，China

胃癌是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，在我國惡性腫瘤中發(fā)病率居首位，男性發(fā)生率高于女性，發(fā)病年齡多在50歲以上，西北及東部沿海地區(qū)發(fā)病率高于南方[1-2]。發(fā)病原因考慮與不良飲食生活習(xí)慣、環(huán)境影響、幽門螺桿菌感染、工作壓力過大及遺傳因素有關(guān)[3-4]，近年來，胃癌有呈年輕化發(fā)展的趨勢(shì)，其發(fā)病早期多數(shù)患者無明顯癥狀，少數(shù)人會(huì)出現(xiàn)惡心、嘔吐或是出現(xiàn)于胃炎、胃潰瘍類似的臨床癥狀，往往不能被患者重視，隨著疾病的發(fā)展，影響為功能時(shí)才會(huì)有較為明顯的癥狀，但缺乏特異性，這也是早期診斷率較低的原因之一[5]。PODXL蛋白是CD34家族唾液酸糖蛋白，有相關(guān)文獻(xiàn)研究顯示，其與多種腫瘤的侵襲、浸潤及不良預(yù)后存在相關(guān)性[6]。國內(nèi)對(duì)于PODXL蛋白的表達(dá)水平與胃癌組織發(fā)展過程中的作用的相關(guān)研究較少，本研究對(duì)PODXL蛋白在胃癌組織中的表達(dá)水平及與臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性分析進(jìn)行探討，詳情如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月-2019年3月筆者所在醫(yī)院收治的胃癌患者68例作為研究對(duì)象，納入患者無肝腎功能障礙、無身體其他臟器疾病、既往無化療治療史。男40例，女28例，平均年齡（64.12±10.09）歲;T1～T2期9例，T3～T4期59例;無淋巴轉(zhuǎn)移16例，淋巴轉(zhuǎn)移52例;無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移67例，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移1例;腫瘤分期：Ⅰ～Ⅱ期11例，Ⅲ～Ⅳ期57例。選擇本研究階段在筆者所在醫(yī)院體檢且機(jī)體各項(xiàng)指標(biāo)正常的健康者68例作為對(duì)照組，男39例，女29例，無臟器疾病、肝腎功能缺陷、腫瘤病史。本研究均獲得患者及其家屬同意，簽署知情同意書。

1.2 試驗(yàn)方法

將石蠟切片常規(guī)脫醋水化，100 ℃檸檬酸鈉抗原修復(fù)液中浸泡20 min，滴加3%過氧化氫于組織上避光15 min左右，用PBS沖洗，再滴加50 μl一抗工作液后置于室溫中半小時(shí)，用PBS沖洗3 min，切片置濕盒內(nèi)滴加50 μl顯色液于組織上，室溫孵育5 min，用蒸餾水終止顯色，各級(jí)酒精脫水3 min、樹脂封片，在光學(xué)顯微鏡下觀察。檸檬酸鈉抗原修復(fù)液購自碧云天生物技術(shù)，GTVisionⅢ免疫組化試劑盒購自GeneTech公司，甲醇等有機(jī)試劑購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司。

1.3 結(jié)果判定

按細(xì)胞著色程度評(píng)分，0分為無著色、1分為淺黃色、2分為棕黃色、3分為棕褐;每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，陽性細(xì)胞率=（陽性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)）×100%。陽性細(xì)胞率和著色強(qiáng)度積分情況相加，分為陰性（-），弱陽性（+），陽性（++），強(qiáng)陽性（+++）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，采用Cox風(fēng)險(xiǎn)比例回歸模型多因素分析影響胃癌預(yù)后的獨(dú)立相關(guān)因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PODXL蛋白表達(dá)水平

與對(duì)照組相比，胃癌患者組PODXL蛋白的陽性表達(dá)率顯著高于對(duì)照組（86.76% vs 7.35%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 PODXL陽性表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系

PODXL陽性表率與胃癌患者的腫瘤大小、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05）;胃癌Ⅲ～Ⅳ期的患者PODXL陽性表達(dá)情況高于Ⅰ～Ⅱ期（87.72% vs 63.63%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;PODXL在高、中分化的胃癌患者中的陽性表達(dá)率高于低分化的胃癌患者（88.06% vs 0），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=6.553，P<0.05），見表2。

2.3 影響預(yù)后的多因素分析

經(jīng)多因素回歸分析顯示，PODXL蛋白呈陽性表達(dá)、胃癌組織低分化及TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期是胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P<0.05），見表3。

3 討論

據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年胃癌病例正逐年增加，世界上每年約有70萬人死亡胃癌，此疾病嚴(yán)重威脅著人類的生命安全，誘導(dǎo)胃癌發(fā)生的因素大致分為環(huán)境因素和遺傳因素[7]，目前對(duì)此疾病主要采取手術(shù)治療和圍術(shù)期化療的方式，隨著醫(yī)學(xué)水平的不斷發(fā)展，胃癌的治療水平不斷提升，但仍上有許多患者死于胃癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[8]。因此，早期診斷篩查和尋找合適的生物標(biāo)志物，對(duì)于患者預(yù)后而言，是至關(guān)重要的。近年來，PODXL蛋白等生物分子檢驗(yàn)正成為臨床研究的熱門，而國內(nèi)對(duì)于PODXL蛋白用于胃癌診斷及預(yù)后的臨床相關(guān)研究較少[9-10]，本研究主要對(duì)PODXL蛋白在胃癌組織中的表達(dá)水平及與臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性分析進(jìn)行探討。

PODXL蛋白屬Ⅰ型跨膜糖蛋白，是富含負(fù)電荷的唾液酸糖蛋白，近年來，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)其與多種腫瘤的轉(zhuǎn)移及發(fā)展相關(guān)，其確切機(jī)制尚不十分明確。本研究顯示，與對(duì)照組相比，胃癌患者組PODXL蛋白的陽性表達(dá)率顯著高于對(duì)照組，差異顯著，說明陽性表達(dá)率越高的患者其PODXL蛋白含量也越高。本研究發(fā)現(xiàn)，PODXL陽性表率與胃癌患者的腫瘤大小、腫瘤位置、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無太大相關(guān)性;而不同分期及腫瘤分化情況有顯著差異，Ⅲ～Ⅳ期的患者PODXL陽性表達(dá)情況高于Ⅰ～Ⅱ期，PODXL在高、中分化的胃癌患者中的陽性表達(dá)率高于低分化的胃癌患者;說明PODXL蛋白在病情高中分化及后期的患者中表達(dá)水平較高，推測(cè)PODXL蛋白通過介導(dǎo)侵襲，參與了胃癌細(xì)胞的生存及凋亡。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，PODXL蛋白呈陽性表達(dá)、胃癌組織分化程度及TNM分期是胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，PODXL蛋白通過影響下游的AKT的磷酸化調(diào)控了胃癌細(xì)胞的發(fā)展和遷移;此外PODXL蛋白還可以通過控制Caspase家族對(duì)細(xì)胞凋亡進(jìn)行調(diào)控，PODXL支持線粒體途徑的Caspase9的激活引起細(xì)胞內(nèi)的凋亡，推測(cè)PODXL蛋白介導(dǎo)了胃癌組織的發(fā)展[11-12]。